非小细胞肺癌组织中lncRNA GAS5、LHPP表达与上皮间质化相关性及临床意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者癌组织中长链非编码核糖核酸生长抑制特异性基因5(lncRNA GAS5)、磷酸赖氨酸磷酸组氨酸无机焦磷酸盐磷酸酶(LHPP)表达与上皮间质化(EMT)相关性及临床意义。方法收集2018年6月至2020年1月在河北北方学院附属第一医院行手术切除的NSCLC 90例患者的癌组织及癌旁组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测lncRNA GAS5、LHPP和EMT相关蛋白[E-钙黏蛋白(E-Cad)、N-钙黏蛋白(N-Cad)和波形蛋白(VIM)]表达。分析NSCLC患者癌组织中lncRNA GAS5、LHPP mRNA与临床病理特征的关系,并通过Pearson相关性分析NSCLC患者癌组织中lncRNA GAS5、LHPP mRNA与EMT相关蛋白表达的相关性。采用Kaplan-Meier法绘制不同lncRNA GAS5、LHPP mRNA表达的NSCLC患者生存曲线,多因素Cox回归分析NSCLC患者预后的影响因素。结果NSCLC患者癌组织中lncRNA GAS5、LHPP mRNA、E-Cad mRNA表达低于癌旁组织,N-Cad mRNA、VIM mRNA表达高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,NSCLC患者癌组织中lncRNA GAS5与E-Cad mRNA表达呈正相关(r=0.724,P<0.001),与N-Cad mRNA、VIM mRNA表达呈负相关(r=-0.699、-0.689,P<0.001);lncRNA GAS5与LHPP mRNA表达呈正相关(r=0.651,P<0.001)。不同分化程度、肿瘤TNM分期、淋巴结转移的NSCLC患者癌组织中lncRNA GAS5、LHPP mRNA表达比较差异有统计学意义(P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线分析显示,lncRNA GAS5高表达组的3年总生存率[68.18%(30/44)]高于lncRNA GAS5低表达组的3年总生存率[36.96%(17/46)];LHPP mRNA高表达组的3年总生存率[67.39%(31/46)]高于LHPP mRNA低表达组的3年总生存率[36.36%(16/44)],差异有统计学意义(χ^(2)=10.274、10.322,P<0.05)。低分化、肿瘤TNM分期Ⅲ期、有淋巴结转移为NSCLC患者死亡的独立危险因素,lncRNA GAS5≥1.32、LHPP mRNA≥1.12为独立保护因素(P<0.05)。结论NSCLC患者癌组织中lncRNA GAS5、LHPP mRNA低表达,与EMT相关蛋白表达、分化程度、肿瘤TNM分期、淋巴结转移和预后有关,可能成为NSCLC诊治的新靶点。

BlueScreen HC在食品接触材料多组分迁移物遗传毒性检测中的适用性

目的探讨基于人生长阻滞和DNA损伤诱导45α(GADD45α)基因的遗传毒性高通量筛选体系BlueScreen HC(BSHC)在食品接触材料多组分迁移物遗传毒性检测中的适用性。方法将人GADD45α基因开放阅读框上游2000 bp序列作为启动子,采用分子克隆构建入嘌呤霉素和高斯荧光素酶(Gluc)双标记的慢病毒质粒pEZX-LvPG04中,并用慢病毒感染人淋巴母细胞TK6,获得稳转细胞系TK6-Gluc。以甲基磺酸甲酯(MMS,终浓度0,1.56,3.13,6.25,12.5,25.0和50.0 mg·L^(-1))为非代谢活化条件下的阳性物质,环磷酰胺(CTX,终浓度0,0.78,1.56,3.13,6.25,12.5和25.0 mg·L^(-1))为代谢活化条件下的阳性物质,二甲基亚砜(DMSO,终浓度0,0.35,0.69,1.38,2.75,5.5和11.0 g·L^(-1))为阴性物质,分别在非活化和活化条件下验证构建的BSHC。将改性淀粉/聚对苯二甲酸-己二酸丁二醇酯(MS/PBAT)作为研究对象,采用体积分数4%乙酸及10%,20%,50%和95%乙醇作为食品模拟物,40℃、浸泡24 h获得5份MS/PBAT多组分迁移物,并用DMSO作为溶剂复溶得到5份多组分迁移溶液作为受试物。以终浓度为0,0.38,0.76,1.53,3.05,6.10和12.20 g·L^(-1)的不同受试物在活化和非活化2种条件下处理TK6-Gluc细胞。非活化条件下作用48 h;活化条件下,在添加体积分数1%大鼠肝S9代谢活化系统的同时,作用3 h后更换新鲜培养基,继续培养至48 h。处理结束后,采用CCK-8法检测细胞活性,同时采用Secrete-Pair^(TM)Gaussia Luciferase Assay试剂盒检测培养基中Gluc化学发光强度。另外,采用终浓度为3.05和12.20 g·L^(-1)的不同受试物对鼠伤寒沙门氏菌TA98和TA100进行微量波动Ames试验以及对体外培养的中国仓鼠肺细胞CHL进行体外哺乳细胞染色体畸变试验,检测受试物的致突变和染色体畸变作用,与BSHC遗传毒性结果进行对比分析。结果采用BSHC法,将相对细胞活性80%定义为生长抑制的最低有效浓度阈值,实验组相对细胞活性低于溶剂对照组的80%提示化合物引起细胞生长抑制。将实验组相对细胞活性低于溶剂对照组的30%定义为出现细胞毒性,此时将不考虑遗传毒性。在无细胞毒性前提下,活化条件下实验组Gluc化学发光强度大于溶剂对照组的1.8倍时,非活化条件下实验组Gluc化学发光强度大于溶剂对照组的1.5倍时,判定为遗传毒性阳性;反之认为无遗传毒性。与溶剂对照组相比,阴性物质DMSO所有浓度均未产生遗传毒性。非活化条件下,MMS 12.5,25.0和50.0 mg·L^(-1)产生遗传毒性;活化条件下,CTX 6.25,12.5和25.0 mg·L^(-1)产生遗传毒性。非活化条件下,MS/PBAT的95%乙醇迁移物6.10和12.20 g·L^(-1)和MS/PBAT的50%乙醇迁移物12.20 g·L^(-1)组细胞生长抑制,所有处理组均未观察到相对细胞活性低于30%的细胞毒性,且未观察到Gluc高表达,表明5种MS/PBAT多组分迁移物在非活化条件下均未产生遗传毒性。活化条件下,MS/PBAT的95%乙醇迁移物12.20 g·L^(-1)和MS/PBAT的4%乙酸迁移物6.10,12.20 g·L^(-1)组细胞表现出显著的生长抑制,所有处理组均未观察到相对细胞活性低于30%的细胞毒性,且未观察到Gluc高表达,表明5种MS/PBAT多组分迁移物在活化条件下均未产生遗传毒性。微量波动Ames试验结果表明,在活化和非活化条件下,MS/PBAT的5种多组分迁移物3.05和12.20 g·L^(-1)作用于TA98和TA1002种菌株,致突变阳性孔的数量均不超过溶剂对照组的2倍,即均未产生致突变作用;作用于CHL细胞后的细胞染色体畸变率亦均无显著变化。结论初步建立了基于GADD45α基因的遗传毒性高通量筛选方法BSHC,提示可用于食品接触材料多组分迁移物的体外遗传毒性评价,但仍需进一步探索其最低有效浓度,并应用更多种类混合物进行进一步验证。

