20-HETE通过GPR75受体偶联G_(αq)信号通路诱导H9c2心肌细胞凋亡的作用

目的 探讨GPR75受体偶联G_(αq)信号通路在20-HETE诱导的H9c2心肌细胞凋亡中的作用与机制。方法 H9c2心肌细胞采用慢病毒载体干扰GPR75表达,敲减效率通过RT-qPCR和Western blot法检测;ELISA法检测IP_(3)及cAMP含量;TUNEL法评估细胞凋亡率;分别使用Fluo-4/AM、DHE和JC-1荧光探针检测细胞内Ca^(2+)浓度、ROS含量以及线粒体膜电位(ΔΨm)水平;Western blot检测EGFR、ERK1/2、AKT、GSK3β、Bax、Bcl-2、Cyt C、Caspase-3蛋白表达。结果 慢病毒载体shGPR75转染后,H9c2心肌细胞GPR75受体mRNA和蛋白表达分别降低67.16%和63.99%(P<0.05)。敲减GPR75表达或应用AAA阻断其作用,显著抑制20-HETE诱导的H9c2心肌细胞凋亡(P<0.05),并可逆转ΔΨm下降及凋亡相关蛋白Bax、Cyt C、Caspase-3蛋白表达增高(P<0.05)。20-HETE处理后细胞内IP_(3)含量明显增加(P<0.05),但对cAMP生成无显著影响(P>0.05),而敲减GPR75表达、应用AAA或者PLC信号通路阻断剂U73122预处理后,可显著阻断细胞内IP_(3)生成(P<0.05)。敲减GPR75表达、应用AAA或者U73122预处理后,明显抑制20-HETE诱导的Ca^(2+)浓度升高和ROS生成效应(P<0.05)。20-HETE处理后,GPR75受体下游调控关键蛋白EGFR、ERK1/2、AKT、GSK3β磷酸化水平明显升高(P<0.05),敲减GPR75表达或应用AAA可有效阻断20-HETE上述效应(P<0.05)。最后,阻断PLC或PI3K信号通路,显著抑制20-HETE诱导的心肌细胞凋亡(P<0.05)。结论 20-HETE通过GPR75受体偶联的G_(αq)蛋白及其介导的PLC、EGFR/ERK1/2/AKT/GSK3β信号通路诱导H9c2心肌细胞凋亡。

风机叶片穿越G75高速桥运输思考与优化

针对黄蛟山风电项目叶片运输无法穿越G75高速桥的问题,通过查阅大量资料、调查分析并邀请东电、金风、明阳等厂家工程师现场实地踏勘与研究。初步拟定三种方案:方案一,在高速开口子,避开G75高速桥;方案二,沿用原路,拆除房屋;方案三,高速桥下修建便道。通过层层方案比选,选定方案三为实施方案,突破安全、经济等多项论证并付诸实施,最终风机叶片安全、高效的穿越了G75高速桥,保证了黄蛟山风电项目顺利投产。

糖耐量正常者75g口服葡萄糖耐量试验1 h血糖水平敏感性的影响因素分析

目的分析糖耐量正常者75 g口服葡萄糖耐量(75 g OGTT)试验1 h血糖水平敏感性的影响因素。方法选择医院2019年1—12月1800例糖耐量者作为研究对象,根据75 g OGTT试验1 h血糖水平是否正常,分为对照组897例(75 gOGTT试验1 h血糖水平<8.6mmol/L)、病例组903例(75 g OGTT试验1 h血糖水平≥8.6 mmol/L)。通过单因素及多因素Logistic回归模型,分析影响糖耐量正常者75 gOGTT试验1 h血糖水平敏感性的相关因素。结果单因素分析显示,病例组与对照组的性别、运动时间比较,差异均无统计学意义(P>0.05);对照组的年龄、BMI、HbA1c、SBP、DBP、TC、TG、LDL-C、吸烟史、酗酒史低于病例组,HDL-C高于病例组,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,年龄≥60岁、BMI≥24、HbA1c≥6.1%、高血压、高血脂、吸烟史、酗酒史均是糖耐量正常者75 g OGTT试验1 h血糖水平的独立危险因素(P<0.05)。结论糖耐量正常者75 gOGTT试验1 h血糖水平的变化主要与年龄、BMI、HbA1c、血压、血脂等有关。

应用兔IgG-Sephadex G75亲合纯化羊抗兔IgG血清

应用兔ＩｇＧ┐ＳｅｐｈａｄｅｘＧ７５亲合纯化羊抗兔ＩｇＧ血清汪寅章黄兆坚陆思珍（解放军总医院内分泌科，北京１００８５３）作者简介：汪寅章，男，５９岁，教授，主要从事内分泌激素检测研究抗体固化技术是建立固相免疫分析的关键，制备纯化抗体又是抗体固化的必不...

