痰标本革兰染色联合肺炎链球菌抗原检测快速诊断肺炎链球菌性肺炎

目的:探讨肺炎链球菌抗原快速检测联合痰涂片革兰染色在肺炎链球菌肺炎感染中的临床应用价值。方法:收集临床痰液标本分离得到的草绿色链球菌群、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、嗜麦芽窄食单胞菌、流感嗜血杆菌及卡他莫拉菌共8种细菌各5株,肺炎链球菌培养阳性的痰液标本30例及痰涂片镜下疑似肺炎链球菌且合格的痰液标本40例,利用BinaxNOW试剂盒进行胶体金法肺炎链球菌抗原检测。结果:痰标本中分离得到的8种细菌经抗原检测结果均为阴性;胶体金法检测30例肺炎链球菌培养阳性的痰液标本阳性率为100%;痰涂片联合抗原快速检测阳性率高于痰培养,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:痰液肺炎链球菌抗原检测法具有较好的特异性,与痰培养结果有较好的一致性,且痰涂片革兰染色联合抗原快速检测在早期鉴定肺炎链球菌肺部感染中具有较高的临床应用价值。

比较细菌培养法与革兰染色法在阴道细菌检验中的应用分析

目的:对比细菌培养法与革兰染色法在阴道细菌检验中的应用价值。方法:选取2021年10月-2022年10月佛山市第三人民医院就诊的120例细菌性阴道炎疑似患者进行研究,所有患者均经细菌培养法和革兰染色法行细菌检验,对比两种方式不同类型阴道细菌阳性检出率,以Amsel临床诊断标准为“金标准”,对比两种方式疾病诊断价值和不同致病菌检出率,另对比两种方式检查时间和满意度情况。结果:细菌培养法诊断阴道细菌的灵敏度为95.65%、特异度为82.14%、准确性为92.50%,阳性预测值为94.62%,阴性预测值为85.19%,革兰染色法诊断阴道细菌的灵敏度、特异度、准确性、阳性预测值和阴性预测值分别为83.70%、50.00%、75.83%、84.62%和48.28%,差异有统计学意义(P<0.05);细菌培养法对加特纳菌、棒状杆菌和肠球菌的检出率明显高于革兰染色法,差异有统计学意义(χ^(2)=6.628、4.694、7.336,P<0.05);细菌培养法检查时间为(4.21±1.18)h,长于革兰染色法的(0.44±0.08)h,差异有统计学意义(t=34.918,P<0.05);患者满意度高于革兰染色法,差异有统计学意义(Z=2.422,P<0.05)。结论:与革兰染色法比较,细菌培养法可准确诊断不同类型阴道细菌,灵敏度和特异度都比较强,患者更为满意。但前者耗时短,能够快速获得诊断结果,可根据临床需求合理选择检验方式。

无菌鼠细菌检测方法的选择与探讨

目的 比较培养法、革兰染色镜检法和16S rRNA PCR方法对无菌小鼠粪便样品细菌检测的检测性能,为无菌鼠细菌检测方法的选择提供依据。方法 利用培养法、革兰染色镜检法、16S rRNA PCR方法,分别检测GF小鼠粪便、SPF小鼠粪便以及已知含菌量的测试样品(无菌小鼠粪便与金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌混合,人为制作而成),验证3种方法对无菌小鼠粪便中细菌的检测限度;并同时使用3种方法检测临床样品,对比3种检测方法的优缺点,分析3种方法在实际检测中的可行性。结果 培养法、革兰染色镜检法和16S rRNA PCR方法检测灵敏度分别为102CFU/g、108CFU/g和106CFU/g,临床样品检测中阳性率均为1.36%(6/441)。结论 培养法、革兰染色镜检法、16S rRNA PCR法3种检测方法各有优缺点,需要联合使用,取长补短,确保检测结果的可靠。

尿沉渣革兰染色镜检在尿路感染诊断中的价值

目的:研究尿沉渣革兰染色镜检对尿路感染的诊断价值。方法:分析2021年8月-2021年12月632例送检清洁中段尿培养的门诊及住院患者结果,以临床诊断作为金标准,分析尿沉渣革兰染色镜检对尿路感染的诊断性能。结果:632例患者标本中尿培养阳性218例(34.5%),尿路感染最常见的病原菌为大肠埃希菌,其次为肠球菌属和葡萄球菌属。白细胞、菌量、尿培养的诊断比值比均大于1,白细胞的诊断比值比最高,菌量和尿培养的诊断比值比近似。以白细胞少量为诊断尿路感染的阈值,灵敏度和特异度均较高(分别为88%,79%),约登指数最大(0.67),诊断比值比最高(29.20)。尿沉渣革兰染色镜检观察到的病原菌形态学特征与培养结果一致。结论:尿沉渣革兰染色镜检作为一种快速筛查实验,在尿路感染诊断中具有较高临床价值。

