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伪狂犬病病毒糖蛋白gp50基因的克隆和表达
被引量:
3
1
作者
娄高明
郭万柱
+3 位作者
韩素文
张宏权
王新平
费恩阁
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
1996年第3期226-233,共8页
从包含伪狂犬病病毒(PRV)闽A株BamHI-7片段的重组质粒pPR128中分离出含有完整糖蛋白gp50基因的2.1kbDNA片段,用KpnI和StuI酶切后,将其酶切片段分别克隆到pUC19载体中,构建了2.1kb...
从包含伪狂犬病病毒(PRV)闽A株BamHI-7片段的重组质粒pPR128中分离出含有完整糖蛋白gp50基因的2.1kbDNA片段,用KpnI和StuI酶切后,将其酶切片段分别克隆到pUC19载体中,构建了2.1kb片段完整测序用质粒。对其序列进行分析,发现与文献报道结果一致,证明分离的gp50基因是正确的。将包含gp50基因的2.1kb和1.6kbDNA片段分别插入带有痘苗病毒天坛株TK基因区段的pGJP-5质粒P7.5启动子的下游,构建了pGBT50-36和pGBT50-S22个嵌合载体。将嵌合载体通过磷酸钙共沉淀法转染预先感染TK+痘苗病毒天坛株的人TK-143细胞或CV-1细胞,进行体内同源重组。经蚀斑纯化,在BdUR选择压力下,通过光敏生物素标记的探针杂交,获得带有PRVgp50基因的重组痘苗病毒。用ELISA检测,重组痘苗病毒有特异性PRVgp50抗原存在。
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关键词
伪狂犬病
病毒
gp50
重组痘苗病毒
克隆
表达
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职称材料
PRV特异性糖蛋白gp50基因片段的克隆探针制备
被引量:
5
2
作者
魏伟
王正党
+5 位作者
冉多亮
黄嘉驷
孟颖
秋阳
叶志远
魏文进
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
1998年第5期457-459,共3页
在BHK21细胞中增殖伪狂犬病病毒(PRV),提纯PRVDNA,选编码特异性糖蛋白gp50基因中的262bp片段进行PCR扩增。扩增产物经KpnⅠ和SalⅠ双酶切后,将222bp片段与质粒pUC19连接构成重组子pU...
在BHK21细胞中增殖伪狂犬病病毒(PRV),提纯PRVDNA,选编码特异性糖蛋白gp50基因中的262bp片段进行PCR扩增。扩增产物经KpnⅠ和SalⅠ双酶切后,将222bp片段与质粒pUC19连接构成重组子pUP。通过转化大肠杆菌JM83、Ampr和α互补效应筛选后,扩增、提纯重组子pUP,用KpnⅠ和SalⅠ酶切,电泳回收克隆的222bp片段。用光敏生物素标记222bp片段和重组子pUP制备的探针,分别检出46.8pg和93.6pg的PRVDNA,且pUP探针只与PRV呈杂交阳性反应,与HSV-1、HSV-2及CMV呈阴性反应。
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关键词
伪狂犬病病毒
gp50
基因
无性系
光敏生物素
探针
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职称材料
GP50主焊线下车体到总拼输送方案
3
作者
林骥
牛毅峰
刘瑞军
《汽车制造业》
2012年第11期66-69,共4页
GP50是上汽通用五菱(SGMW)的第一台乘用车,对产品焊接工艺的要求不同干商用车的要求,下车体总成工件转运到总拼工位之前,需对下车体焊点质量和数量等相关内容进行抽查。传统的滑触线输送方式无法满足此要求,
关键词
gp50
输送方案
车体
焊线
上汽通用五菱
焊接工艺
焊点质量
输送方式
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职称材料
Windows 95抓图大师GP50
4
作者
华彪
《电脑技术——Hello-IT》
1997年第5期28-31,共4页
关键词
WINDOWS95
gp50
抓图功能
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职称材料
应用聚合酶链反应检测伪狂犬病病毒DNA
被引量:
4
5
作者
冉多良
王正党
+3 位作者
魏伟
黄嘉驷
韩新兵
邱扬
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
1994年第4期366-368,共3页
选用标准的伪狂犬病病毒(PRV)闽A株,经BHK21细胞培养,提取PRVDNA作为摸板;合成1对20-mer寡核苷酸作为引物;选择扩增序列由262个碱基对组成的位于编码多糖蛋白gp50基因,用耐热的Taq-DNA聚合...
