二倍体与四倍体葡萄品种杂交胚挽救及后代倍性鉴定

以葡萄二倍体品种无核红宝石与四倍体品种香悦为亲本进行正反杂交,以杂交胚珠为试材进行胚挽救试验,研究不同取样时期对胚珠萌发率的影响,采用流式细胞仪法与染色体计数法对杂交后代幼苗倍性进行鉴定。结果表明:无核红宝石×香悦于花后60d接种胚珠萌发率最高,为8.33%,获得杂种胚挽救幼苗8株,其中有1株三倍体植株(12.5%);香悦×无核红宝石在花后83d接种胚珠萌发率最高,为29.38%,获得杂种胚挽救幼苗56株,其中有16株三倍体植株(27.59%)。

4个四倍体玫瑰香味鲜食葡萄品种与其亲本果实香气成分分析

【目的】分析4个四倍体玫瑰香味鲜食葡萄品种的芳香化合物组分,为深入了解四倍体葡萄品种提供理论依据。【方法】以4个四倍体玫瑰香味鲜食葡萄品种(‘早黑宝’‘秋黑宝’‘晚黑宝’和‘四倍体玫瑰香’)及其二倍体亲本‘瑰宝’‘早玫瑰香’‘秋红’‘玫瑰香’成熟期果实为材料,利用顶空固相微萃取-气质联用技术对果实的芳香化合物组分进行测定,采用面积归一法对香气成分进行定量。【结果】各品种果实芳香物质成分种类和相对含量差异较大。醛类物质相对含量最高,其中2-己烯醛占34.40%~49.81%,‘四倍体玫瑰香’与亲本‘玫瑰香’无显著差异,‘早黑宝’和‘晚黑宝’均低于亲本,而‘秋黑宝’介于父母本中间;己醛占16.28%~28.43%,‘四倍体玫瑰香’显著高于‘玫瑰香’,‘早黑宝’与‘瑰宝’无显著差异,但低于父本‘早玫瑰香’,‘秋黑宝’和‘晚黑宝’均高于‘瑰宝’,但低于父本‘秋红’或与‘秋红’无显著差异。除‘秋红’外,其余7个葡萄果实中均含有相对含量较高的萜烯醇(7.24%~28.60%),‘四倍体玫瑰香’最高,‘早玫瑰香’最低,‘四倍体玫瑰香’仅比‘玫瑰香’高出3.94%,‘早黑宝’分别比父母本高出20.22%、2.07%,而‘晚黑宝’和‘秋黑宝’分别比母本低13.21%、7.87%。【结论】里那醇和香叶醇对7个玫瑰香味葡萄品种果实香气贡献最大。二倍体玫瑰香味葡萄加倍后,主要呈香物质相对含量未因染色体加倍而加倍,而与亲本玫瑰香味浓郁程度有关。8个葡萄品种果实芳香物质中的主要成分是C6醛。

葡萄二倍体与四倍体品种间杂交胚挽救取样时期的确定

通过系统测定葡萄二倍体与四倍体品种间杂交胚珠的重量变化和解剖观察胚珠的发育情况,判断其败育发生时期和发生方式,并进一步通过胚珠培养试验确定取样时期。与无核品种不同,大多数有核品种与倍性不同的品种杂交后,胚珠的败育存在个体间差异。胚珠发生败育的时期与母本品种的成熟期相关,早熟品种从花后第 5 周开始出现败育胚珠,中熟品种开始败育时期比早熟品种晚 1 周,晚熟品种花后 9 周才开始败育。胚挽救的取样时期可以根据母本品种成熟期确定,早熟品种为授粉后 6～9 周,中熟品种为授粉后 7～10 周,晚熟品种为授粉后 9～12 周。

四倍体玫瑰香葡萄形态特征与生长发育规律

通过１０ａ的研究，培育出了四倍体玫瑰香葡萄，其生物学特性与原二倍体玫瑰香葡萄比较，具有生长势强，坐果率高，成熟期早，果穗大，品质好等特点，是一个值得推广的优良的品种。