血清视黄醇结合蛋白-4、生长停滞特异性蛋白6水平与急性心肌梗死合并心力衰竭患者预后的关系

目的探讨血清视黄醇结合蛋白-4(RBP-4)、生长停滞特异性蛋白6(GAS6)水平与急性心肌梗死(AMI)合并心力衰竭(HF)患者预后的关系。方法选取2020年1月至2022年1月内蒙古自治区通辽市医院收治的186例AMI合并HF患者,根据随访1年的预后将其分为预后不良组(61例)和预后良好组(125例)。采用酶联免疫吸附试验检测两组RBP-4、GAS6水平。采用多因素logistic回归模型分析AMI合并HF患者预后不良的影响因素,采用受试者操作特征曲线分析血清RBP-4、GAS6水平对AMI合并HF患者预后不良的预测价值。结果预后不良组年龄、急性HF占比、N末端前体B型钠尿肽、RBP-4水平高于预后良好组,左室射血分数、GAS6低于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素分析显示,年龄(OR=1.091,95%CI:1.016~1.173)、急性HF(OR=2.468,95%CI:1.030~5.913)、N末端前体B型钠尿肽(OR=1.002,95%CI:1.001~1.003)、RBP-4(OR=1.156,95%CI:1.076~1.242)、左室射血分数(OR=0.829,95%CI:0.725~0.948)、GAS6(OR=0.342,95%CI:0.195~0.599)均为AMI合并HF患者预后不良的影响因素(P<0.05)。受试者操作特征曲线分析显示,血清RBP-4、GAS6水平单独及联合预测AMI合并HF患者预后不良的曲线下面积分别为0.786、0.790、0.895(P<0.05)。结论血清RBP-4水平升高和GAS6水平降低与AMI合并HF患者预后不良有关,二者联合对AMI合并HF患者预后不良具有良好预测价值。

炎症反应在光气致急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征中的研究进展

光气目前广泛应用于工业生产,其毒性较大,在生产、储存、使用过程中因泄漏而引起的中毒问题不容忽视。急性光气暴露可引起呼吸抑制、难治性肺水肿等相关肺损伤,严重者可致急性呼吸窘迫综合征(ARDS)甚至死亡。急性光气中毒病死率高、预后差,缺乏特异性治疗,炎症反应在其中起重要作用。本文对炎症反应在光气致急性肺损伤(P-ALI)/ARDS损伤机制及治疗中的作用进行综述,并总结了可能的信号通路,讨论了更多潜在的治疗靶点,以及当前针对P-ALI/ARDS抗炎治疗的研究现状,以期帮助临床医师及研究人员迅速了解目前全球P-ALI/ARDS领域在炎症方面的最新研究动态,为治疗P-ALI/ARDS及新药物的研发提供思路和帮助。

长链的非编码RNA生长停滞特异性转录本5在骨关节炎中的研究进展

骨关节炎(OA)是一种以软骨退变、骨重建为主要病理特点的慢性关节疾病。目前没有可治愈该疾病的药物及手段,治疗策略有限的根本原因是对其潜在发病机制的认识不足。长链的非编码RNA(LncRNAs)被认为是许多疾病中的一类新的调控因子,是目前研究OA发病机制的一个重要切入点。LncRNA生长停滞特异性转录本5(Cas5)参与调控细胞的增殖、分化及凋亡,是一种在软骨细胞中特异性高表达的LncRNA。然而,由于LncRNA Cas5作用机制复杂,其与OA相关具体分子机制目前仍不明确。该文针对LncRNA Cas5在OA中的软骨细胞凋亡、软骨基质代谢成骨分化及治疗方面的作用进行综述。

