P19细胞向心肌样细胞分化前后gp91-phox的变化

目的:探讨诱导P19细胞向心肌样细胞分化前后gp91-phox水平的变化。方法:P19细胞经0.9%二甲基亚砜(DMSO)于细菌培养皿中悬浮诱导培养4 d,待细胞聚集体形成,吸取聚集体接种于组织培养皿,贴壁培养至第13天。行Western blot检测肌钙蛋白I(cTnI),以鉴定心肌样细胞的分化,并检测P19细胞向心肌样细胞分化前后细胞中gp91-phox蛋白水平。结果:(1)经0.9%DMSO诱导分化,P19细胞于第7天开始表达cTnI,随后cTnI表达明显增高并趋于稳定;(2)P19细胞分化为心肌样细胞后细胞内gp91-phox蛋白水平较分化前高(P<0.05)。结论:P19细胞向心肌样细胞分化后gp91-phox表达上调,氧化应激水平增加。

β-谷甾醇诱导口腔鳞状细胞癌SCC9细胞凋亡及机制研究

目的:研究_β-谷甾醇对口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)细胞SCC9的作用及分子机制,以期为_β-谷甾醇应用于临床治疗OSCC等肿瘤提供理论支持。方法:采用不同浓度的_β-谷甾醇体外作用于培养中的SCC9细胞,观察SCC9的凋亡发生情况,同时检测SCC9胞浆内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平改变及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)氧化酶gp91^(phox)基因及蛋白表达水平;通过小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)技术抑制SCC9细胞中gp91^(phox)的表达对其功能进行确认。结果:结果显示,相较于对照组细胞,β-谷甾醇显著诱导其凋亡,且呈浓度依赖性(P<0.01);β-谷甾醇显著提高SCC9胞浆内ROS水平,促进gp91^(phox)的表达(P<0.01);抑制gp91^(phox)表达可阻断_β-谷甾醇对SCC9的促凋亡作用(P<0.01)。结论:β-谷甾醇可有效诱导SCC9细胞凋亡,且NADPH氧化酶gp91^(phox)在其中起关键调控作用,可作为临床治疗的潜在靶点之一。