消瘀康胶囊通过JNK/c-JUN信号通路减轻大鼠脑出血后神经炎症与神经细胞凋亡

目的探讨消瘀康胶囊通过调控JNK/c-JUN信号通路减轻大鼠脑出血(ICH)后神经炎症与神经细胞凋亡。方法成年雄性SD大鼠纹状体注射细菌胶原酶Ⅶ诱导ICH模型,随机分为空白对照组,模型对照组,消瘀康胶囊小、中、大剂量组。所有大鼠分别于3、5 d后进行神经行为学测试、大鼠体质量测量、血肿体积统计、苏木精-伊红(HE)染色、免疫荧光染色、原位末端转移酶标记(TUNEL)染色、酶联免疫吸附测定(ELISA)和蛋白免疫印迹分析(Western blotting)。结果与空白对照组比较,模型对照组大鼠出现严重神经行为缺陷、体质量降低(P<0.05);脑组织神经元排列紊乱;小胶质细胞/巨噬细胞活化、中性粒细胞浸润、神经元细胞凋亡(P<0.05);血肿周围促炎因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β水平及p-JNK、p-c-JUN、Bax、Caspase-3、Cleaved Caspase-3蛋白表达均显著升高(P<0.05),抗炎因子IL-10及抗凋亡蛋白Bcl-2降低(P<0.05)。与模型对照组比较,消瘀康胶囊大剂量组显著改善大鼠神经行为功能,促进体质量恢复和血肿吸收(P<0.05);减轻脑组织病理损伤;抑制小胶质细胞/巨噬细胞活化、中性粒细胞浸润、神经元细胞凋亡(P<0.05);另外,血肿周围促炎因子TNF-α、IL-1β水平及p-JNK、p-c-JUN、Bax、Caspase-3、Cleaved Caspase-3蛋白表达均显著降低(P<0.05),抗炎因子IL-10及抗凋亡蛋白Bcl-2均升高(P<0.05)。结论消瘀康胶囊改善ICH大鼠神经行为缺陷,促进体质量恢复和血肿吸收,减轻脑组织病理学损伤,抑制小胶质细胞/巨噬细胞活化、中性粒细胞浸润,其作用机制可能是通过抑制JNK/c-JUN介导的神经炎症与神经细胞凋亡实现。

基于miR-153/TREM1探讨健神利水方对脑出血大鼠神经细胞凋亡的作用机制

目的探究健神利水方对脑出血大鼠神经细胞凋亡的作用机制。方法通过miRNA微阵列芯片和RT-PCR分析出脑出血中miR-153的表达,观察并分析miR-153与脑出血神经细胞凋亡关系;预测miR-153的靶基因,采用双荧光素酶报告基因实验观察其与靶基因的结合情况,观察过表达和抑制miR-153对靶基因的影响,随后,明确靶基因与脑出血神经细胞凋亡关系,最后观察健神利水方对miR-153、靶基因的影响,最终探究健神利水方对脑出血大鼠神经细胞凋亡的相关机制。结果微阵列芯片和RT-PCR检测表明miR-153在脑出血中是低表达的(P<0.05),miR-153与神经细胞凋亡呈负相关(R:-0.875,P=0.0002)。在线数据库TargetScan和miRDB显示miR-153与TREM1具有结合区域,双荧光素酶报告基因实验证明两者具有结合关系,当miR-153过表达时,TREM1表达量会下调,相反,当miR-153抑制时,TREM1表达量会上调,TREM1与神经细胞凋亡呈正相关(R:0.857,P<0.001)。健神利水方组的TREM1表达量、神经细胞凋亡数量、神经功能缺损评分均低于模型组(P<0.05),miR-153表达量高于模型组(P<0.05)。健神利水方+miR-153抑制组的TREM1表达量、神经细胞凋亡数量、神经功能缺损评分均高于健神利水方组(P<0.05)。结论健神利水方通过促进miR-153表达,抑制TREM1表达来达到抑制脑出血大鼠神经细胞凋亡,保护神经功能。