Myo、Gas6、SOX9 mRNA在AMI患者中的表达意义及在PCI术后联合检测对预后的评估价值

目的探讨肌红蛋白(Myo)、生长停滞特异性蛋白6(Gas6)、SRY相关高迁移率族蛋白9(SOX9)在急性心肌梗死(AMI)患者中的表达意义,同时将患者预后经皮冠状动脉介入治疗(PCI)联合检测评估价值。方法选择2020年1月至2021年6月期间接收的AMI患者,共计166例,并将其纳入研究组,同时选取健康志愿者,将其纳入对照组,共计90例。酶联免疫吸附法测定血清Myo、Gas6水平,SOX9 mRNA分离试剂盒提取RNA检测;根据患者住院期间是否发生心血管不良事件(MACCE)将研究组患者分为MACCE组和非MACCE组;对比研究组和对照组Myo、Gas6、SOX9 mRNA表达情况;对比Myo、Gas6、SOX9 mRNA在AMI患者PCI术前后中表达情况;单因素/多因素分析MACCE组和非MACCE组资料临床差异;分析Myo、Gas6、SOX9 mRNA联合对AMI预后评估价值。结果相较于对照组,研究组Myo和Gas6明显较高,SOX9 mRNA表达明显较低(P<0.05);术后,研究组患者Myo、Gas6表达明显降低,SOX9 mRNA明显升高(P<0.05);MACCE组Myo和Gas6明显高于非MACCE组,SOX9 mRNA表达明显低于非MACCE组(P<0.05)。Logistic回归模型结果显示年龄大、术后出血、Myo和Gas6表达高、SOX9 mRNA表达低是影响经PCI治疗AMI患者发生MACCE独立危险因素(P<0.05)。Myo、Gas6、SOX9 mRNA联合评估AMI预后受试者工作特征(ROC)曲线下面积为0.936,具有较高的特异度以及敏感度,且显著高于单独Myo、Gas6、SOX9 mRNA检测ROC曲线下面积为0.706、0.696和0.711(Z=2.261,P<0.05)。结论对于AMI患者而言,其Myo和Gas6表达明显较高,SOX9 mRNA表达明显降低,而经PCI术治疗可有效改善患者Myo、Gas6和SOX9 mRNA水平;三者联合对PCI术后发生MACCE具有明显评估作用,尽早为患者提供诊疗方案,值得在临床推广应用。

血清Gas6、CXCL10对非小细胞肺癌术后肺部细菌感染的诊断价值

目的探究血清生长停滞特异性蛋白6(Gas6)、CXC趋化因子配体10(CXCL10)对非小细胞肺癌(NSCLC)术后肺部细菌感染的诊断价值。方法选取2021年1月至2023年3月在该院进行手术治疗的NSCLC患者107例,根据术后是否发生肺部细菌感染分为感染组(35例)和未感染组(72例)。收集NSCLC患者临床资料,酶联免疫吸附试验检测血清Gas6、CXCL10水平,对NSCLC术后发生肺部细菌感染患者进行病原菌鉴定。采用多因素Logistic回归分析NSCLC患者术后肺部细菌感染的影响因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清Gas6、CXCL10对NSCLC患者术后肺部细菌感染的预测价值,并计算Kappa值评价血清Gas6、CXCL10与金标准的一致性。结果107例NSCLC患者术后肺部细菌感染35例,培养分离出细菌52株,其中革兰阳性菌29株,革兰阴性菌23株,肺炎链球菌占比最高为30.77%。感染组年龄≥60岁、手术时间≥3 h、住院时间≥30 d、有侵入性操作比例及血清Gas6、CXCL10水平显著高于未感染组,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,有侵入性操作、Gas6、CXCL10是NSCLC患者术后肺部细菌感染的影响因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清Gas6、CXCL10及联合预测NSCLC患者术后肺部细菌感染的曲线下面积(AUC)分别为0.720、0.863、0.938,其中联合预测AUC显著高于二者单独预测AUC(Z_(联合-Gas6)=3.392,Z联合-CXCL10=1.432,P<0.05);血清Gas6、CXCL10及联合检查结果与金标准诊断结果一致性的Kappa值分别为0.471、0.713、0.730(P<0.05)。结论Gas6、CXCL10水平在NSCLC术后肺部细菌感染患者血清中升高,对术后肺部细菌感染的发生具有一定的预测价值。

血清标志物对老年慢性阻塞性肺疾病合并肺部感染临床诊断及预后评估的价值分析

目的探讨血清生长停滞特异性蛋白6(Gas6)、纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)和血清胆碱酯酶(S-ChE)对老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并肺部感染临床诊断及预后评估的价值。方法选择首都医科大学附属北京天坛医院2021年1月至2023年1月收治的106例COPD合并肺部感染患者作为感染组,另纳入同期111例COPD未合并肺部感染患者作为非感染组。根据预后情况将感染组患者分为生存组(83例)与死亡组(23例)。比较非感染组和感染组患者血清Gas6、PAI-1、S-ChE水平。比较生存组和死亡组患者一般资料。采用受试者工作特征曲线分析血清Gas6、PAI-1和S-ChE对老年COPD患者发生肺部感染以及肺部感染患者发生死亡的预测价值;采用多因素Logistic回归方法分析影响老年COPD合并肺部感染患者预后的因素。结果感染组血清Gas6、PAI-1水平高于非感染组,S-ChE水平低于非感染组,差异均有统计学意义(均P<0.001)。受试者工作特征曲线分析结果显示,血清Gas6、PAI-1、S-ChE及三者联合诊断COPD患者发生肺部感染的曲线下面积分别为0.787、0.797、0.782、0.889,三者联合诊断的曲线下面积高于各自单独诊断(Z=4.527、5.435、4.167,均P<0.001)。死亡组COPD全球倡议Ⅲ级、合并糖尿病比例以及血清Gas6、PAI-1水平高于生存组,第1秒用力呼气容积占预计值百分比、第1秒用力呼气容积与用力肺活量比值以及S-ChE水平低于生存组(均P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,Gas6、PAI-1是老年COPD并发肺部感染患者发生死亡的危险因素,S-ChE是保护因素(均P<0.05)。受试者工作特征曲线分析结果显示血清Gas6、PAI-1、S-ChE三者联合诊断COPD合并肺部感染患者死亡的曲线下面积高于各自单独检测(均P<0.05)。结论老年COPD合并肺部感染患者血清Gas6、PAI-1水平升高,S-ChE水平降低,三者对疾病的临床诊断和预后评估具有一定的价值。