数控车床切槽加工复合指令G75和G74应用浅析

本文对数控车床(FANUC-0i系统和广数GSK980TDb系统)的切槽加工指令G75和G74进行了分析,分析了该指令切槽加工的合理应用方法,提出了该指令不合理的地方,编程应该注意的问题,以及改进建议。

敲减G蛋白偶联受体75表达抑制20-HETE诱导的H9c2心肌细胞凋亡

目的:探讨G蛋白偶联受体75(GPR75)对20-羟二十烷四烯酸(20-HETE)诱导H9c2心肌细胞凋亡的影响及机制。方法:慢病毒转染敲减H9c2心肌细胞GPR75基因表达;TUNEL法检测细胞凋亡率;RT-qPCR法检测GPR75以及凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的mRNA表达;JC-1荧光探针检测线粒体膜电位水平;Western blot法检测GPR75、Bcl-2、Bax及细胞色素C(CytC)蛋白表达;发色底物法检测caspase-3的活性。结果:H9c2心肌细胞在mRNA及蛋白水平均表达GPR75,敲减GPR75抑制了20-HETE诱导的细胞凋亡(P<0.05);同时,敲减GPR75阻断了20-HETE诱导的Bax和CytC表达上调以及caspase-3活性增高作用(P<0.05),逆转了20-HETE诱导的Bcl-2表达下调和线粒体膜电位下降(P<0.05)。结论:20-HETE通过GPR75介导引起线粒体功能紊乱,诱导H9c2心肌细胞凋亡。

CBP/P300介导的PTIP乙酰化可能促进下游肿瘤相关基因CCDC121和GPR75的转录

PTIP (Pax transactivation domain-interacting protein,PAXIP1)蛋白参与MLL3 (lysine methyltransferase 2C,KMT2C)/MLL4(lysine methyltransferase 2B,KMT2B)组蛋白H3K4甲基转移酶复合体,促进基因的转录激活。但关于PTIP蛋白的乙酰化修饰及人宫颈癌细胞中PTIP转录激活靶基因的研究尚无报道。本研究以稳定表达SFB-PTIP蛋白的293T细胞株为对象,通过免疫沉淀和Western印迹法发现,PTIP蛋白能够发生乙酰化修饰,乙酰转移酶CBP/P300介导PTIP蛋白的乙酰化过程,CBP是主要乙酰转移酶。去乙酰化酶HDAC1/2/3介导PTIP蛋白的去乙酰化过程。选择性HDAC1-3抑制剂MS-275促进PTIP蛋白乙酰化水平上升,且呈剂量和时间依赖性。以人宫颈癌HeLa细胞为研究对象,RNA-seq和RT-qPCR证明,CCDC121 (coiled-coil domain containing121)和G蛋白偶联受体75 (G protein-coupled receptor 75,GPR75)是PTIP的转录激活靶基因(P<0. 01)。和对照相比,MS-275介导的蛋白质乙酰化水平上升,促进基因CCDC121和GPR75的mRNA转录呈现不同程度的剂量依赖性上升(P<0. 01,P<0. 05)。由此推测,MS-275有可能是通过促进PTIP蛋白的乙酰化水平,促进CCDC121和GPR75的转录。但其详细机制有待进一步研究。本研究对今后深入探讨PTIP乙酰化修饰对下游肿瘤相关基因转录的调节和功能,如肿瘤发生、进展等方面的调控机制提供了基础。