瑞马唑仑调节HIF-1α/BNIP3信号通路对OGD/R诱导神经细胞自噬和凋亡的影响

目的探讨瑞马唑仑对OGD/R诱导的神经细胞自噬和凋亡的影响及作用机制。方法体外培养小鼠海马神经元细胞(HT22)并进行神经细胞氧糖剥夺/再复氧(OGD/R),筛选实验用瑞马唑仑浓度;将HT22细胞分为对照组、OGD/R组、瑞马唑仑组、2-ME2组、瑞马唑仑+2-ME2组;CCK8法检测5组HT22细胞活力;流式细胞术检测5组HT22细胞凋亡率;透射电子显微镜观察5组HT22细胞自噬小体的形成;Western blot检测5组HT22细胞HIF-1α、BNIP3、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的表达。结果确定实验用瑞马唑仑浓度为50μg/mL;与对照组比较,OGD/R组HT22细胞OD450值、HIF-1α、BNIP3、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白水平下调,凋亡率上调(P<0.05);与OGD/R组比较,瑞马唑仑组HT22细胞自噬小体增加,OD450值、HIF-1α、BNIP3、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白水平上调,凋亡率下调(P<0.05);2-ME2组HT22细胞OD450值、HIF-1α、BNIP3、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白水平下调,凋亡率上调(P<0.05)。与瑞马唑仑组比较,瑞马唑仑+2-ME2组HT22细胞自噬小体数量减少,OD450值、HIF-1α、BNIP3、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白水平下调,凋亡率上调(P<0.05);与2-ME2组比较,瑞马唑仑+2-ME2组HT22细胞OD450值、HIF-1α、BNIP3、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白水平上调,凋亡率下调(P<0.05)。结论瑞马唑仑可通过激活HIF-1α/BNIP3信号通路促进OGD/R诱导的神经细胞自噬,抑制细胞凋亡,从而减轻OGD/R诱导的神经细胞损伤。

基于PI3K/Akt/mTOR 通路探究七氟醚麻醉对大鼠神经细胞凋亡的影响

目的探讨七氟醚麻醉对大鼠认知功能及神经细胞凋亡的影响。方法取96只大鼠,随机分为对照组(吸入2 L·min^(−1)氧气)、七氟醚低浓度组(吸入体积分数为1%的七氟醚+2 L·min^(−1)氧气)、七氟醚中浓度组(吸入体积分数为2%的七氟醚+2 L·min^(−1)氧气)、七氟醚高浓度组(吸入体积分数为4%的七氟醚+2 L·min^(−1)氧气),持续吸入6 h。用Morris水迷宫实验观察各组大鼠认知能力,用HE染色观察海马组织学形态,用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定海马组织中枢神经特异性蛋白(soluble protein 100β,S-100β)、神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平,流式细胞术测定神经细胞凋亡情况,蛋白印迹法(Western blotting)测定海马组织B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl2-associated X protein,Bax)、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(phosphorylated phosphatidylinositol 3-kinase,p-PI3K)、磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶(phosphorylated serine/threonine kinase,p-Akt)和磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(phosphorylated mammalian target of rapamycin,p-mTOR)的水平。结果HE染色结果表明,对照组海马组织神经细胞结构正常,排列紧密,七氟醚各浓度组大鼠海马组织神经细胞减少,排列紊乱,分布不均匀。与对照组比较,七氟醚各浓度组大鼠逃避潜伏期时间,S100-β、NSE、IL-1β、TNF-α水平,Bax蛋白水平和神经细胞凋亡率均升高,穿越平台次数,平台停留时间,Bcl-2、p-PI3K、p-Akt和p-mTOR蛋白水平均降低(P<0.05);七氟醚各浓度组诸项指数水平变化规律相同,并呈剂量依赖性(P<0.05)。结论七氟醚麻醉可诱导大鼠神经细胞凋亡,使大鼠认知能力衰退,其可能与调控PI3K/Akt/mTOR信号通路有关。

