葡萄籽原花青素对碘海醇所致HK-2细胞凋亡的保护作用及其机制研究

目的探讨葡萄籽原花青素(GSPE)对碘海醇诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)凋亡的保护作用及其相关机制。方法将体外培养的HK2细胞分为:对照组、碘海醇组(100 mgI/mi与细胞共培养)、GSPE组(不同浓度的GSPE与细胞共培养)、GSPE+碘海醇组(不同浓度的GSPE与细胞共培养后加碘海醇干预)。采用CCK-C法测定细胞活力,流式Annexin VCITC/PI双染法检测细胞凋亡率,DCFH-DA荧光结合流式细胞法检测细胞内活性氧(ROS),实时荧光定量PCR检测核因子E2相关因子2(Nt2)信号通路中相关基因mRNA表达水平,Western b/t法检测相关蛋白表达。结果碘海醇能明显诱导HK2细胞的凋亡,GSPE与HK2细胞共培养24 h后能抑制碘海醇所致的细胞凋亡,抑制碘海醇诱导的细胞内ROS升高,并呈GSPE剂量依赖性。且GSPE作用后提高Nt和下游区HO-1、NQOl基因的表达量以及其蛋白含量(P<0.01),并能降低细胞内促凋亡蛋白的含量,提高抗凋亡蛋白的含量(P<0.05)&结论GSPE对碘海所致的HKC2细胞的凋亡的护作用,其护作用可能是通过激活Nt信号通路而实现的。