Warthin-Starry银染色与Grams染色在诊断组织中幽门螺杆菌感染的作用比较

目的比较WarthinStarry(WS)银染色与Grams染色在组织学诊断幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,HP)感染中的作用。方法HE染色法判断所选组织的病理分型并进行分组;用WS银染色法结合Grams染色法判断所选组织HP的感染状况,比较两种不同染色方法的染色结果。结果WS银染色结果阳性率为85.5%,Grams染色结果阳性率为87.74%,两者比较差别无统计学意义(P>0.05)。结论WS银染色与Grams染色在组织学诊断HP感染中的作用无显著性差别,Grams染色可用于胃组织石蜡切片中HP感染的检查。

RAL-STAINER自动染色仪对抗酸染色的性能评估

目的 评估RAL-STAINER自动染色仪对抗酸染色的性能。方法 收集标本,分别进行手工抗酸染色和仪器抗酸染色,评价自动染色仪的染色效果的合格率与手工染色的染色结果的一致率、仪器染色的重复性、与室间质评预期结果的符合率、交叉污染和工作性能等。结果 RAL-STAINER自动染色仪对各类标本抗酸染色背景基本无杂质,细菌和细胞色泽鲜明、结构清楚,染色效果的合格率为100%。自动染色仪与手工抗酸染色一致率为100%。仪器染色的重复性为100%。使用自动染色仪,两次室间质评结果均100%符合预期。自动染色仪批量染色时,无交叉污染。自动染色仪操作简便、通量高、染色效果稳定、生物安全性好。结论RAL-STAINER自动染色仪对抗酸染色的性能较好。

快速革兰氏染色法对大、小鼠动情周期的鉴别

目的通过快速革兰氏染色法分别对SD雌性大鼠、C57BL/6J雌性小鼠进行阴道涂片染色,镜下观察细胞形态,为快速鉴别动情周期寻求简单易行的染色方法。方法12只SD雌性大鼠和12只C57BL/6J雌性小鼠,56~62日龄,每天9:00采用阴道拭子法获得阴道涂片,干燥后进行快速革兰氏染色法,连续观察12 d,于光镜下观察细胞形态,判断其动情周期阶段。结果快速革兰氏染色法用时较短,操作简单,观察视野色彩鲜明,背景干净,绘制完整的大、小鼠动情周期变化图。结论快速革兰氏染色法可简单、直观的判断大、小鼠动情周期,并优化染色步骤,对染色中出现的异常情况进行逐一分析,将每张涂片染色时间缩短至1 min以内,对实验新手易于掌握,可推广应用。

涂片检查快速染色在白带常规检验中的应用效果

目的探讨涂片检查快速染色在白带常规检验中的应用效果。方法回顾性选取2021年1月至2022年2月东莞市人民医院白带常规检验患者1000例,统计分析白带涂片检查快速染色与常规革兰染色对致病菌的检出情况、对阴道炎的诊断效能。结果涂片检查快速染色在白带常规检验中对致病菌的检出率为81.00%,明显高于白带常规革兰染色(50.00%),差异有统计学意义(P<0.05),其中对滴虫、霉菌的检出率为38.70%、18.90%,均明显高于白带常规革兰染色(15.20%、12.60%),差异有统计学意义(P<0.05),但二者对纤毛菌(1.00%vs.0.70%)、淋球菌(0.90%vs.0.70%)、加特纳杆菌(21.50%vs.20.80%)的检出率之间的差异均无统计学意义(P>0.05)。1000例患者中,分泌物培养结果阳性851例,阴性149例;白带常规革兰染色阳性534例,阴性466例;涂片检查快速染色阳性822例,阴性178例。以分泌物培养结果为金标准,涂片检查快速染色诊断阴道炎的灵敏性为95.18%,特异性为91.95%,准确性为94.70%,阳性预测值为98.54%,阴性预测值为79.97%;白带常规革兰染色诊断阴道炎的灵敏性为58.75%,特异性为77.18%,准确性为61.50%,阳性预测值为93.63%,阴性预测值为24.68%。涂片检查快速染色诊断阴道炎的灵敏性高于白带常规革兰染色,特异性高于白带常规革兰染色,准确性高于白带常规革兰染色,阴性预测值均明显高于白带常规革兰染色(P<0.05)。结论涂片检查快速染色在白带常规检验中对致病菌的检出率明显高于白带常规革兰染色,涂片检查快速染色诊断对阴道炎的诊断效能高于白带常规革兰染色。