生姜提取物对染铝毒大鼠学习记忆功能和神经细胞结构的影响及其可能作用机制

目的分析生姜提取物(GRE)对铝染毒大鼠学习记忆功能及神经细胞结构的影响,并基于钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)、神经元型一氧化氮合酶(nNOS)、蛋白激酶C(PKC)探讨其可能的作用机制。方法将36只SD雄性大鼠随机分为空白对照组、铝染毒组、临床药物组、低剂量GRE(L⁃GRE)组、中剂量GRE(M⁃GRE)组、高剂量GRE(H⁃GRE)组,每组6只大鼠。空白对照组大鼠自由饮用不含氯化铝的饮用水,其余组大鼠饮用含10 mg/mL结晶氯化铝的饮用水。3个月后给予空白对照组和铝染毒组大鼠灌胃生理盐水,临床药物组大鼠灌胃盐酸多奈哌齐溶液,分别给予L⁃GRE组、M⁃GRE组、H⁃GRE组大鼠灌胃100 mg/kg、200 mg/kg、400 mg/kg GRE溶液。持续干预4周后,采用Morris水迷宫实验评估大鼠的学习记忆功能,通过HE染色观察大鼠海马组织形态变化,分别采用实时荧光定量PCR和Western blot检测大鼠海马组织CaMKⅡ、nNOS、PKC mRNA和蛋白表达水平。结果(1)与空白对照组相比,铝染毒组大鼠的逃避潜伏期延长且穿越平台次数减少(P<0.05),海马组织的神经细胞皱缩,神经细胞数量明显减少,CaMKⅡ、nNOS、PKC的mRNA表达水平及nNOS、PKC的蛋白表达水平降低(P<0.05)。(2)与铝染毒组比,L⁃GRE组、M⁃GRE组和H⁃GRE组大鼠的逃避潜伏期缩短,临床药物组、M⁃GRE组、H⁃GRE组大鼠的穿越平台次数增加(P<0.05);各给药组大鼠海马组织病理形态有不同程度的改善;临床药物组大鼠的CaMKⅡ、nNOS和PKC mRNA表达水平升高,各剂量GRE组大鼠nNOS和PKC mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05)。(3)与临床药物组相比,M⁃GRE组和H⁃GRE组大鼠的逃避潜伏期,以及各剂量GRE组的穿越平台次数和目标象限停留时间差异无统计学意义(P>0.05);各剂量GRE组大鼠海马组织病理形态改善程度更为明显;M⁃GRE组、H⁃GRE组大鼠的nNOS、PKC蛋白表达水平升高,L⁃GRE组大鼠的nNOS蛋白表达水平升高(P<0.05)。(4)各剂量GRE组组间大鼠逃避潜伏期、穿越平台次数及目标象限停留时间差异无统计意义(P>0.05);随GRE干预剂量增加,大鼠海马组织病理形态的改善效果越明显;H⁃GRE组大鼠的CaMKⅡmRNA表达水平高于L⁃GRE组(P<0.05)。结论GRE能够改善铝染毒大鼠的神经细胞结构和学习记忆功能,其中对神经细胞结构的改善效果优于盐酸多奈哌齐,对学习功能的改善效果与盐酸多奈哌齐相当。GRE的作用机制可能与拮抗铝所致CaMKⅡ、nNOS和PKC表达水平下降有关。

Notch1介导有氧运动促进阿尔茨海默病小鼠海马神经细胞的增殖

背景:阿尔茨海默病患者脑部多存在Notch1信号通路异常,但这些信号通路在阿尔茨海默病发病中的作用尚未完全明确。长期有氧运动对于Notch1信号通路的相关因子甲基化率能够产生影响,从而改变Notch1的表达。然而,有氧运动是否会通过Notch1信号通路对阿尔茨海默病小鼠海马神经细胞增殖及组织病理学特征产生影响并不清楚。目的:观察DAPT抑制Notch1信号通路后有氧运动对阿尔茨海默病小鼠海马神经细胞增殖及组织病理学特征的影响。方法:随机将3月龄APP/PS1双转基因阿尔茨海默病小鼠分成4组,分别为对照组、运动对照组、抑制剂组及运动抑制剂组,每组20只。采用自然喂养干预对照组,长期有氧运动干预运动组,各干预方式的周期为20周;然后在第18周对各组小鼠进行溶剂或Notch1抑制剂注射。20周后取脑组织,采用Real-time PCR、免疫荧光及Western blot技术分别检测Aβ1-42、Tau、Ki67及Notch1表达。结果与结论:与对照组小鼠相比,抑制剂组小鼠海马齿状回区Ki67、Notch1的表达显著降低(P<0.05),Aβ1-42、Tau没有显著差异;运动对照组小鼠海马齿状回区Ki67表达显著高于对照组,而Aβ1-42、Tau、Notch1表达显著低于对照组(P<0.05);运动抑制剂组小鼠海马齿状回区Aβ1-42、Tau、Ki67、Notch1表达与抑制剂组相比没有显著差异。由此可见,Notch1信号通路可能介导运动改善阿尔茨海默病小鼠海马神经细胞增殖及组织病理学特征的过程。

