HPLC梯度洗脱法测定雷公藤多苷片中甲素的含量

目的建立以梯度洗脱测定市售雷公藤多苷片中甲素含量的方法。方法采用HPLC以甲醇-水为流动相梯度洗脱;流速为0.9ml/min;柱温为25℃;检测波长为218 nm。结果线性范围为0.65~41.68μg/ml,r=0.9998,平均回收率103.43%,RSD=0.96%(n=9)。结论梯度洗脱法比现行质量标准的检测方法重复性更好、精密度更高。可作为雷公藤制剂中甲素的定量检测方法。

HPLC法同时测定盐酸阿霉素与氯尼达明的含量

目的建立同时测定盐酸阿霉素(DOX·HCl)与氯尼达明(LND)含量的测定方法。方法采用HPLC法,色谱柱为Agilent 5 HC-C_(18)(2)(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%TFA水溶液,梯度洗脱,甲醇比例随时间变化为:0~3 min,65%甲醇;3~7 min,65%→90%甲醇;7~13 min,90%甲醇;13~15 min,90%→65%甲醇;15~20 min、65%甲醇。采集时间20 min,平衡时间3 min,紫外检测波长205 nm及253 nm,流速1.0 ml/min,柱温35℃,进样量:10μl。结果该方法专属性好,盐酸阿霉素在1~40μg/ml的浓度范围内线性良好,氯尼达明在6~240μg/ml的浓度范围内线性良好。该方法之下,两种化合物的精密度、稳定性、回收率均符合要求。结论建立了同时检测盐酸阿霉素与氯尼达明含量的液相分析方法,该方法专属性强,准确可靠。

HPLC法测定滴眼液中5种常用抑菌剂的含量

目的:建立HPLC法测定滴眼液中5种抑菌剂。方法:采用Waters SunFire C _(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以1%三乙胺溶液(用磷酸调pH至3.0)-甲醇为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL·mi^(n-1),测定波长为214 nm和262 nm。结果:5种抑菌剂可完全分离,线性关系均良好,r均大于0.999,重复性、精密度、稳定性RSD值均小于1%,回收率为98%~105%,RSD为1.2%~4.2%。对19批次滴眼液的考察,大多数标示了抑菌剂种类和浓度的滴眼液,测定结果与标示量一致。结论:本方法能同时测定常用5种抑菌剂的含量,可为滴眼液中抑菌剂的质量控制提供参考。

HPLC法测定奥卡西平及其制剂中有关物质

目的:建立使用C 18色谱柱同时测定奥卡西平及其制剂中8个杂质的高效液相色谱法。方法:采用ACE Excel C 18(4.6 mm×150 mm,3μm)色谱柱,流速1.0 mL·min^(-1),以6.8 g·L^(-1)磷酸二氢钾溶液(每1000 mL加三乙胺2 mL,用磷酸调pH 6.0)为流动相A,乙腈-甲醇(11∶8)为流动相B,梯度洗脱,检测波长240 nm,柱温45℃。结果:奥卡西平与8个杂质分离度良好,奥卡西平和卡马西平分别在0.05~4.0μg·mL^(-1)和0.08~40μg·mL^(-1)浓度范围内呈现良好线性(r≥0.9999),奥卡西平和卡马西平的定量限分别为1.03、0.65 ng,检测限分别为0.34、0.33 ng。共测定奥卡西平原料2个企业5批样品、奥卡西平片2个企业6批样品,其中1批原料检出杂质E,含量为0.004%;3批片剂检出卡马西平,含量分别为0.008%、0.005%、0.006%;1批片剂检出杂质C和杂质D,含量为0.006%、0.005%;单个最大未知杂质含量在0.02%~0.20%范围内,杂质总量在0.02%~0.32%范围内。结论:本法使用小粒径色谱柱节省检测时间,为进一步完全奥卡西平及其制剂的质量评价提供依据。