选用标准的伪狂犬病病毒(PRV)闽A株,经BHK21细胞培养,提取PRVDNA作为摸板;合成1对20-mer寡核苷酸作为引物;选择扩增序列由262个碱基对组成的位于编码多糖蛋白gp50基因,用耐热的Taq-DNA聚合酶经30个循环以后,扩增的产物直接用凝胶电泳检测,并用标准分子量确定。结果表明:以PRVDNA作为模板进行扩增,有扩增产物生成,以同科的疱疹病毒DNA作为模板在相同的条件下进行PCR扩增,无扩增产物生成,说明PRVPCR扩增是特异的。PCR技术检测PRVDNA敏感度为28.5pg.PRVPCR技术的建立,为伪狂犬病诊断和流行病学研究提供了更敏感、可靠的手段。
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关键词
伪狂犬病
病毒
PCR
多糖蛋白
gp50
基因
核酸电泳
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职称材料
应用PCR检测伪狂犬病病毒DNA
6
作者
邹莹
《畜牧兽医科技信息》
1995年第12期2-2,共1页
新疆八一农学院动物医学系冉多良等利用聚合酶链反应(PCR)检测伪狂犬病病毒(PRV)DNA。他们选用标准的伪狂犬病毒闽A株DNA作为模板,合成一对20—mer寡核苷酸作为引物,选择扩增的序列由262个碱基对组成的位于编码多糖蛋白gp50基因。
关键词
伪狂犬病病毒
PCR检测
病毒DNA
伪狂犬病毒
gp50
基因
PCR扩增
选用标准
流行病学研究
动物医学
链反应
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职称材料
题名
伪狂犬病病毒糖蛋白gp50基因的克隆和表达
被引量:
3
1
作者
娄高明
郭万柱
韩素文
张宏权
王新平
费恩阁
机构
解放军农牧大学生物工程室
出处
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
1996年第3期226-233,共8页
基金
国家自然科学基金
文摘
从包含伪狂犬病病毒(PRV)闽A株BamHI-7片段的重组质粒pPR128中分离出含有完整糖蛋白gp50基因的2.1kbDNA片段,用KpnI和StuI酶切后,将其酶切片段分别克隆到pUC19载体中,构建了2.1kb片段完整测序用质粒。对其序列进行分析,发现与文献报道结果一致,证明分离的gp50基因是正确的。将包含gp50基因的2.1kb和1.6kbDNA片段分别插入带有痘苗病毒天坛株TK基因区段的pGJP-5质粒P7.5启动子的下游,构建了pGBT50-36和pGBT50-S22个嵌合载体。将嵌合载体通过磷酸钙共沉淀法转染预先感染TK+痘苗病毒天坛株的人TK-143细胞或CV-1细胞,进行体内同源重组。经蚀斑纯化,在BdUR选择压力下,通过光敏生物素标记的探针杂交,获得带有PRVgp50基因的重组痘苗病毒。用ELISA检测,重组痘苗病毒有特异性PRVgp50抗原存在。
关键词
伪狂犬病
病毒
gp50
重组痘苗病毒
克隆
表达
Keywords
pseudorabies virus
recombinant vaccinia virus
gp50
gene
loning
expression Sichuan Agricultural University Institute of Biological Engineering,Acadeiny of Military Medical Sciences
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
PRV特异性糖蛋白gp50基因片段的克隆探针制备
被引量:
5
2
作者
魏伟
王正党
冉多亮
黄嘉驷
孟颖
秋阳
叶志远
魏文进
机构
新疆军区后勤部卫生防疫大队
出处
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
1998年第5期457-459,共3页
基金
新疆维吾尔自治区科委资助
文摘
在BHK21细胞中增殖伪狂犬病病毒(PRV),提纯PRVDNA,选编码特异性糖蛋白gp50基因中的262bp片段进行PCR扩增。扩增产物经KpnⅠ和SalⅠ双酶切后,将222bp片段与质粒pUC19连接构成重组子pUP。通过转化大肠杆菌JM83、Ampr和α互补效应筛选后,扩增、提纯重组子pUP,用KpnⅠ和SalⅠ酶切,电泳回收克隆的222bp片段。用光敏生物素标记222bp片段和重组子pUP制备的探针,分别检出46.8pg和93.6pg的PRVDNA,且pUP探针只与PRV呈杂交阳性反应,与HSV-1、HSV-2及CMV呈阴性反应。
关键词
伪狂犬病病毒
gp50
基因
无性系
光敏生物素
探针
Keywords
pseudorabies virus
gp50
gene
clone
photobiotin