生长阻滞特异性转录因子5剪接变异体GAS5_O1增强慢性髓系白血病细胞对伊马替尼的敏感性

在多种肿瘤中,生长阻滞特异性转录因子5(growth-arrest specific transcript 5,GAS5)高表达与患者的良好生存期相关。GAS5存在多种剪接变异体,本研究探讨GAS5部分剪接变异体在髓系白血病细胞系中的表达模式。并基于对凋亡诱导敏感的慢性髓系白血病(chronic myeloid leukemia,CML)细胞系K562,研究GAS5部分剪接变异体对K562细胞自身增殖、凋亡以及对靶向药物伊马替尼(imatinib,IM)的敏感性的影响。反转录PCR结果显示,GAS5剪接模式在髓系白血病细胞系HL-60、K562、NB4和KASUMI-1之间未见明显差异。相较于指数增长期,GAS5_AE表达水平在细胞密度引起的生长停滞期有一定程度的累积。通过核转染,将GAS5剪接变异体(pcDNA3-GAS5_1B、-GAS5_2B、-GAS5_3A、-GAS5_4A、-GAS5_O1或-GAS5_AE)转入K562细胞的单克隆株中。通过台盼蓝染色、吖啶橙染色后进行细胞计数,克隆形成实验检测细胞集落形成能力。结果与对照组相比,瞬时转染GAS5剪接变异体并无抑制细胞的基础增殖或增强细胞对药物的敏感性。建立GAS5_O1的稳定转染株,延长培养时程并计算倍增时间,发现GAS5_O1的表达水平和倍增时间成正比(R^(2)=0.5692)。在稳转株O1-C8中观察到GAS5_O1可促进IM引起的细胞生长抑制(56.94%±2.84%vs.36.07%±2.32%,P<0.05)和凋亡(29.33%±1.30%vs.52.00%±2.52%,P<0.05)。上述结果表明,GAS5_O1的上调可能增加CML细胞的倍增时间,并使CML细胞对IM处理敏感。

GADD45β在骨关节炎中的作用及其对MKK7/JNK途径的影响

目的探讨生长抑制和DNA损伤诱导基因45β(GADD45β)在骨关节炎(OA)发生发展中的作用及机制。方法将大鼠软骨细胞分为对照组、IL-1β组、NC-OE+IL-1β组、GADD45βOE+IL-1β组、NC-sh+IL-1β组和GADD45βsh+IL-1β组。除对照组之外,其他组细胞均采用10 ng/mL的IL-1β处理24 h。采用MTT法和TUNEL法检测软骨细胞增殖和凋亡。将SD大鼠分为假手术组、OA组、NC-OE+OA组和GADD45βOE+OA组,每组12只。假手术组大鼠只进行假手术操作,其他组大鼠均为前交叉韧带切断加内侧半月板部分切除法诱导的OA模型大鼠。假手术组和OA组大鼠关节腔内注射磷酸盐缓冲液,NC-OE+OA组和GADD45βOE+OA组大鼠关节腔内分别注射NC-OE和GADD45βOE慢病毒,每周注射1次,共4周。采用番红O-固绿染色观察大鼠软骨降解并进行OARSI评分,采用TUNEL染色检测大鼠软骨细胞凋亡。采用RT-qPCR检测GADD45β、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶(MMP)3、MMP13、IL-1β、IL-6、TNF-α的mRNA水平。采用Western blot检测GADD45β、丝裂原活化蛋白激酶激酶7(MKK7)、p-MKK-7、c-Jun氨基末端激酶(JNK)1/2/3和p-JNK1/2/3的蛋白水平。结果与对照组比较,IL-1β组软骨细胞的GADD45βmRNA和蛋白水平降低,相对细胞活力和Bcl-2 mRNA水平均降低,TUNEL阳性率以及Bax、MMP3、MMP13、IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA水平均升高,MKK-7和JNK1/2/3的相对磷酸化水平升高(P<0.05)。与IL-1β组和NC-OE+IL-1β组比较,GADD45βOE+IL-1β组软骨细胞的GADD45βmRNA和蛋白水平升高,相对细胞活力和Bcl-2 mRNA水平均升高,TUNEL阳性率以及Bax、MMP3和MMP13、IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA水平均降低,MKK-7和JNK1/2/3的相对磷酸化水平降低(P<0.05)。与IL-1β组和NC-sh+IL-1β组比较,GADD45βsh+IL-1β组软骨细胞的GADD45βmRNA和蛋白水平降低,相对细胞活力和Bcl-2 mRNA水平均降低,TUNEL阳性率以及Bax、MMP3、MMP13、IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA水平均升高,MKK-7和JNK1/2/3的相对磷酸化水平升高(P<0.05)。与假手术组比较,OA组大鼠的GADD45β的mRNA和蛋白水平降低,Bcl-2 mRNA水平降低,OARSI评分和TUNEL阳性率均升高,Bax、MMP3、MMP13、IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA水平均升高,MKK-7和JNK1/2/3的相对磷酸化水平升高(P<0.05)。与OA组和NC-OE+OA组比较,GADD45βOE+OA组大鼠的GADD45β的mRNA和蛋白水平升高,Bcl-2 mRNA水平升高,OARSI评分和TUNEL阳性率均降低,Bax、MMP3、MMP13、IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA水平均降低,MKK-7和JNK1/2/3的相对磷酸化水平降低(P<0.05)。结论GADD45β在OA中下调,上调GADD45β可能通过抑制MKK7/JNK途径抑制OA进展。