BOPPPS模式在革兰氏染色实验教学中的应用

微生物学与免疫学是中医院校多个专业学生的必修课。其中,实验教学是培养创新型人才的重要环节。然而作为一门西医基础课,中医药类专业学生对其缺乏足够的热情,加之学时有限,学生综合能力素质难以得到全面锻炼,因此有必要探索一种智慧、高效、易推广的实验教学模式。为此,此文结合中医院校微生物学与免疫学课程定位和对传统实验教学模式的分析,基于BOPPPS教学模式6大环节,以经典实验“革兰氏染色”为例,探索了该模式在实验教学中的具体应用模式,以期增强学生学习兴趣,培养其创新思维能力,为提高中医院校微生物学与免疫学相关课程的实验教学质量提供一定参考。

常规检测法与革兰染色法在阴道分泌物检测中的应用价值探讨

目的 探讨常规检测法(湿片镜检法和五联检测法)与革兰染色法在阴道分泌物检测中的应用价值。方法 选取2021年1月至2021年12月浙江大学医学院附属金华医院就诊的479例女性阴道炎患者作为研究对象,分别采用常规检测法与革兰染色法对阴道分泌物标本进行检测,对检测结果进行比较分析。结果 常规检测法和革兰染色法的Kappa值为0.793,具有较高的一致性(P<0.05)。在白细胞的检出率上,常规检测法高于革兰染色法,差异有统计学意义(P<0.05)。在致病性细菌、乳酸杆菌的检出率上,革兰染色法远高于常规检测法,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 在日常工作中,常规检测法能较好的完成日常阴道分泌物筛查工作,时间快,效率高,而革兰染色法能提高可疑性感染的阳性检出率。临床检验中可灵活应用两种方法,使报告更加准确。

不同微生物检验法对念珠菌性阴道炎患者阴道分泌物的检验效果对比

目的研究革兰染色法、细菌培养法、聚合酶链反应(PCR)检测法对念珠菌性阴道炎患者阴道分泌物的检验效果。方法145例疑似念珠菌性阴道炎患者,均进行革兰染色法、细菌培养法、PCR检测法诊断及病理诊断,分析四种检验方法的诊断结果,并以病理诊断作为金标准,比较革兰染色法、细菌培养法、PCR检测法诊断念珠菌性阴道炎的阳性预测值、阴性预测值、灵敏度、特异度、准确度、约登指数、误诊率、漏诊率。结果病理诊断检出阳性141例,阴性4例;细菌培养法检出阳性134例,阴性11例;革兰染色法检出阳性136例,阴性9例;PCR检测法检出阳性135例,阴性10例。细菌培养法诊断念珠菌性阴道炎的阳性预测值为98.51%、阴性预测值为18.18%、灵敏度为93.62%、特异度为50.00%、准确度为92.41%、约登指数为0.4362、误诊率为50.00%、漏诊率为6.38%;革兰染色法诊断念珠菌性阴道炎的阳性预测值为98.53%、阴性预测值为22.22%、灵敏度为95.04%、特异度为50.00%、准确度为93.79%、约登指数为0.4504、误诊率为50.00%、漏诊率为4.96%;PCR检测法诊断念珠菌性阴道炎的阳性预测值为98.52%、阴性预测值为20.00%、灵敏度为94.33%、特异度为50.00%、准确度为93.10%、约登指数为0.4433、误诊率为50.00%、漏诊率为5.67%。三种检验方法诊断念珠菌性阴道炎的阳性预测值、阴性预测值、灵敏度、特异度、准确度、约登指数、误诊率、漏诊率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论革兰染色法、细菌培养法、PCR检测法均可以实现对念珠菌性阴道炎患者阴道分泌物的检验,临床可以根据患者的实际情况灵活的选择这三种检验手段。

基于16S rRNA基因的不同基原、不同产地甘草微生物群落特征分析

目的探究4批不同基原、不同产地的甘草微生物群落信息。方法参照《中国药典》2020年版四部,对甘草药材中的需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数、耐热菌总数以及控制菌进行检查,并对致病菌平板上的菌落进行革兰染色,同时进行甘草药材的16S rRNA基因测序及数据分析。结果甘草药材中的需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数、耐热菌总数对数值分别为4.15~4.95、2.40~4.85、1.67~3.15;经热处理(100℃、30 min)后发现其需氧菌总数对数值的下降百分比分别为100.00%、24.10%、40.20%、66.26%;各甘草中耐胆盐革兰阴性菌可能总数较高,但均未检测到大肠埃希菌和沙门菌。16S rRNA基因测序共获得19 phylum、40 class、68 order、137 family、236 genus,其中GC-2获得最多的phylum(18)、class(36)、order(58),GC-1和GC-3获得最多的family(121),GC-1获得最多的genus(162)。多样性分析结果表明,甘草药材中污染微生物主要分布于3个门、3个属,不同基原、不同产地的甘草药材中优势菌属同时具有相似性和差异性,优势菌属均为布丘氏菌属(Buttiauxella)、假单胞菌属(Pseudomonas)和藻类(Streptophyta)。结论甘草药材中微生物污染较为严重,并随基原、产地的不同而存在差异。