罗氏沼虾神经细胞的原代培养及其在病毒研究中的应用

细胞平台是研究病原–宿主互作的重要工具,虾类细胞系的缺少严重制约了虾类病毒学研究。传染性早熟病毒(IPV)是近年来发现的能够导致罗氏沼虾(Macrobrachiumrosenbergii)性早熟和生长缓慢的一种新病毒,主要侵染罗氏沼虾神经组织。为建立罗氏沼虾病毒–宿主互作的体外研究平台,本研究采用木瓜蛋白酶消化健康罗氏沼虾的脑、眼柄、胸神经节和腹神经节,获取罗氏沼虾神经细胞,并利用L-15培养基进行离体培养。选择培养效果最佳的脑神经细胞进行IPV体外感染。结果显示,培养的原代细胞在含有谷氨酰胺的L-15培养基中生长良好,其中,从脑组织和眼柄X器官–窦腺复合体中分离出的细胞在体外存活时间可达15d,从胸腹神经节中分离出来的细胞在体外存活时间达9 d。在本研究所采用的感染方式和剂量条件下,脑细胞在感染96 h后检测到高载量的IPV。本研究建立了一种操作简便的罗氏沼虾神经细胞原代培养技术,为罗氏沼虾神经内分泌研究和病毒–宿主互作提供了基础数据和平台。

电针对脑卒中肢体痉挛大鼠皮质神经细胞铁死亡的影响

目的观察电针对脑卒中肢体痉挛(PSS)大鼠皮质神经细胞超微结构、亚铁离子(Fe^(2+))、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)表达的影响,探讨电针治疗脑卒中肢体痉挛中铁死亡的机制。方法采用改良ZeaLonga线栓+内囊注射NMDA法制作脑PSS大鼠模型。将30只健康成年雄性SD大鼠随机分为假手术组,模型组及电针组。电针组取穴患侧“阳陵泉、曲池”,1次/日,30min/次,连续7d。记录Zea-longa神经功能评分、改良Ashworth肌张力评分,透射电镜观察线粒体变化,普鲁士蓝染色观察皮质铁离子聚集情况,生化试剂盒检测大鼠皮质Fe^(2+)、MDA含量,ELISA检测大鼠皮质GSH含量。结果Zea-longa神经功能评分:与模型组相比,电针组评分降低(P<0.05);改良Ashworth肌张力评分:与模型组相比,电针组评分降低(P<0.05);透射电镜:与模型组相比,电针组皮质神经细胞损伤减轻,线粒体萎缩程度降低,线粒体嵴更为明显。普鲁士蓝染色:与模型组相比,电针组皮质铁聚集明显减少。实验室检测结果:与模型组相比,电针组Fe^(2+)、MDA含量降低(P<0.01),GSH含量升高(P<0.01)。结论电针可改善脑卒中肢体痉挛,其作用机制可能与电针抑制皮质神经细胞铁死亡,发挥脑保护作用,促进神经功能恢复有关。

精神分裂症患者神经细胞黏附分子、视锥蛋白样蛋白-1表达与认知功能障碍的相关性分析

目的:分析精神分裂症患者神经细胞黏附分子(nerve cell adhesion molecule,NCAM)、视锥蛋白样蛋白-1(cone-like protein-1,VILIP-1)表达与认知功能障碍的相关性分析。方法:选取进行治疗的精神分裂症患者65例为疾病组,进行健康体检的人员60名为健康组。检测白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、NCAM、VILIP-1;采用阳性与阴性症状量表(positive and negative syndrome scale,PANSS)对患者精神分裂症严重情况进行评定;蒙特利尔认知评估量表(Montreal cognitive assessment,MoCA)对患者自身认知功能情况进行评估。结果:与健康组相比,疾病组NCAM表达水平降低,VILIP-1升高(P均<0.05);NCAM与PANSS评分之间呈负相关性,NCAM与MoCA评分之间呈正相关性(P均<0.05);VILIP-1与PANSS评分之间呈正相关性,VILIP-1与MoCA评分之间呈负相关性(P均<0.05);受试者工作曲线(receiver operation characteristic,ROC)分析显示,与NCAM、VILIP-1单项诊断相比,联合检测对精神分裂症的诊断价值较高(P均<0.05)。结论:精神分裂症患者机体内NCAM和VILIP-1表达水平的异常升高或降低是精神分裂症的风险预测因子,可能与病情的诊断、发展及认知功能等具有紧密关联。