G蛋白偶联受体75信号通路在20-羟二十烷四烯酸诱导乳鼠心肌细胞凋亡中的作用

目的:探讨G蛋白偶联受体75(G-protein-coupled receptor 75,GPR75)介导的PLC/PKC信号通路在20-羟二十烷四烯酸(20-hydroxyeicosatetraenoic acid,20-HETE)诱导的乳鼠心肌细胞凋亡中的作用。方法:采用慢病毒转染敲减乳鼠心肌细胞GPR75基因表达;RT-q PCR和Western blot检测GPR75 m RNA及细胞色素C(cytochrome C,Cyt C)和caspase-3蛋白表达;ELISA法检测三磷酸肌醇(inositol triphosphate,IP_(3))含量以及蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)和NADPH氧化酶活性;Fluo-3/AM探针法检测细胞内Ca^(2+)浓度;二氢乙啶(dihydroethidine,DHE)荧光探针检测细胞内活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)的含量;TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果:在培养的乳鼠心肌细胞中,GPR75在m RNA及蛋白水平均有表达,且20-HETE具有促进细胞内GPR75表达的作用(P<0.05);经20-HETE处理后,细胞内IP_(3)含量升高,而敲减GPR75或应用磷脂酶C(phospholipase C,PLC)抑制剂U73122可显著阻断20-HETE的如上效应,细胞内IP;含量降低(P<0.05);敲减GPR75表达、应用PLC抑制剂以及IP_(3)受体阻断剂2-氨基乙氧基二苯基硼酸酯(2-aminoethoxydiphenyl borate,2-APB)预处理,可抑制20-HETE诱导的细胞内Ca^(2+)浓度升高(P<0.05);敲减GPR75表达、应用PKC抑制剂GF109203X或NADPH氧化酶抑制剂apocynin处理后,20-HETE诱导的细胞内ROS生成被抑制(P<0.05);同时,敲减GPR75表达可降低20-HETE作用的细胞中PKC、NADPH氧化酶的活性(P<0.05);最后,敲减GPR75表达、应用U73122或GF109203X,均可减少20-HETE诱导的心肌细胞凋亡率及凋亡相关蛋白Cyt C和caspase-3的表达(P<0.05)。结论:GPR75介导的PLC/PKC信号通路通过引起心肌细胞钙超载、ROS生成增多,参与了20-HETE诱导的乳鼠心肌细胞凋亡进程。

G蛋白偶联受体75去孤儿化研究及在疾病中的作用

G蛋白偶联受体(G-protein-coupled receptors,GPCRs)是已知人类基因组中最大的一类膜蛋白受体家族,包括A类视紫红质样受体、B类分泌素受体、C类代谢型谷氨酸受体、D类真菌交配信息素受体、E类环腺苷酸受体及F类卷曲受体(Frizzled/Smoothened家族)[1-2]。其中A类视紫红质样受体包含了GPCRs中大部分种类,共含有19个子类(A1~A19)719种.

用葡聚糖凝胶G-75层析柱制备高纯度细胞色素C

选择２ｍｏｌ／Ｌ硫酸在ｐＨ为４．０、温度为２５℃的条件下进行抽提，提取液经人造沸石吸附，２５％硫酸铵洗脱，然后加入固体硫酸铵盐析除去杂蛋白，最后加入２０％三氯乙酸沉淀，获得粗品，再采用２２６型弱酸性阳离子树脂和葡聚糖凝胶Ｇ－７５层析柱组合的新方法，制得了Ａ５５０ｒｅｄ／Ａ２８０为１．２８的高纯度细胞色素Ｃ。

一种有效提高数控加工效率的编程方法——巧妙运用G73和G75指令编程,提高加工效率

数控车削加工是现代制造技术的典型代表之一,数控车削的高效率、高精度使它在航天、汽车、模具精密仪器、家用电器等各个行业应用越来越广泛,已成为这些行业不可或缺的加工手段。在实际加工当中要想充分发挥数控机床的作用,数控机床的硬件(机床切削速度、刀具、精度等)很重要,加工工艺设计的重要性也不可小觑,不同的加工工艺造就不同的刀具路径,最终的加工效率亦相差很大,因此灵活运用编程指令选择合理加工工艺尤为重要。文章以实例说明在实际加工中灵活使用G73与G75指令,设计出合理加工工艺、刀具路径,提高加工效率,充分发挥数控机床的效益的一种方法。

基于FANUC数控系统G75指令应用研究

在FANUC数控系统中,循环指令G75适合于在外圆面上切削沟槽、切断加工或径向孔切削,相比G01指令进行切槽加工、切断,G75指令编程简单,加工效率高。本文介绍G75指令的内容,并以实际编程加工为例说明该指令的应用。

对G75兰海公路贵州境内崇遵段养护工程文件材料归档整理的思考

国家兰海(兰州—海口;G75)高速公路,是我国西部地区的出海大通道,对西北、西南地区的社会经济、工农业、旅游业等事业的发展,可以起到极大的推动作用。就贵州省境内的崇溪河至遵义段高速公路而言(简称崇遵公路),它是兰海高速G75中的一段。

珠海玻纤公司生产的G75纱与日本进口G75纱的质量对比

1995年1月11日ZFG第二届7500吨窑炉顺利点火成功,只用22天的时间就拉出能用于生产的合格原丝,2月19日即达到设计产量.用于织造的纺织纱—G75纱的质量在高品质的18K布生产中起着重要作用,而号数(TEX)则是G75纱的一个重要的质量指标,它的稳定与否,决定着18K布单重的稳定性.在此我们将ZFG生产的G75纱与由日本进口的G75纱的号数(TEX)的控制水平及其稳定性作一比较.