一株禽多杀性巴氏杆菌的分离鉴定

为弄清湖南省某鸡场发病病因,对送检的病死鸡进行了解剖、组织细菌的分离,并对分离菌株进行了生化鉴定、16SrDNA扩增测序分析,且进一步测序分析了其荚膜和脂多糖PCR分型。解剖结果发现,6只鸡均有心包积液、肺脏实变、肝脏表面有许多针尖状灰白色的坏死点,脾脏和肠无明显症状。对采集组织脏器肝脏、肺脏、脾脏,接种TSA平皿后,均有长出卵圆形菌落。纯化后革兰氏染色为G-短小杆菌,经细菌鉴定仪鉴定为多杀性巴氏杆菌。16SrDNA测序结果显示其与巴氏杆菌美国株CCUG17978的同源性为100%;通过荚膜和脂多糖PCR分型鉴定为荚膜A型和脂多糖L1型。经使用巴氏杆菌较为敏感的磺胺类药物对应性治疗后,鸡群恢复健康。该鸡场发病系荚膜A型和脂多糖L1型巴氏杆菌感染。

脑脊液不同涂片和染色方法在颅内感染诊断中的比较分析

目的:比较和分析脑脊液不同涂片和染色方法在颅内感染诊断中应用情况,为临床颅内感染的准确诊断提供参考。方法:选取2017年9月—2021年8月福建医科大学附属龙岩市第一医院临床送检的845份脑脊液标本作为研究资料,采用不同的涂片和染色方法进行实验,并与常规培养和鉴定的结果进行比较,分析不同涂片和染色方法在颅内感染诊断中的价值。结果:培养和鉴定结果显示,845份脑脊液标本中有99份的微生物培养结果为阳性,共分离出病原菌103株,其中革兰阳性菌79株、革兰阴性菌9株、真菌15株;增菌涂片下革兰染色和瑞氏染色的实验结果与培养鉴定结果的阳性符合率均高于95.00%,而离心涂片下革兰染色、墨汁染色、抗酸染色的实验结果与培养鉴定结果的阳性符合率均低于50.00%;与培养鉴定结果相比,增菌涂片的革兰染色结果与其一致性非常好(Kappa值均>0.90),而离心涂片的革兰染色结果的一致性就相对较差(Kappa值均<0.80)。结论:脑脊液增菌涂片的革兰染色和瑞氏染色有着较高的阳性符合率,可在一定条件下配合培养法帮助医生更好、更准确地诊断颅内感染,从而避免漏诊、误诊。

阴道涂片检查快速染色在白带常规检验中的应用价值

目的探讨阴道涂片检查快速染色在白带常规检验中的应用价值。方法选取2021年8月至2022年7月龙口市新嘉街道社区卫生服务中心行白带常规检查的230例受检者。均实施阴道涂片检查快速染色与革兰氏染色,分析不同染色方式的检出结果及诊断效能。结果阴道涂片检查快速染色滴虫、细菌总检出率高于革兰氏染色(P<0.05)。阴道涂片检查快速染色阳性检出率高于革兰氏染色(P<0.05)。阴道涂片检查快速染色的灵敏度、特异度、准确度高于革兰氏染色(P<0.05)。结论阴道涂片检查快速染色在白带常规检验中的应用价值较高,能够提高诊断效能、减少漏诊情况,为后续诊疗提供可靠依据。

