草鱼鳞和草鱼皮胶原蛋白性质及自聚集行为对比研究

以草鱼为原料,采取酸-酶结合法提取鱼鳞及鱼皮中胶原蛋白,经紫外光谱(ultraviolet spectrum,UV)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulphate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)、傅里叶变换红外光谱(fourier transform infrared spectroscopy,FTIR)以及差示扫描量热法(differential scanning calorimetry,DSC)对比其结构性质,采用浊度实验、聚集程度实验和扫描电镜(scanning electronic microscopy,SEM)比较2种胶原蛋白的体外自聚集行为。结果表明,提取的2种胶原蛋白均具有2条α链,为典型I型胶原蛋白,并保持了良好的三螺旋结构,鱼鳞、鱼皮的变性温度分别为34.99℃和39.75℃。在30℃的中性盐溶液条件下,2种胶原蛋白均可产生自聚集行为且鱼皮、鱼鳞胶原蛋白的聚集程度分别为28%和27.33%。经SEM观察到2种来源胶原蛋白均能自聚集形成交织状纤维,其中鱼鳞胶原蛋白的网状纤维结构更加明显并具有胶原原纤维的周期性横纹D带,而鱼皮胶原蛋白自聚集的胶原纤维结构有一定坍塌且无D带。

超声波辅助酶法提取草鱼皮胶原蛋白及其纯化

本文研究了超声波辅助提取草鱼皮胶原蛋白的工艺。以超声功率、超声时间和酶解时间为实验因素,胶原蛋白提取率为响应值,利用Box-Behnken设计实验及响应面法分析实验,确定其最佳提取工艺条件。结果显示:最佳工艺条件为超声功率310 W,超声时间10 min,酶解时间29 h,此时胶原蛋白提取率达到68.67%,与模型理论预测值(68.80%)较为相近,相对误差仅为0.189%。通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱(SDS-PAGE)和傅里叶红外光谱(FTIR)谱图,对比超声波作用下与无超声波作用的胶原蛋白发现,超声波对胶原蛋白结构无明显影响。

木瓜蛋白酶提取草鱼皮胶原蛋白的工艺研究

采用木瓜蛋白酶从淡水草鱼鱼皮中提取胶原蛋白,通过正交实验对草鱼皮胶原蛋白提取工艺进行优化。结果表明,料液比为1g/20ml、酶与原料比为1∶50、在pH值为6.0、酶解36h时得到胶原蛋白提取率为13.98%。

酶解法制备草鱼皮蛋白水解物增殖嗜热链球菌

嗜热链球菌被认为是一种多功能益生菌,将Neutrase 0.8L、Protease P"Amano"6、Prote AX、Alcalase 2.4L FG和风味中性蛋白酶5种草鱼皮蛋白水解物作为培养嗜热链球菌的氮源,以水解物对嗜热链球菌的增殖效果为评价指标,选择最佳水解用酶,并利用正交试验优化酶解条件。结果表明,5种微生物蛋白酶中,Neutrase 0.8L是水解草鱼皮蛋白的最佳用酶,最佳的酶解条件为:加酶量1%、酶解时间80 min、起始p H 6.5、料水比1∶2(m/V)。利用Neutrase 0.8L酶解法制备得到的富含胶原蛋白肽的草鱼皮蛋白水解物,是一种培养嗜热链球菌的理想氮源。

草鱼皮酶解工艺及水解物对嗜热链球菌增殖作用研究

首次研究了水产品蛋白酶解物对乳酸菌的增殖作用。选择草鱼皮为原料,通过蛋白酶Protease P"Amano"6对其进行酶解,其水解物可以作为培养嗜热链球菌增殖的氮源。同时以水解度和水解物对嗜热链球菌的增殖效果为评价指标,并利用正交实验对酶解工艺进行了优化。结果表明,蛋白酶Protease P"Amano"6对草鱼皮最佳的酶解条件为:加酶量3%、料水比1∶3(m/V)、酶解时间7 h、pH 8.0、反应温度45℃。

高效液相色谱法检测草鱼可食用组织中甲硝唑的残留

建立了草鱼的肌肉、皮肤组织中甲硝唑残留检测的高效液相色谱法(HPLC),样品中甲硝唑选用乙腈提取、Silica(SiO2)固相萃取柱净化、氮气吹干浓缩、紫外检测(波长325nm)、HPLC测定。该方法可检出鱼肉、鱼皮组织中甲硝唑的最低定量限为1μg/kg。在空白样品中添加浓度为1μg/kg时,鱼肉、鱼皮中甲硝唑的平均回收率分别为69%和75%,日间变异系数均小于15%。结果表明,该方法的样品处理方法简单,最低检测限、准确度和精密度均符合残留检测方法要求。

草鱼皮酶法脱脂工艺优化

以脱脂率为指标,采用酶法研究草鱼皮的脱脂工艺,并采用单因素及响应面试验优化提取条件。结果表明,草鱼皮脱脂的最适工艺条件为:反应温度42℃,反应时间为62min,p H为8.6,加酶量0.3%。此条件下草鱼皮脱脂率可达70.24%。