E225纱(400孔)—→G75纱(800孔)的设备改造

珠海玻纤公司投产后由于市场竞争激烈,原设计生产的116E印刷电路板玻璃纤维布市场疲软,造成滞销积压,相反18K印刷电路板用玻璃纤维布市场畅销,供不应求,为此决定停止生产116E布,改为生产18K布.由于产品的变更,涉及到前道工序生产的原丝品种也需变更,即原生产E225纱改为生产G75纱,相应的铂金漏板也需变更,即原漏板孔数400孔改为800孔,而上述变更最终是依靠设备的技术改造来实现.

ViewSonic优派G75f+

价格:1399元电话:021-62375252 网址:www.viewsonic.com.cn 优派G75f+面板采用银灰与银黑双色搭配,而机身后方则采用独特的水珠造型设计,在典雅、稳重的同时更加具有运动感和流畅感。优派G75f+调节菜单的选项非常丰富,可以很方便地把几何、色彩调节到最佳状态。G75ft+同样采用了优派独有的真彩基因技术,此技术由PerfectFlat纯平技术、UltraBriteTechnology高亮技术和SuperClear影像处理回路技术组成,可使影像的清晰度、画质的精细度、聚焦的精准度得到进一步加强。优派G75f+亮度及对比度较高,灰阶及色彩过渡比较平滑自然,没有明显的灰阶融合情况。全屏亮度均匀度处于中上水平。

GSK980TD数控车床上G75指令的巧用

在数控车床零件生产中,G75一般用于切槽加工,主要用于外圆槽与内孔槽。实践生产中发现,G75也可以用来加工工件的端面,对于一些毛坯定位后长度偏差较大的零件,用于去除多余的长度余量。如果使用其它指令进行编程,会使加工程序较长,检查程序时容易出错;使用G75编写可以简化编写加工程序,减少出错概率,并且能自动断屑,防止铁屑缠绕刀具,保护了刀具,在实际加工中提高了工作效率,创造更高的效益。

高性能、个性化 优派G75f+SB显示器

虽然暑期刚过,不过显示器市场上的新品仍然是层出不穷,价格同样是不断变化,当然无论是液晶显示器还是纯平显示器大多是在降价。尤其是液晶显示器,价格一路走低,就连17英寸的产品也跌破了3000元大关。虽然液晶的价格降低提升了其性能价格比。不过对于大众用户来说,液晶与纯平显示器之间上千元的差距仍然是很难逾越的,更何况从使用的角度来说,纯平显示器凭借成熟的制造技术和更为出色的显示效果还是很受欢迎的。所以各大显示器厂家在不断喊出普及液晶的口号的同时,也没有忘记在纯平显示器的市场上一展身手。我们这次就拿到了一款优派公司新近推出的又一款纯平产品——G75F+SB。

微生物谷氨酰胺转胺酶(MTG)的分离纯化

利用产谷氨酰胺转胺酶的H-197菌株发酵产生MTG,发酵液通过高速离心、冷冻浓缩、乙醇沉淀、冷冻干燥,制得粗酶粉,粗酶粉溶解后经过Sephadex G-75柱得到较纯酶样.结果表明:经冷冻浓缩、乙醇沉淀后其活力回收率为44.6%,酶的比活为0.83 U/mg,较浓缩前增加了2.43倍;粗酶经Sephadex G-75凝胶过滤层析后得到较纯的酶,酶的比活力为1.44 U/mg,最终纯化倍数达7.08.

GSK980TDb系统常用指令的特殊用法

GSK980是广州数控机床厂模仿Fanuc系统制作的一个系统,其中GSK980TDb是最新研制的最新版本的系统。它的编程指令跟Fanuc系统的一样的,常用的准备功能G指令有G01、G02、G03、G50、G71、G72、G73、G75、G76、G92等等。本文主要是针对系统中的G50、G75和G72三个指令,在教学的常用用法,努力开发它的特殊用法,使其能够应用到更多的场合和工艺过程。