全自动妇科分泌物分析系统在阴道微生态评价中的应用效果分析

目的探讨全自动妇科分泌物分析系统在阴道微生态评价中的应用效果。方法选取阴道炎患者307例,采用革兰染色镜检、湿片镜检和全自动妇科分泌物分析系统(迪瑞GMD-S600)对阴道清洁度、病原微生物进行检测并比较。以革兰染色镜检结果为金标准,比较全自动妇科分泌物分析系统和湿片镜检对外阴真菌性阴道炎、细菌性阴道炎(BV)、滴虫性阴道炎的诊断效能。结果全自动妇科分泌物分析系统、革兰染色镜检和湿片镜检的阴道清洁度阳性率及白细胞、念珠菌、线索细胞、乳酸杆菌检出率比较,差异均无统计学意义(P>0.05),而对滴虫检出率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。与湿片镜检比较,全自动妇科分泌物分析系统在BV诊断中,灵敏度较高、符合率较高、阴性预测值较高、漏诊率较低;与湿片镜检比较,在外阴真菌性阴道炎诊断中全自动妇科分泌物分析系统灵敏度较高、符合率较高、阴性预测值较高、漏诊率较低;与湿片镜检比较,在滴虫性阴道炎诊断中全自动妇科分泌物分析系统特异度较低、符合率较低、误诊率较高。结论全自动妇科分泌物分析系统通过形态学和功能学互补作用,综合评价阴道微生态性能良好,但对滴虫诊断的准确率比镜检低。当形态学结果和功能学结果不一致时,需要人工复检。

不同检验方法在妇女阴道分泌物细菌检测中的特征与效果分析

探讨检测妇女阴道分泌物细菌时,不同检验方法所表现出的临床特征及其效果差异性。选取2022年1月—2022年12月在独山县妇幼保健院进行阴道分泌物细菌检测的90例妇科阴道炎患者作为研究对象,所有样本对象均需应用革兰染色法与白带检测法两种方法进行临床检测,将白带检测法的检测结果列为观察组,将革兰染色法的检测结果列为对照组,对比两组检验结果的特征和白带清洁度情况。结果显示,妇科阴道炎患者应用白带检测法时检验效果相对优良(P<0.05);两种检测方法在白带清洁度检出率方面的差异无统计学意义(P>0.05)。研究发现,在阴道分泌物细菌检测中,应用白带检测法可以提高准确性和敏感性,有助于更准确地判断阴道炎患者的细菌感染情况。因此,在临床实践中应重视白带检测法的应用,以提高妇科阴道炎的诊断水平和治疗效果。

细菌培养法在细菌性阴道炎检测中的应用价值分析

目的探讨在细菌性阴道炎检测中采用细菌培养法的价值。方法选取525例疑似细菌性阴道炎患者,均予以细菌培养法与革兰染色法检测,以临床综合诊断为金标准。比较两种方法的诊断效能,并评估细菌培养法对各类病菌分型诊断的价值。结果细菌培养法对细菌性阴道炎诊断准确率98.67%、敏感度98.80%、特异度98.15%均高于革兰染色法的90.10%、91.13%、86.11%,差异有统计学意义(P<0.05)。细菌培养法对肠杆菌、肠球菌、加特纳菌鉴别分型准确率分别为98.78%、98.48%、98.28%,整体鉴别诊断准确率为98.54%,与临床综合诊断一致性较好(Kappa=0.978)。结论细菌性阴道炎患者采用细菌培养法检测诊断效能高于革兰染色法,可实现各类病菌的有效分型诊断,为后续工作提供准确依据。

革兰氏染色三步法应用试验探讨

为了提高革兰氏染色实验的教学效果,应用革兰氏染色三步法,探讨了菌龄、涂片厚度、媒染时间和脱色、复染时间对染色结果的影响,并进行了革兰氏染色三步法与四步法的比较试验。获得正确染色结果的条件为:首先将大肠杆菌、枯草芽胞杆菌和金色葡萄球菌在琼脂斜面培养基上分别培养22～25 h、13～17 h和18～24 h;其次是做涂片时,取菌量要少于1/3环,涂菌稀薄、均匀;最后是染色。而染色的第1步是用结晶紫初染60 s;再用碘液媒染60～90 s;第3步用碱性品红乙醇溶液脱色、复染60～120 s。革兰氏染色三步法,基本原理没有改变,只是将四步法中乙醇退色和番红复染的两步合并在一步中进行,从而达到减少操作,提高效率的目的。

影响革兰氏染色结果的原因分析

为了提高革兰氏染色实验的教学效果,应用革兰氏染色法,探讨了菌种的菌龄、细菌涂片厚度、碘液媒染时间和乙醇脱色时间对革兰氏染色结果的影响。实验结果表明获得正确染色结果的条件为:首先将大肠杆菌、枯草芽胞杆菌和金色葡萄球菌在琼脂斜面培养基上分别培养22～25h、13～17h和18～24h;然后是制作细菌涂片时,取菌量要少于1/3环,涂菌稀薄、均匀;最后是染色。染色的第一步是用草酸铵结晶紫初染60s,再用碘液媒染60s,最后乙醇脱色时间是关键,应严格控制在30～45s为宜。只有控制好影响革兰氏染色结果的各个环节,才能得到正确的染色结果。