lncRNA DANCR靶向调控miR-193a-3p表达对缺氧诱导的神经细胞氧化损伤的影响

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)DANCR对缺氧诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞PC12氧化损伤的影响及其可能作用机制。方法:选取榆林市星元医院于2019年10月—2021年10月就诊的缺血性脑卒中病人40例为疾病组,以同期30名健康体检者为正常组,检测lncRNA DANCR、miR-193a-3p表达量,Pearson法分析血清lncRNA DANCR与miR-193a-3p的相关性;建立缺氧诱导的PC12细胞损伤模型,si-NC、si-DANCR、miR-NC、miR-193a-3p mimics分别转染至PC12细胞后缺氧处理24 h, si-DANCR+anti-miR-NC、si-DANCR+anti-miR-193a-3p分别共转染至PC12细胞后缺氧处理24 h;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测lncRNA DANCR、miR-193a-3p表达量;试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性;用凋亡试剂盒检测凋亡率;双荧光素酶报告实验检测lncRNA DANCR、miR-193a-3p靶向关系;蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测cleaved-Caspase-3、cleaved-Caspase-9蛋白表达量。结果:血清中lncRNA DANCR与miR-193a-3p表达呈负相关。缺氧处理后,PC12细胞中lncRNA DANCR表达量升高(P<0.05),miR-193a-3p表达量降低(P<0.05);分别与转染si-NC或miR-NC比较,转染si-DANCR或miR-193a-3p mimics后,缺氧诱导的PC12细胞LDH漏出率、MDA含量、凋亡率、cleaved-Caspase-3、cleaved-Caspase-9蛋白水平降低(P<0.05),SOD活性升高(P<0.05);与共转染si-DANCR+anti-miR-NC比较,共转染si-DANCR+anti-miR-193a-3p后,缺氧诱导的PC12细胞LDH漏出率、MDA含量、凋亡率、cleaved-Caspase-3、cleaved-Caspase-9蛋白水平升高(P<0.05),SOD活性降低(P<0.05)。结论:干扰lncRNA DANCR可通过促进miR-193a-3p表达而抑制氧化应激、细胞凋亡,从而减轻缺氧诱导的PC12细胞损伤,血清中lncRNA DANCR、miR-193a-3p水平对缺血性脑卒中病人具有预测价值,且联合诊断价值更高。

加味逍遥散通过肝癌外泌体影响神经细胞突起的研究

目的 探讨加味逍遥散是否通过外泌体对神经细胞突起的发育发挥调节影响作用。方法 采用体外神经细胞、星形胶质细胞非接触式共培养系统模拟体内中枢系统神经细胞和星形胶质细胞相互交错,相互影响的联系,后加入肝癌细胞来源外泌体、经加味逍遥散含药血清干预后的肝癌细胞来源外泌体,通过比较二者对神经细胞-星形胶质细胞共培养系统中神经细胞树突的长度、分支,兴奋性突触及相关突触蛋白的数量等的影响。结果 经肝癌细胞来源外泌体干预的神经细胞树突的长度、分支,兴奋性突触及相关突触蛋白的数量均较空白组减少,而经过加味逍遥散含药血清干预后的肝癌细胞外泌体可显著增加共培养系统中神经细胞的树突长度、分支,兴奋性突触及相关突触蛋白的数量。结论 加味逍遥散对肝癌来源外泌体造成的神经细胞突起的异常损伤具有修复和保护作用,即加味逍遥散可能通过外泌体途径干预和修复受损的神经细胞。