HPLC法测定注射用头孢呋辛钠含量的方法优化

目的:建立优化HPLC法测定注射用头孢呋辛钠含量的方法,以醋酸盐缓冲液(取醋酸钠0.68 g,冰醋酸5.8 g,加水稀释成1000 mL,用冰醋酸调节pH值至3.4)为流动相A,以乙腈为流动相B,梯度洗脱。流速:1.0 mL/min,柱温:30℃,检测波长:273 nm;进样体积:20 u。结果:头孢呋辛在0.025~0.5 mg/mL浓度范围之间线性良好,R=1.0000;平均回收率为:99.8%;RSD=0.3%(n=6)。结论:头孢呋辛主峰与杂质峰的分离度达到3.0以上,结果准确稳定,同时适合不同品牌的C8色谱柱,可用于头孢呋辛钠的含量测定。

RP-HPLC梯度洗脱法测定盐酸金霉素有关物质方法研究

目的 建立准确可靠的RP-HPLC梯度洗脱法用于测定盐酸金霉素原料药有关物质。方法 采用Ultimate XB-C8色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以高氯酸-水-二甲基亚砜(16∶934∶525)(pH<2.0)、乙腈、甲醇分别作为流动相A、B、C,进行梯度洗脱;柱温为45℃;检测波长为280 nm;流速为0.8 mL/min。结果 与《中国药典》2020年版相比,检出杂质多2个,盐酸金霉素与11个已知杂质分离度良好。13批样品均检出6个已知杂质,除盐酸四环素、4-差向金霉素外,还检出杂质B、E、J、L,其中杂质B、E为主要其他杂质。结论 该方法适用性好、专属性强,可真实反映盐酸金霉素有关物质状况,为其质量控制提供方法支撑。

HPLC法测定甲磺酸左氧氟沙星氯化钠注射液中有关物质

目的:建立高效液相色谱法测定甲磺酸左氧氟沙星氯化钠注射液中有关物质。方法:采用十八烷基硅烷键合硅胶(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以醋酸铵高氯酸钠溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1),柱温40℃,检测波长为294 nm和238 nm。结果:在该色谱条件下,左氧氟沙星与各杂质均能有效分离,左氧氟沙星、杂质A的定量限分别为0.120 0μg·mL^(-1)、0.371 2μg·mL^(-1),左氧氟沙星和杂质A分别在0.600 1~4.801μg·mL^(-1)和0.742 5~5.940μg·mL^(-1)范围内与其峰面积呈良好线性关系(r=1.000),左氧氟沙星、杂质A回收率(n=9)分别在97.86%~101.22%和99.65%~101.82%之间,重复性、精密度、稳定性等均符合规定。5批甲磺酸左氧氟沙星氯化钠注射液样品测定结果显示,杂质A均未检出,其他最大杂质含量在0.02%~0.08%,杂质总量在0.02%~0.15%。结论:经方法学验证,本方法灵敏、快速、专属性强、准确度高,可用于甲磺酸左氧氟沙星氯化钠注射液有关物质的测定。

HPLC梯度洗脱法测定防风中4种主要成分含量

目的:在原有防风HPLC含量测定方法基础上改进测定条件。方法:应用HPLC法,以防风中4种主要成分为指标;采用Alltima C18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-水梯度洗脱,流速1.0 mL.min-1。结果:运用梯度洗脱,建立防风中防风色原酮Ⅰ葡萄糖苷,防风色原酮Ⅱ葡萄糖苷,防风色原酮Ⅰ,防风色原酮Ⅲ葡萄糖苷的HPLC含量测定方法,与前方法相比测定结果无显著性差异。结论:HPLC梯度洗脱法测定防风中4种主要成分含量比原方法(两种流动相系统)简便、易于操作。

HPLC同时测定双黄连注射剂中氯原酸和黄芩苷2种指标成份含量

目的：探讨双黄连注射液２ 种指标成分含量的测定方法，控制其质量。方法：应用甲醇水溶液（ 磷酸调ｐＨ至２ ．７） 为流动相，在ＯＤＳＣ１８ 柱上梯度洗脱，外标法定量，绿原酸和黄芩苷２ 种指标成分含量可以同时定量。结果：３ 批样品中氯原酸的含量分别为０ ．７０ ％ ，０ ．７４ ％ 和０ ．７５ ％ （ｍｇｍｇ） ，黄芩苷的含量分别为１０ ．６７ ％ ，１０ ．２５ ％ 和１１ ．３８ ％ （ｍｇｍｇ） 。结论：该方法简便、快速、灵敏，适合于双黄连粉针剂的质量控制。