草鱼皮胶原的提取及性能的初步研究

测定了草鱼皮的部分基本化学组成成分,比较了用酶法提取草鱼皮胶原的提取工艺,并对所提草鱼皮胶原的氨基酸组成、分子量分布、变性温度等进行了分析测定。结果表明:用酶法提取草鱼皮胶原是可行的,但应加强皮的预处理;草鱼皮胶原氨基酸组成中,亚氨基酸(脯氨酸和羟脯氨酸)含量低于猪皮胶原中亚氨基酸含量;差式扫描量热计测定草鱼皮胶原变性温度约为20℃;电泳结果显示所提胶原大部分保持了其天然的三股螺旋结构,但可能有部分胶原发生了变性。

响应面法优化草鱼皮中有效抗氧化物质提取工艺

以草鱼皮为原料,采用六种蛋白酶酶解,以DPPH自由基清除率和水解度为指标,筛选两种较优的酶,再通过响应面分别优化两种酶制备抗氧化酶解液的工艺条件,并在此基础上进行双酶酶解实验,确定酶解草鱼皮的最优工艺。结果表明:碱性蛋白酶酶解草鱼皮的最适条件为加酶量6.3%、料水比1∶40.6、温度51.3℃、时间115.1 min,此时清除率最高为54.98%。木瓜蛋白酶最适条件为加酶量4.6%、料水比1∶41.2、温度50.5℃、时间133.0 min,清除率最高为41.06%。采用分步酶解(先碱性蛋白酶后木瓜蛋白酶)得到的酶解液DPPH自由基清除能力最高为92.07%,明显优于单酶水解和混合酶解的效果。

草鱼鱼皮中明胶提取工艺优化

研究了采用响应面分析方法从草鱼的鱼皮中提取鱼明胶的最佳工艺。考察了盐酸浓度、预处理时间、提取温度和提取时间对鱼明胶得率和凝胶强度的影响。经过响应面分析,得到从草鱼皮中提取明胶的最佳工艺为盐酸浓度1.19%(v/v),预处理24h,在52.61℃下提取5.12h,明胶的得率和凝胶强度分别为19.83%和267g,所得明胶的凝胶点和溶点分别是19.5℃和26.8℃。此外,草鱼皮明胶中的氨基酸组成中,脯氨酸和羟脯氨酸的总含量为19.47%。

甘油对草鱼皮胶原的稳定性作用研究

测定了不同浓度的甘油与草鱼皮胶原混合后胶原的热变性温度,并测定其圆二色性。结果表明:胶原的热变性温度与甘油浓度呈线性关系,随着甘油浓度的增加,草鱼皮胶原的变性温度也升高,但是增加幅度较小。圆二色谱表明,甘油的加入没有改变胶原天然的三股螺旋结构。

通电加热下频率、温度对草鱼鱼块和鱼皮电导率的影响

为探索通电加热作为淡水鱼类加工方式的可行性,以草鱼为研究对象,采用LCR测量仪,测定了经50 Hz,20 V交流电加热后,草鱼鱼块(并联、串联)、碎鱼肉、带皮鱼块样品在10~80℃温度范围、50~20 k Hz频率范围内的阻抗值,并计算样品电导率。实验结果表明,三种样品(并联及串联鱼块、碎鱼肉)的电导率均呈现出随频率增大而增大、随温度升高而升高的趋势,其中,受鱼块内部膜方向的影响,并联、串联样品电导率有显著差异(p<0.05);碎鱼肉样品消除了鱼肉内部膜的影响,其电导率值介于并联、串联样品之间。带皮鱼块样品由于鱼皮的存在,比起其他样品有不同的电导率值,鱼皮平行于电流放置时电导率值高于鱼皮垂直电流放置的值。

自拟四草三皮二豆汤联合黄芪鲫鱼汤食疗治疗肝硬化腹水118例

目的:观察四草三皮二豆汤内服联合黄芪鲫鱼汤食疗治疗肝硬化腹水(中医辨证属于气滞血瘀证、肝郁脾虚证、气滞血瘀证)的临床疗效。方法:336例肝硬化腹水患者随机分为治疗组118例,对照组118例。治疗组给西医常规治疗+四草三皮二豆汤内服联合食疗治疗;对照组西药常规治疗(保肝和利尿治疗,参见《实用内科学》第11版肝硬化有关章节进行处理)。治疗4周,主要观察体重和腹围,用以了解腹水消退情况,比较两组临床疗效。结果:治疗组较对照组体重和腹围下降更明显,总有效率治疗组为92.0%,对照组为78.0%,经Ridit分析,两组疗效有显著差异(P<0.05)。结论:四草三皮二豆汤内服联合食疗治疗肝硬化腹水疗效肯定。

草鱼皮酶促水解及其水解液Maillard反应合成肉类香味料的研究

研究了木瓜蛋白酶和胃蛋白酶对草鱼皮的酶促水解,以及水解液通过Maillard反应合成肉类香味料。研究表明:木瓜蛋白酶的最佳水解条件为55℃,pH 6.5,反应时间6h,加酶量8000U/g;胃蛋白酶的最佳水解条件为40℃,pH 2.0,反应时间4h,加酶量7500U/g;木瓜蛋白酶水解草鱼皮所得水解液的水解度要比胃蛋白酶高出很多;以木瓜蛋白酶在最佳水解条件下所得的水解液作为Maillard反应的基料,效果表明,添加0.5%L-CysHCl、3%食盐、1.25%葡萄糖、0.5%Vc等物质后于120℃、80min、pH 6.0条件下进行Maillard反应可合成理想的肉类香味料。