玻璃体腔注射雷珠单抗对增殖性糖尿病性视网膜病变患者视力及血清GAS6、SDF-1及VEGF的影响

目的 探讨增殖性糖尿病视网膜病变(PDR)给予玻璃体腔注射雷珠单抗药物对患者视力以及血清人生长停滞特异性蛋白(GAS6)、人基质细胞衍生因子1(SDF-1)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)影响。方法 纳入2022年1月至12月收治的PDR患者82例,按照随机数字表法分为观察组和对照组,每组41例。对照组采用玻璃体切割术(PPV)治疗,观察组采用联合玻璃体切割术(PPV)术前经玻璃体腔注射雷珠单抗治疗。对比2组的治疗效果,2组患者术前与术后1周的视力以及眼压水平,2组患者术前与术后1周血清GAS6、SDF-1、VEGF水平变化,2组术后并发症发生情况。结果 观察组治疗总有效率为95.12%高于对照组的78.05%(P<0.05)。2组患者术后1周的眼压、血清GAS6、SDF-1、VEGF水平均较术前降低,且观察组术后1周的上述指标水平低于对照组(P<0.05)。2组术后1周视力较术前升高,且观察组视力水平高于对照组(P<0.05)。观察组患者术后并发症总发生率为4.88%低于对照组的24.39%(P<0.05)。结论 应用玻璃体腔注射雷珠单抗辅助PPV治疗PDR,效果满意,可显著提高患者视力,降低眼压,降低血清GAS6、SDF-1、VEGF水平,且术后并发症发生率低,值得推广。

老年下肢深静脉血栓患者血清Gas6、IL-1β、NETs水平与介入治疗效果的关系

目的探讨老年下肢深静脉血栓(DVT)患者血清生长停滞特异性基因产物6(Gas6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、中性粒细胞胞外陷阱(NETs)水平与介入治疗效果的关系。方法选取2021年2月至2023年1月该院收治的120例老年DVT患者为研究对象,根据治疗7 d后临床疗效分为无效组(22例)和有效组(98例)。比较两组治疗前及治疗3、7 d后血清Gas6、IL-1β、NETs水平,分析治疗3、7 d后血清Gas6、IL-1β、NETs水平与治疗效果的关系。结果无效组与有效组Gas6、IL-1β、NETs水平存在时间与组间的交互效应,差异有统计学意义(F交互=15.214,P<0.001);两组Gas6、IL-1β、NETs水平随着治疗时间变长而逐渐降低,差异均有统计学意义(F=12.375、12.271、13.277,P<0.001);无效组Gas6、IL-1β、NETs水平明显高于有效组,差异均有统计学意义(F=23.537、22.851、23.213,P<0.001)。治疗3、7 d后血清Gas6、IL-1β、NETs联合检测预测DVT患者介入治疗无效的曲线下面积明显大于各项指标单独检测(P<0.05)。结论血清Gas6、IL-1β、NETs水平对预后有明显影响,3项指标联合检测可作为预测DVT患者介入治疗效果的重要辅助途径。

血浆miR-379、miR-195、Gas6水平早期检测在AMI患者中的应用价值

目的分析血浆微小RNA-379(miR-379)、微小RNA-195(miR-195)、生长停滞特异性蛋白6(Gas6)水平早期检测在急性心肌梗死(AMI)患者中的应用价值。方法选取2021年5至2022年7月于首都医科大学附属北京世纪坛医院心内科住院治疗的265例患者,分为AMI组(n=127)和非AMI组(n=138),选取同期120名健康体检者设为对照组。比较三组入组时的血浆miR-379、miR-195表达量及Gas6水平;采用Pearson相关系数分析AMI患者入组时的血浆Gas6水平与miR-379、miR-195表达量的关系;采用受试者工作曲线(ROC)分析入组时的血浆Gas6水平及miR-379、miR-195表达量对早期AMI的诊断价值。结果三组入组时的血浆miR-379、miR-195、Gas6水平比较差异有统计学意义(P<0.05);血浆miR-379水平比较:AMI组<非AMI组<对照组,miR-195、Gas6水平比较:AMI组>非AMI组>对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关系数分析显示,Gas6与miR-379水平呈负相关(P<0.05),与miR-195水平呈正相关(P<0.05)。ROC结果显示,血浆miR-379、miR-195、Gas6水平单独诊断早期AMI具有一定局限性(AUC=0.808、0.718、0.752),三者联合诊断的效能更佳(AUC=0.879)。结论血浆miR-379、miR-195、Gas6水平在AMI患者中异常表达,三指标可作为AMI早期疾病诊断的参考指标。

SOCS-3、Gadd45β在脓毒症相关性脑病患儿中的表达及预测价值

目的:分析细胞因子信号传导抑制因子-3(suppressor of cytokine signaling-3,SOCS-3)、生长抑制与DNA损伤修复相关基因β(growth arrest and DNA-damage inducible geneβ,Gadd45β)在脓毒症相关性脑病患儿中的表达及预测价值。方法:选取2021年1月—2023年6月贵州省人民医院收治的22例脓毒症相关性脑病患儿作为研究组,同期选取本院42例脓毒症未合并相关性脑病患儿作为对照组。检测并比较两组肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、免疫功能指标及SOCS-3、Gadd45β表达情况,分析SOCS-3、Gadd45β对脓毒症相关性脑病的预测价值。结果:研究组TNF-α、IL-6水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)^(+)均低于对照组,CD8高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组SOCS-3、Gadd45β表达情况均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析,SOCS-3、Gadd45β联合预测价值最高。结论:脓毒症相关性脑病患儿炎症反应加重,免疫水平降低,SOCS-3、Gadd45β呈现高表达,两者对脓毒症相关性脑病均有一定诊断价值,且联合诊断临床意义更明显,为临床治疗提供新的靶点和策略。