probe
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
GP50主焊线下车体到总拼输送方案
3
作者
林骥
牛毅峰
刘瑞军
机构
上汽通用五菱汽车股份有限公司
出处
《汽车制造业》
2012年第11期66-69,共4页
文摘
GP50是上汽通用五菱(SGMW)的第一台乘用车,对产品焊接工艺的要求不同干商用车的要求,下车体总成工件转运到总拼工位之前,需对下车体焊点质量和数量等相关内容进行抽查。传统的滑触线输送方式无法满足此要求,
关键词
gp50
输送方案
车体
焊线
上汽通用五菱
焊接工艺
焊点质量
输送方式
分类号
U463.82 [机械工程—车辆工程]
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职称材料
题名
Windows 95抓图大师GP50
4
作者
华彪
出处
《电脑技术——Hello-IT》
1997年第5期28-31,共4页
关键词
WINDOWS95
gp50
抓图功能
分类号
TP316 [自动化与计算机技术—计算机软件与理论]
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职称材料
题名
应用聚合酶链反应检测伪狂犬病病毒DNA
被引量:
4
5
作者
冉多良
王正党
魏伟
黄嘉驷
韩新兵
邱扬
机构
新疆八一农学院动物医学系
出处
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
1994年第4期366-368,共3页
文摘
选用标准的伪狂犬病病毒(PRV)闽A株,经BHK21细胞培养,提取PRVDNA作为摸板;合成1对20-mer寡核苷酸作为引物;选择扩增序列由262个碱基对组成的位于编码多糖蛋白gp50基因,用耐热的Taq-DNA聚合酶经30个循环以后,扩增的产物直接用凝胶电泳检测,并用标准分子量确定。结果表明:以PRVDNA作为模板进行扩增,有扩增产物生成,以同科的疱疹病毒DNA作为模板在相同的条件下进行PCR扩增,无扩增产物生成,说明PRVPCR扩增是特异的。PCR技术检测PRVDNA敏感度为28.5pg.PRVPCR技术的建立,为伪狂犬病诊断和流行病学研究提供了更敏感、可靠的手段。
关键词
伪狂犬病
病毒
PCR
多糖蛋白
gp50
基因
核酸电泳
Keywords
pseudorabies
glycoprotein
gp50
gene
PCR
nucleotide electrophore-sis
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
应用PCR检测伪狂犬病病毒DNA
6
作者
邹莹
出处
《畜牧兽医科技信息》
1995年第12期2-2,共1页
文摘
新疆八一农学院动物医学系冉多良等利用聚合酶链反应(PCR)检测伪狂犬病病毒(PRV)DNA。他们选用标准的伪狂犬病毒闽A株DNA作为模板,合成一对20—mer寡核苷酸作为引物,选择扩增的序列由262个碱基对组成的位于编码多糖蛋白gp50基因。
关键词
伪狂犬病病毒
PCR检测
病毒DNA
伪狂犬病毒
gp50
基因
PCR扩增
选用标准
流行病学研究
动物医学
链反应
分类号
S854.4 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
伪狂犬病病毒糖蛋白gp50基因的克隆和表达
娄高明
郭万柱
韩素文
张宏权
王新平
费恩阁
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
1996
3
下载PDF
职称材料
2
PRV特异性糖蛋白gp50基因片段的克隆探针制备
魏伟
王正党
冉多亮
黄嘉驷
孟颖
秋阳
叶志远
魏文进
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
1998
5
下载PDF
职称材料
3
GP50主焊线下车体到总拼输送方案
林骥
牛毅峰
刘瑞军
《汽车制造业》
2012
0
下载PDF
职称材料
4
Windows 95抓图大师GP50
华彪
《电脑技术——Hello-IT》
1997
0
下载PDF
职称材料
5
应用聚合酶链反应检测伪狂犬病病毒DNA
冉多良
王正党
魏伟
黄嘉驷
韩新兵
邱扬
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
1994
4
下载PDF
职称材料
6
应用PCR检测伪狂犬病病毒DNA
邹莹
《畜牧兽医科技信息》
1995
0
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职称材料
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