梯度洗脱HPLC法测定盐酸平阳霉素及注射药物中的有关物质

目的建立梯度洗脱HPLC法测定盐酸平阳霉素及注射用盐酸平阳霉素中的有关物质。方法采用C18(150mm×4.6mm,5μm)色谱柱,己烷磺酸钠溶液(己烷磺酸钠7.53g与乙二胺四乙酸二钠3.72g以0.08mol/L乙酸溶液溶解并稀释至1000ml,用氨溶液调节pH为4.3)为流动相A,甲醇∶乙腈(70∶30)为流动相B,梯度洗脱,流速1.0ml/min,检测波长254nm,柱温30℃。结果盐酸平阳霉素溶液在10～500μg/ml范围内,溶液浓度与峰面积呈良好线性关系,r=0.9999;最低检测浓度1μg/ml。结论本法可用于测定盐酸平阳霉素及注射用盐酸平阳霉素中的有关物质。

HPLC测定附子及其炮制品中3种双酯型生物碱的含量

目的：建立同时测定附子中3种双酯型生物碱——新乌头碱、乌头碱、次乌头碱含量的HPLC分析方法。方法：Zorbax Eclipse XDB C18柱，40mmol乙酸铵缓冲液-乙腈，梯度洗脱，流速1.0mL·min^-1，检测波长230nm。结果：3种双酯型生物碱新乌头碱、乌头碱、次乌头碱均达到了较好的分离，分别在0．0357-1.784μg（r=0．9999），0.0126-0．632μg（r=0．9997）和0．0334-1．672μg（r=0．9997）呈良好的线形关系。结论：该方法简便、快速、灵敏，可有效地用于附子的鉴别和内在质量控制。

奥氮平有关物质的HPLC检查法研究

为研究奥氮平有关物质检查的HPLC分离方法,比较不同色谱柱、不同柱长和不同洗脱形式,其中3种色谱柱分别为C18柱(150mm×4.6mm×5μm)、C8柱(150mm×4.6mm×5μm)和C8柱(250mm×4.6mm×5μm),洗脱形式分别为梯度洗脱和恒比例洗脱。杂质的分离个数依次为自建法(n=6)、美国药典法(USP,n=5)和国家药品标准法(WS,n=4);分离度USP法表现最佳(r=3.63),而WS法最差(r=1.38),但是WS法有最高的杂质检出灵敏度。综上结果表明,自建法具有分析时间较短、分离度较高、基线平稳、灵敏度较高等特点,为奥氮平有关物质限量检查的较好方法。

桑椹的HPLC指纹图谱研究方法的建立

用HPLC-DAD技术对桑椹进行指纹图谱研究,建立了桑椹HPLC指纹图谱的研究方法,并确定的HPLC的操作条件,即:色谱柱:HypersilODS5μm,250×4.0mm,检测器:DAD(360nm),柱温:30℃,流速:1.0ml/min,流动相选择0.05%磷酸(pH￣3)-乙睛系统,梯度Min:0-15-50-55,CH3OH%:15-15-70-70。

葛根药材HPLC指纹图谱研究

目的 :对不同来源的葛根药材指纹图谱比较研究。方法 :应用RP HPLC法、KromasilC18分析柱、乙腈 水二元梯度洗脱 ,流速为 1.0mL·min-1,检测波长 2 5 0nm。结果与结论 :不同来源的葛根药材所含黄酮类成分均得到很好的分离 ,该法可用于鉴别葛根的品种 ,并为葛根注射液及含葛根药材的中药复方注射液指纹图谱研究奠定基础。

不同产地掌叶大黄HPLC指纹图谱的比较

目的 应用RP HPLC (DAD)对不同产地掌叶大黄药材进行指纹图谱比较。方法 用InertsilODS 3分析柱 ,1%HAc H2 O与 1%HAc CH3 CN梯度洗脱 ,流速 1mL/min ,柱温 30℃ ,检测波长 2 80nm ,参比波长 380nm。结果 建立了HPLC指纹图谱共有模式 ,并对其他产地药材进行了相似度比较。结论 对大黄药材中各成分均得到很好分离 ,可作为大黄药材的具有专属性的指纹图谱。