血清生长停滞特异性蛋白6、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1水平与创伤性颅脑损伤患者病情及继发性认知障碍的相关性研究

目的探讨血清生长停滞特异性蛋白6(Gas6)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(caspase-1)与创伤性颅脑损伤患者病情及继发性认知障碍的相关性。方法选取2021年1月至2023年6月阳泉市第二人民医院神经外科收治的118例创伤性颅脑损伤患者,根据格拉斯哥昏迷量表(GCS)评分和伤后原发昏迷时间的长短分为轻型组(GCS评分13~15分,伤后昏迷30 min内,n=25),中型组(GCS评分9~12分,伤后昏迷0.5~6.0 h,n=50),重型组(GCS评分3~8分或无法进行评分,伤后昏迷6 h以上,n=43)。另选择同期在阳泉市第二人民医院体检的50例健康者纳入健康组。采用酶联免疫吸附法检测四组纳入者血清Gas6、caspase-1水平,比较健康组、观察组的血清Gas6、caspase-1水平,以及不同程度创伤性颅脑损伤患者于不同时间点的血清Gas6、caspase-1水平。采用蒙特利尔认知评估量表(MoCA)对患者入院1个月后的认知功能进行评分,比较不同认知功能患者血清Gas6、caspase-1水平。采用Spearman法分析血清Gas6、caspase-1水平与认知功能的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清Gas6、caspase-1水平对创伤性颅脑损伤发生认知功能障碍的诊断价值。结果轻、中、重型组血清Gas6、caspase-1高于健康组(P<0.05)。重型组的Gas6、caspase-1水平明显高于轻、中型组(P<0.05);有认知障碍组的Gas6、caspase-1水平显著高于无认知障碍组(P<0.05)。患者的血清Gas6、caspase-1水平均与MoCA评分呈负相关(rGas6=-0.546,rcaspase-1=-0.637,P<0.05)。Gas6、caspase-1单独诊断创伤性颅脑损伤继发认知功能障碍的AUC分别为0.868、0.841,灵敏度分别为77.8%、59.3%,特异度分别为85.9%、95.3%;联合诊断时的AUC为0.930,对联合诊断和单独诊断比较,结果Z二者联合-Gas6=2.421,Z二者联合-caspase-1=2.536(P<0.05),灵敏度为85.2%,特异度为90.6%,联合诊断优于单独诊断;当Gas6水平高于7.24µg/L,caspase-1水平高于8.86µg/L时,患者继发认知功能障碍的风险会增加。结论创伤性颅脑损伤患者血清中的Gas6、caspase-1水平与病情程度和继发性认知功能障碍相关,二者联合用于诊断患者的认知功能障碍具有临床意义。

血清Gas6水平联合CHA_(2)DS_(2)-VASc评分对STEMI患者PCI术后短期发生MACE的预测价值

目的探讨血清生长停滞特异性蛋白6(Gas6)水平联合CHA_(2)DS_(2)-VASc评分对ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者经皮冠状动脉介入术(PCI)后短期发生主要不良心血管事件(MACE)的预测价值。方法选取2020年7月—2022年6月新乡医学院第一附属医院收治的220例接受PCI的STEMI患者为STEMI组,根据PCI术后3个月是否发生MACE将STEMI组患者分为MACE组和非MACE组。另选取同期68例健康体检志愿者为对照组。收集STEMI患者的临床资料,检测血清Gas6水平,计算CHA_(2)DS_(2)-VASc评分。采用多因素Logistic回归分析STEMI患者PCI术后3个月发生MACE的影响因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清Gas6水平和CHA_(2)DS_(2)-VASc评分对STEMI患者PCI术后3个月发生MACE的预测价值。结果STEMI组血清Gas6水平低于对照组(P<0.05)。随访3个月,220例STEMI患者PCI术后MACE发生率为18.64%(41/220)。MACE组的年龄、多支病变占比、KILLIP分级≥Ⅱ级占比、低密度脂蛋白胆固醇、肌酐、CHA_(2)DS_(2)-VASc评分高于非MACE组,单支病变占比、左心室射血分数(LVEF)、血红蛋白、Gas6低于非MACE组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,年龄[OR=1.227(95%CI:1.020,1.476)]、多支病变[OR=2.475(95%CI:1.327,4.616)]、KILLIP分级≥Ⅱ级[OR=4.050(95%CI:1.327,12.355)]、CHA_(2)DS_(2)-VASc评分[OR=1.849(95%CI:1.385,2.468)]为STEMI患者PCI术后3个月发生MACE的独立危险因素,LVEF[OR=0.878(95%CI:0.796,0.968)]和Gas6[OR=0.547(95%CI:0.378,0.793)]为其独立保护因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,Gas6联合CHA_(2)DS_(2)-VASc评分预测STEMI患者PCI术后3个月短期发生MACE的曲线下面积最大,为0.854(95%CI:0.800,0.898),敏感性为78.05%(95%CI:0.624,0.894),特异性为84.92%(95%CI:0.788,0.898)。结论血清Gas6水平和CHA_(2)DS_(2)-VASc评分与STEMI患者PCI术后短期发生MACE的关系密切,两者联合预测STEMI患者PCI术后短期发生MACE的价值较高。

