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噬菌体phi29末端酶gp16蛋白C端结构域在溶液中的构象分析
被引量:
1
1
作者
武飞飞
蔡汝洁
+2 位作者
陈婷
张云龙
陆昌瑞
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2019年第3期305-312,共8页
噬菌体phi29是一种双链DNA病毒,它的增殖和成熟过程需要将较大的子代DNA包装入一个空间极其有限的新生病毒衣壳中,这一步骤由其转运马达完成.转运马达具有三个部分:头颈连接器蛋白(the connector)、pRNA和ATP水解酶蛋白(gp16).在结构预...
噬菌体phi29是一种双链DNA病毒,它的增殖和成熟过程需要将较大的子代DNA包装入一个空间极其有限的新生病毒衣壳中,这一步骤由其转运马达完成.转运马达具有三个部分:头颈连接器蛋白(the connector)、pRNA和ATP水解酶蛋白(gp16).在结构预测中发现gp16蛋白的C端结构域可能与pRNA或DNA结合,但尚未有相关文献可以证明这种相互作用,因此其结构的解析成为研究其功能的关键.本文利用大肠杆菌SUMO表达系统,对噬菌体phi29 gp16蛋白的C端结构域进行重组构建并诱导表达后,通过Ni-NTA亲和层析纯化,再用分子排阻色谱获得高纯度的目的蛋白质单体,纯度达到95%左右.最后用X射线小角散射技术(small angle X-ray scattering)对其构象进行分析,收集小角散射数据,当目的蛋白的浓度为1.3 g/L、所得到的目的蛋白的三维结构与同源蛋白FtsK的晶体结构高度拟合,且通过CRYSOL软件反推计算的曲线与实验曲线高度重合.通过原核表达、纯化及结构分析,成功获得了该结构域在溶液中的状态信息.这一研究不仅为后续关于该结构域的功能研究奠定基础,也为病毒感染的诊断和治疗提供新思路.
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关键词
噬菌体phi29
gp16蛋白
C端结构域
X射线小角散射
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职称材料
题名
噬菌体phi29末端酶gp16蛋白C端结构域在溶液中的构象分析
被引量:
1
1
作者
武飞飞
蔡汝洁
陈婷
张云龙
陆昌瑞
机构
东华大学化学化工与生物工程学院
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2019年第3期305-312,共8页
基金
国家自然科学基金(31300603)
中央高校基本科研基金(17D310512
+1 种基金
2232014D3-39)
励志计划(18D210501)资助项目~~
文摘
噬菌体phi29是一种双链DNA病毒,它的增殖和成熟过程需要将较大的子代DNA包装入一个空间极其有限的新生病毒衣壳中,这一步骤由其转运马达完成.转运马达具有三个部分:头颈连接器蛋白(the connector)、pRNA和ATP水解酶蛋白(gp16).在结构预测中发现gp16蛋白的C端结构域可能与pRNA或DNA结合,但尚未有相关文献可以证明这种相互作用,因此其结构的解析成为研究其功能的关键.本文利用大肠杆菌SUMO表达系统,对噬菌体phi29 gp16蛋白的C端结构域进行重组构建并诱导表达后,通过Ni-NTA亲和层析纯化,再用分子排阻色谱获得高纯度的目的蛋白质单体,纯度达到95%左右.最后用X射线小角散射技术(small angle X-ray scattering)对其构象进行分析,收集小角散射数据,当目的蛋白的浓度为1.3 g/L、所得到的目的蛋白的三维结构与同源蛋白FtsK的晶体结构高度拟合,且通过CRYSOL软件反推计算的曲线与实验曲线高度重合.通过原核表达、纯化及结构分析,成功获得了该结构域在溶液中的状态信息.这一研究不仅为后续关于该结构域的功能研究奠定基础,也为病毒感染的诊断和治疗提供新思路.
关键词
噬菌体phi29
gp16蛋白
C端结构域
X射线小角散射
Keywords
phage phi29
gpl6 protein
C temiinal
small angle X-ray scattering
分类号
Q518.2 [生物学—生物化学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
噬菌体phi29末端酶gp16蛋白C端结构域在溶液中的构象分析
武飞飞
蔡汝洁
陈婷
张云龙
陆昌瑞
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2019
1
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职称材料
已选择
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