葡萄二倍体与四倍体品种间杂交胚珠的离体培养

为了克服葡萄二倍体品种与四倍体品种之间的交配障碍,进行了杂交胚珠的离体培养研究。发芽胚珠的取样时期集中于授粉后35～75d,其中多数以二倍体作母本的组合在授粉后55d取样的发芽率最高,以四倍体作母本的组合授粉后70d取样的发芽率最高。基本培养模式为:发育培养基-(剥胚)萌发培养基-生长培养基。用二倍体品种作母本时,所有组合均获得了培养苗,在1号培养基上培养的胚珠发芽率高于2号培养基。反交对培养基的要求有相反趋势,其中2个组合未得到培养苗。授粉后60d,直接剥出杂种胚进行培养,得到了最高发芽率。综合分析初步认为,用二倍体品种作母本比用四倍体品种作母本容易获得杂交后代。

葡萄二倍体和四倍体杂交胚挽救的影响因素

采用L25(55)的正交试验设计,对葡萄二倍体和四倍体杂交胚挽救过程中的影响因素如培养基种类、接种时间、植物生长物质浓度等进行了研究。结果表明:影响胚挽救成苗率最重要的是接种时间,然后依次是IBA浓度、GA3浓度、培养基种类和6-BA浓度。获得了一批胚挽救实生苗,最高出苗率达到73.08%。

不同倍性葡萄种质激素水平比较分析

[目的]通过分析3组同基因型不同倍型鲜食葡萄种质植株中3种内源激素含量,为葡萄倍性育种以及栽培生理的研究提供借鉴。[方法]以3份四倍体鲜食葡萄种质(‘四倍体红地球’、‘四倍体玫瑰香’和‘2-2-4’)及其二倍体种质‘红地球’、‘玫瑰香’和‘2-2-2’一年生营养袋扦插苗新梢和根系为材料,利用HPLC多阶质谱检测对新梢和根系中的生长素(IAA)、脱落酸(trans-ABA和cis-ABA)和10种细胞分裂素含量进行测定,后续定量分析选择离子检测方式选定各激素裂解后的特征碎片离子。[结果]3组材料中四倍体葡萄叶片中IAA、ABA含量均显著低于相应的二倍体,IAA含量为二倍体葡萄的38.2%~77.9%,ABA含量为二倍体葡萄的23.6%~80.0%。‘四倍体红地球’叶片中有7种细胞分裂素含量显著高于二倍体‘红地球’,为后者的1.36~3.99倍;‘四倍体玫瑰香’叶片中仅DHZR显著高于二倍体‘玫瑰香’,为后者的1.49倍;而‘2-2-4’中9种细胞分裂素含量均显著低于‘2-2-2’,为后者的12.7%~68.6%。3组材料四倍体葡萄根系中仅‘四倍体红地球’IAA和c-ABA含量显著高于二倍体‘红地球’,‘四倍体玫瑰香’ABA含量显著低于二倍体‘玫瑰香’。根系中,‘四倍体红地球’中有5种细胞分裂素显著低于‘红地球’。‘2-2-4’ZOG和DHZR含量显著高于‘2-2-2’,为后者的1.26、3.82倍,ZR、iP和iPR含量则显著低于‘2-2-2’。‘四倍体玫瑰香’中ZOG含量显著高于‘玫瑰香’,而ZR、DHZR、iP和iPR4种细胞分裂素则显著低于‘玫瑰香’。[结论]二倍体葡萄加倍后,植物体内源激素的含量未因染色体加倍而呈现规律性加倍。

玫瑰香葡萄二倍体与四倍体的三种生化指标比较研究

对二倍体玫瑰香与加倍后形成的四倍体变异品系的５种器官，分别测定了过氧化物酶活性、多酚氧化酶活性和酚类物质含量。试验结果表明，二倍体玫瑰香品种加倍形成四倍体后，雄蕊、雌蕊和成叶的过氧化物酶活性均极显著降低；雄蕊和雌蕊的多酚氧化酶活性、酚类物质含量也极显著地降低，但成叶和叶柄的多酚氧化酶活性、酚类物质含量却极显著地升高。