血浆生物标志物在慢性肾脏病伴血栓栓塞患者中的表达及其近期预后评估价值

目的分析血浆生物标志物在慢性肾脏病(CKD)伴血栓栓塞患者中的表达及其在近期预后评估中的价值。方法选取2018年5月—2022年5月承德市中心医院93例CKD伴血栓栓塞患者(研究组),以93例单纯CKD患者作为对照组。检测所有患者血浆D-二聚体(DD)、生长停滞特异性蛋白6(GAS6)、血小板α颗粒膜糖蛋白(CD62P)、纤维蛋白原(Fib)水平。随访3个月以了解患者近期预后情况。采用Logistic回归分析评估近期预后影响因素,建立列线图预测模型。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血浆DD、GAS6、CD62P、Fib单独和联合检测判断CKD伴血栓栓塞患者近期预后的效能。结果研究组血浆DD、GAS6、CD62P、Fib水平均高于对照组(P<0.05);研究组预后不良发生率为24.73%。根据预后情况分为预后不良组(23例)和预后良好组(70例),2个组血栓栓塞类型和血浆DD、GAS6、CD62P、Fib差异有统计学意义(P<0.05)。血浆DD、GAS6、CD62P、Fib是CKD伴血栓栓塞患者近期预后不良的影响因素(P<0.001)。ROC曲线分析结果显示,血浆DD、GAS6、CD62P、Fib单项检测诊断CKD伴血栓栓塞患者近期预后不良的曲线下面积(AUC)[95%可信区间(CI)]分别为0.784(0.687~0.863)、0763(0.664~0.845)、0.824(0.731~0.895)、0.794(0.698~0.871),GAS6+CD62P+DD、GAS6+CD62P+Fib、CD62P+Fib+DD的AUC差异均无统计学意义(P>0.05)。根据4个危险因素建立CKD伴血栓栓塞患者近期预后列线图预测模型,结果显示,该列线图预测模型判断CKD伴血栓栓塞患者近期预后的AUC(95%CI)为0.866(0.812~0.945);校准度曲线显示,该列线图预测模型在GiViTI校准曲线带的80%~95%CI区域均未穿过45°角平分线。结论血浆DD、GAS6、CD62P、Fib在CKD伴血栓栓塞患者中呈高表达,4项指标联合检测可提高近期预后评估价值,有助于指导后续的个体化治疗。

卵巢癌组织中长链非编码RNA生长阻滞特异性抑制物5、微小RNA-205的表达及意义

目的分析长链非编码RNA(lncRNA)生长阻滞特异性抑制物5(GAS5)、微小RNA-205(miR-205)在卵巢癌组织中的表达及其临床意义。方法前瞻性收集2019年1月至2020年6月收治的初诊卵巢癌患者于术中取其癌组织和癌旁组织(距肿瘤边缘>2cm);采用实时荧光定量PCR法检测lncRNA GAS5、miR-205表达情况;问卷调查法统计患者临床病理资料;术后随访2年(截止时间至2022年6月),统计患者生存时间。比较癌组织和癌旁组织lncRNA GAS5、miR-205表达,并采用Pearson相关分析lncRNA GAS5与miR-205的关系;以癌组织lncRNA GAS5、miR-205表达的中位数将卵巢癌患者分为lncRNA GAS5与miR-205高表达组和低表达组,比较不同病理特征卵巢癌患者lncRNA GAS5、miR-205高表达、低表达情况;比较不同lncRNA GAS5、miR-205表达情况的卵巢癌患者生存时间。结果共82例卵巢癌患者纳入本次研究,其中2例失访,最终80例患者进入本次研究。卵巢癌组织lncRNA GAS5相对表达量小于癌旁正常组织,miR-205相对表达量大于癌旁正常组织(P<0.05);Pearson相关分析显示,卵巢癌组织中lncRNA GAS5相对表达量与miR-205相对表达量呈负相关(r=-0.606,P<0.001)。lncRNA GAS5高表达45例,低表达35例;miR-205高表达40例,低表达40例。Ⅲ~Ⅳ期、伴淋巴结转移的卵巢癌患者的卵巢组织中lncRNA GAS5低表达率高于Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移患者(P<0.05);Ⅲ~Ⅳ期、伴淋巴结转移的卵巢癌患者的卵巢组织中miR-205高表达率高于Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移患者(P<0.05)。lncRNA GAS5低表达量卵巢癌患者2年生存时间(21.50±0.89)个月,低于高表达患者(23.89±0.09)个月(χ2=5.150,P=0.023)。miR-205高表达量卵巢癌患者2年生存时间(21.71±0.79)个月,低于低表达患者(23.98±0.03)个月(χ2=6.337,P=0.012)。结论lncRNA GAS5、miR-205在卵巢癌组织表达存在一定的差异,其中lncRNA GAS5低表达,miR-205高表达,并影响卵巢癌患者的临床病理特征和预后。

