Group Ⅱ p21-activated kinases as therapeutic targets in gastrointestinal cancer

P21-activated kinases(PAKs) are central players in various oncogenic signaling pathways. The six PAK family members are classified into group Ⅰ(PAK1-3) and group Ⅱ(PAK4-6). Focus is currently shifting from group Ⅰ PAKs to group Ⅱ PAKs. Group Ⅱ PAKs play important roles in many fundamental cellular processes, some of which have particular significance in the development and progression of cancer. Because of their important functions, group Ⅱ PAKs have become popular potential drug target candidates. However, few group Ⅱ PAKs inhibitors have been reported, and most do not exhibit satisfactory kinase selectivity and "drug-like" properties. Isoform- and kinase-selective PAK inhibitors remain to be developed. This review describes the biological activities of group Ⅱ PAKs, the importance of group Ⅱ PAKs in the development and progression of gastrointestinal cancer, and smallmolecule inhibitors of group Ⅱ PAKs for the treatment of cancer.

新型p-21活化激酶4抑制剂的研发进展

目的研究p-21活化激酶4(p21-activated kinase 4,PAK4)抑制剂在肿瘤治疗中的应用,为新型PAK4抑制剂的研发提供参考。方法从母核结构、共晶结构、药物活性、药代动力学、作用机制等方面,对小分子PAK4抑制剂进行论述。结果在多种PAK4抑制剂结构类型中,苯并呋喃类化合物KPT-9274对PAK4的抑制活性显著,对多种癌症具有抗肿瘤作用,是目前唯一处于临床试验阶段的PAK4抑制剂,可以作为今后PAK4抑制剂设计的基础。结论对苯并呋喃类化合物进一步结构优化,有望获得活性更优的PAK4抑制剂用于抗肿瘤研究。

神经肽P物质对早产大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞凋亡的调控作用

目的探讨高氧对离体培养的早产大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡ)的影响及感觉神经肽P物质(SP)的保护作用及其与p38蛋白激酶(p38MAPK)信号转导机制的关系。方法分离纯化原代早产鼠AECⅡ,随机分为空气暴露组、高氧暴露组、SP干预空气暴露组及SP干预高氧暴露组。空气暴露组氧体积分数为0.21(21%),高氧暴露组氧体积分数为0.95(95%),SP干预组于暴露前加入SP1×10-6mol/L,在置于氧体积分数为0.21(21%)和0.95(95%)中各组分别暴露12、24、和48h,电镜观察AECⅡ的形态变化;MTT法及流式细胞仪测定其增殖率和凋亡率;蛋白质免疫印迹法(Westernblot)检测磷酸p38MAPK的动态变化。结果与空气暴露组比较,高氧组暴露12、24、48h后AECⅡ增殖率明显降低,凋亡率明显增加,而SP干预后其增殖率明显增加,凋亡率明显下降,形态学的损伤也有明显的改善。高氧刺激可导致p38的磷酸化激活,磷酸化p38在高氧损伤的AECⅡ表达明显增加,SP干预后,磷酸化p38表达明显降低。结论 P物质可促进高氧暴露AECⅡ的增殖并抑制AECⅡ的凋亡,SP通过抑制p38MAPK信号激活对氧化应激状态下的AECⅡ细胞可起到保护作用。

p-21活化激酶-1、Snail在结直肠癌侵袭与转移中的作用

目的观察p-21活化激酶-1（PAK1）、Snail在结直肠癌侵袭与转移中的作用。方法采用荧光原位杂交和免疫组织化学方法分别检测60例结直肠癌患者的正常结直肠黏膜与结直肠癌组织中PAK1和Snail的表达，分析两者在结卣肠癌中表达的意义以及相关性。结果PAK1mRNA、SnailmRNA存结随肠癌中的表达率分别为70．00％（42／60）和73．33％（44／60），均显著高于正常对照组（P〈0．05）；PAK1mRNA在Dukes不同分期中表达差异有统计学意义（x2=6．0708，P〈0．05），在有淋巴结转移的结直肠癌中表达显著高于无淋巴结转移的结直肠癌（x2=5．8764，P〈0．05）；SnailmRNA存Dukes不同分期中表达差异有统计学意义（x2=6．7930，P〈0．05），在有淋巴结转移的结直肠癌中表达显著高于无淋巴结转移的结直肠癌（x2=6．2130，P〈0．05）；PAK1和Snail蛋白在结直肠癌组织巾的表达呈正相关（r=0．31924，P〈0．05）。结论PAK1和Snail的高表达与结直肠癌的侵袭和转移有关；PAK1和Snail在结直肠癌侵袭和转移过程中可能存在相互促进作用。

动态压应力对生长板软骨前体干细胞PTHrP及细胞外基质mRNA表达的影响

目的 研究动态压应力对体外培养的大鼠生长板软骨前体干细胞甲状旁腺激素相关肽（PTHrP）以及软骨特性细胞外基质mRNA表达的影响.方法 免疫磁珠分选并体外培养大鼠软骨前体干细胞,用自行设计制作的可控细胞压力加载装置对细胞进行不同强度（30 mmHg、60 mmHg、90mmHg）和持续时间（1 h、6 h、24 h）的压应力刺激,未刺激组为对照组,采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术分别检测各组细胞的PTHrP以及软骨特性细胞外基质（Ⅱ型胶原、X型胶原以及aggreean）mRNA表达并进行半定量分析.结果 生长板软骨前体干细胞在30 mmHg、60 mmHg、90 mmHg动态压力培养环境下,各时间点PTHrP、Ⅱ型胶原以及aggrecan mRNA表达水平明显增强并高于对照组（P〈0.05）;Ⅱ型胶原以及aggrecan mRNA表达水平于6h达高峰,PTHrP mRNA的表达水平随时间增加而增强,24 h仍有较高水平的表达;且压力值越大,相同时间点mRNA相对表达量越高.X型胶原表达水平较低且与对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）.结论 适当的动态压应力能有效促进体外培养的大鼠软骨前体干细胞Ⅱ型胶原及aggreean mRNA表达,PTHrP在此力学信号转导过程中可能起重要的作用.

沉默PAK4基因对胶质瘤细胞U251侵袭与迁移能力的影响

目的观察沉默P21活化酶4(p-21 activated kinase 4, PAK4)基因对神经胶质瘤细胞U251侵袭与迁移能力的影响。方法构建稳定沉默PAK4基因的U251细胞系,shRNA-U251(转染空载组作为对照即shNC组);应用免疫荧光实验检测PAK4在胶质瘤细胞系U251中的表达;应用细胞划痕愈合实验与Transwell侵袭实验比较两组细胞的迁移与侵袭能力的变化;通过Western blotting实验检测沉默PAK4基因后U251细胞系中基质金属蛋白酶MMP2与MMP9的表达改变。结果 PAK4蛋白主要表达于胶质瘤细胞系U251细胞核与细胞质; shRNA-U251组细胞划痕愈合率明显降低; shRNA-U251组细胞进入小室下壁的数量明显减少,shRNA-U251组细胞MMP2与MMP9蛋白的表达水平显著下调。结论沉默PAK4基因下调神经胶质瘤细胞U251的迁移与侵袭能力与降低基质金属蛋白酶MMP2、MMP9的表达相关。