甘草HPLC指纹图谱研究

目的:建立乌拉尔甘草(Glycyrrhiza uralensis Fisch)的HPLC指纹图谱。方法:采用反相高效液相色谱法,选用APOLLOC_8柱(250 mm×4.6 mm,5μm),甲醇-0.5%冰醋酸为流动相梯度洗脱,采集时间为80 min,流速为1.0 ml·min^(-1)。结果:建立甘草药材的HPLC指纹图谱,标定甘草药材14个共有峰,方法学考察结果符合指纹图谱技术要求。结论:该方法稳定,准确,可靠,为今后甘草药材质量控制提供科学依据。

HPLC法测定奥曲肽的含量及其有关物质

目的:建立高效液相色谱法测定奥曲肽的含量及其有关物质。方法:采用Lichrospher-C_(18)色谱柱(200mm×4.6mm,5μm),流动相A为含0.1％三氟乙酸的水溶液,流动相B为含0.1％三氯乙酸的乙腈溶液,采用梯度洗脱,流动相B在20min内从20％升至40％,流速1.5mL·min^(-1),检测波长215nm。结果:HPLC法测定的线性范围为40.8～142.8μg·mL^(-1),r=0.9999,最低检测限量为1ng,本方法重复性和精密度良好(RSD<2％)。结论:采用HPLC梯度洗脱法测定奥曲肽的含量及其有关物质,方法简便,结果准确。

丹参葡萄糖注射液的HPLC指纹图谱研究

目的研究丹参葡萄糖注射液的HPLC指纹图谱测定方法。方法以原儿茶醛为对照品,应用HPLC法,色谱柱:AlltimaC18(4.6mm×250mm,5μm);流动相:1%冰醋酸水∶1%冰醋酸甲醇,梯度洗脱;检测波长:281nm;分析时间:65min;流速:1.0mL/min;结果标示出丹参葡萄糖注射液6个共有峰,并用HPLC/MS对主要成分进行了归属。结论该方法准确、重复性好,为丹参葡萄糖注射液的指纹图谱质量控制提供了依据。

梯度洗脱HPLC法测定皮科血毒清胶囊中栀子苷的含量

目的建立梯度洗脱HPLC法测定皮科血毒清胶囊中栀子苷含量。方法采用Nova PakC18(4 6mm× 2 5cm ,5 μm,Waters)色谱柱 ;流动相为乙腈 水 ,从 5 % (φ)～ 5 0 % (φ)的二元梯度洗脱 ;检测波长为 2 38nm。结果该方法的线性为 10 1～ 81 0mg·L-1(r =0 9995 ) ,平均回收率为98 1% ,RSD =2 2 % (n =9)。

改换HPLC色谱柱后梯度洗脱程序调整规律的探讨

目的:探讨以C_(18)快速色谱柱替代常规色谱柱实现HPLC快速梯度分析时,梯度洗脱程序的调整规律。方法:采用Allti- ma C_(18)高速色谱柱(33mm×7mm,3μm;53mm×7mm,3μm)、Alltima C_(18)常规色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)及YMC C_(18)常规色谱柱(150mm×4.6mm,5μm);梯度洗脱;检测波长254nm;流速为0.8～2.5mL·min^(-1)。比较不同梯度洗脱程序下利奈唑胺及其14个有关物质的色谱行为。结果:色谱柱确定后,梯度变化率(ΔC_B/Δt_G)是决定色谱系统选择性的关键因素;在利用快速色谱柱替代普通色谱柱进行分离时,应根据具体分离情况调节流速,使色谱系统达到最佳;当HPLC梯度洗脱系统的流速改变后,应根据洗脱体积(FΔt_G)不变的原则重新确定梯度运行时间。结论:采用高速色谱柱时并相应地调整梯度程序,可顺利实现HPLC梯度洗脱快速分析。