LncRNA GAS5靶向调控miR-144-3p对结核分枝杆菌感染的巨噬细胞凋亡和炎性反应的影响

目的:探讨长链非编码RNA生长停滞特异性转录本5(LncRNA GAS5)靶向调控miR-144-3p对结核分枝杆菌(MTB)感染的巨噬细胞凋亡和炎性反应的影响。方法:qRT-PCR检测2019年3月31日至2022年3月31日在河南省商丘市胸科医院确诊的结核病患者75例、同期健康体检者75名血清中LncRNA GAS5、miR-144-3p水平;将巨噬细胞(160 nmol/L佛波酯诱导分化后的贴壁THP-1细胞)分为8组,即MTB组、MTB+pcDNA组、MTB+pcDNA-GAS5组、MTB+inhibitor NC组、MTB+miR-144-3p inhibitor组、MTB+pcDNA-GAS5+mimic NC组、MTB+pcDNA-GAS5+miR-144-3p mimic组,另取正常培养的巨噬细胞作为对照组(NC组)。检测巨噬细胞中LncRNA GAS5、miR-144-3p表达(qRT-PCR法)及细胞上清中炎性细胞因子水平(ELISA法);分别检测巨噬细胞增殖(CCK-8法)、凋亡(流式细胞术)及检测巨噬细胞中Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)蛋白表达(Western blot)水平;验证LncRNA GAS5与miR-144-3p的关系(双荧光素酶报告基因实验)。结果:结核病患者血清中LncRNA GAS5表达量为0.24±0.02,低于健康体检者(1.00±0.00);结核病患者血清中miR-144-3p表达量为2.35±0.12,高于健康体检者(1.00±0.00),差异均有统计学意义(t值分别为329.090、97.428,P值均<0.001)。MTB组LncRNA GAS5表达量为0.22±0.02、细胞凋亡能力为(3.84±0.24)%、Bax蛋白表达量为0.22±0.02,均低于NC组[1.00±0.00、(9.79±0.23)%、1.21±0.12],miR-144-3p表达量(2.46±0.13)、炎性细胞因子水平[γ-干扰素(IFN-γ):(212.26±9.65)pg/ml;白细胞介素-6(IL-6):(123.35±5.12)pg/ml;肿瘤坏死因子α(TNF-α):(325.58±12.28)pg/ml]、细胞增殖能力(1.45±0.14)及Bcl-2蛋白表达量(1.53±0.15),均高于NC组[1.00±0.00、(35.58±1.23)pg/ml、(25.46±1.18)pg/ml、(51.12±2.03)pg/ml、0.86±0.07、0.56±0.05],差异均有统计学意义(q值分别为41.205、73.979、36.403、31.876、61.384、66.990、81.580、13.484、22.943,P值均<0.001)。MTB+pcDNA-GAS5组LncRNA GAS5表达量(0.86±0.07)、细胞凋亡能力[(7.62±0.17)%]及Bax蛋白表达量(0.94±0.08),均高于MTB+pcDNA组[0.23±0.01、(3.82±0.21)%、0.23±0.01];miR-144-3p表达量(1.35±0.10)、炎性细胞因子水平[IFN-γ:(96.63±4.17)pg/ml;IL-6:(41.93±2.19)pg/ml;TNF-α:(118.85±6.03)pg/ml]、细胞增殖能力(0.96±0.08)及Bcl-2蛋白表达量(0.81±0.07),均明显低于MTB+pcDNA组[2.48±0.14、(210.63±9.78)pg/ml、(125.52±4.86)pg/ml、(327.73±10.15)pg/ml、1.44±0.13、1.54±0.14],差异均有统计学意义(q值分别为33.281、47.247、26.107、24.671、57.204、61.448、62.087、10.970、17.266,P值均<0.001)。MTB+miR-144-3p inhibitor组细胞凋亡能力[(7.51±0.19)%]及Bax蛋白表达量(0.89±0.08),均高于MTB+inhibitor NC组[(3.86±0.22)%、0.24±0.02];miR-144-3p表达量(1.21±0.09)、炎性细胞因子水平[IFN-γ:(103.36±5.11)pg/ml;IL-6:(39.95±1.62)pg/ml;TNF-α:(120.26±6.67)pg/ml]、细胞增殖能力(0.92±0.08)及Bcl-2蛋白表达量(0.78±0.07),均低于MTB+inhibitor NC组[2.47±0.12、(214.45±10.03)pg/ml、(126.05±4.77)pg/ml、(326.69±8.33)pg/ml、1.46±0.12、1.54±0.12],差异均有统计学意义(q值分别为45.382、23.901、27.509、58.921、61.029、61.359、12.341、17.976,P值均<0.001)。结论:过表达LncRNA GAS5可能通过靶向下调miR-144-3p抑制MTB感染的巨噬细胞炎性反应,并诱导细胞凋亡。

妊娠期糖尿病患者孕晚期血清CXCL12、GAS6水平与胎儿生长受限的关系

目的探讨妊娠期糖尿病(GDM)患者孕晚期血清C-X-C基序趋化因子配体12(CXCL12)、生长停滞特异性蛋白6(GAS6)水平与胎儿生长受限(FGR)的关系。方法选取143例孕晚期GDM孕妇为GDM组,同期另选取46名健康孕晚期孕妇为对照组。采用酶联免疫吸附法检测血清CXCL12、GAS6;收集GDM患者病历资料;根据是否发生FGR将GDM孕妇分为FGR组42例和非FGR组101例。用多因素Logistic回归分析孕晚期GDM孕妇发生FGR的影响因素;用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清CXCL12、GAS6水平对孕晚期GDM孕妇发生FGR的预测价值。结果与对照组比较,GDM组血清CXCL12水平低,GAS6水平高(P均<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,稳态模型评估-胰岛素抵抗、GAS6升高为孕晚期GDM孕妇发生FGR的独立危险因素,CXCL12升高为独立保护因素(P均<0.05)。ROC曲线分析显示,血清CXCL12、GAS6、CXCL12联合GAS6预测孕晚期GDM孕妇发生FGR的曲线下面积分别为0.783、0.784、0.869,二者联合预测的曲线下面积高于二者单独预测(P均<0.05)。结论GDM孕妇孕晚期血清CXCL12水平降低和GAS6水平升高与FGR密切相关,二者联合预测孕晚期GDM孕妇发生FGR的价值较高。