脑室外神经细胞瘤的临床影像及病理学特征分析

目的分析脑室外神经细胞瘤(extraventricular neurocytoma,EVN)的临床影像与病理特征。方法回顾性分析7例经术后病理证实为EVN病例的临床表现、影像学及组织病理学特征。结果7例患者的临床表现以颅高压症状及神经功能障碍为主,MRI呈长T1、等长T2,FLAIR呈高信号,DWI多为等高信号,呈轻中度不均匀强化,伴囊变、钙化等。免疫组化示所有病例突触素均阳性,3例胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)阳性,4例少突胶质细胞转录因子2(oligodendrocyte transcription factor 2,Olig 2)阳性,2例神经元核特异蛋白(neuro-specific nuclei protein,Neu-N)阳性,4例Ki-67为1%~3%,3例Ki-67≥10%,最高达20%,5例异柠檬酸脱氢酶-1(isocitrate dehydrogenase enzyme isoform 1,IDH-1)阴性。4例病理诊断为EVN(WHOⅡ级),3例为非典型EVN(WHOⅡ~Ⅲ级)。肿瘤全切除6例,部分切除1例,无手术死亡病例,5例行术后辅助放疗。术后随访12~48个月,仅1例患者术后2年因肿瘤复发,再次行活检及放化疗外,余患者预后良好。结论EVN临床表现及影像学有一定特征,但易误诊,确诊需病理检查。手术全切除肿瘤是理想治疗方式,术后辅助放疗对部分患者是必要治疗措施。

化痰祛瘀汤联合康复治疗对缺血性中风偏瘫患者血清神经细胞因子、氧化应激及血液流变学的影响

目的观察分析缺血性中风后偏瘫患者接受化痰祛瘀汤联合常规康复治疗对其血清神经细胞因子、氧化应激、血液流变学的影响。方法收集2020年10月—2022年10月于我院进行治疗的缺血性中风后偏瘫患者90例,随机分为治疗组(45例,化痰祛瘀汤+常规康复治疗)、对照组(45例,常规康复治疗)。评估康复疗效,对比治疗前、治疗后组间肢体功能、血液流变学、血清氧化应激指标及神经细胞因子水平。结果治疗组康复总有效率显著高于对照组(P<0.05);治疗后治疗组Fugl-Meyer运动功能评定量表(Fugl-Meyer Assessment,FMA)上肢、下肢评分均显著高于对照组(P<0.05);治疗后治疗组全血高切、低切黏度均显著低于对照组(P<0.05);治疗后治疗组血清丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平低于对照组,超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)高于对照组(P<0.05);治疗后治疗组血清基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase.9,MMP-9)显著低于对照组,血管生成素1(angiopoietin-1,Ang-1)水平显著高于对照组(P<0.05);治疗后治疗组脑源性神经营养因子(brainderived neuro-trophic factor,BDNF)及神经生长因子(nerve growth factor,NGF)水平显著高于对照组(P<0.05)。结论缺血性中风后偏瘫患者接受化痰祛瘀汤联合常规康复治疗疗效显著,可有效恢复患者肢体功能,其生效机制可能与改善患者血液流变学,减轻氧化应激反应,调节MMP-9、Ang-1水平及提高神经细胞因子水平有关。

Circ_0038467通过靶向miR-940调控缺氧缺糖诱导神经细胞损伤的机制

目的探讨circ_0038467对缺氧缺糖(hypoxia-glucose deprivation,OGD)诱导的神经细胞损伤的影响及其可能作用机制。方法分离培养原代大鼠皮质神经细胞,采用OGD诱导大鼠皮质神经细胞建立细胞损伤模型;si-NC、si-circ_0038467、miR-NC、miR-940 mimics分别转染至大鼠皮质神经细胞后OGD处理6 h,si-circ_0038467和anti-miR-NC或anti-miR-940分别共转染至大鼠皮质神经细胞后OGD处理6 h;qRT-PCR法检测circ_0038467、miR-940的表达量;CCK-8法、流式细胞术分别检测细胞增殖及凋亡;LDH法检测细胞损伤情况;双荧光素酶报告实验用于靶向关系检测;Western blot检测cleaved caspase-3、cleaved caspase-9蛋白表达。结果OGD诱导的神经细胞中circ_0038467上调且miR-940下调(P<0.01);转染si-circ_0038467或miR-940 mimics后,细胞存活率升高(P<0.01),而LDH释放率、凋亡率和cleaved caspase-3、cleaved caspase-9水平下降(P<0.01);circ_0038467可靶向结合miR-940;相对于OGD+si-circ_0038467+anti-miR-NC组,细胞存活率在OGD+si-circ_0038467+anti-miR-940中降低(P<0.01),而LDH释放率、凋亡率和cleaved caspase-3、cleaved caspase-9水平增加(P<0.01)。结论干扰circ_0038467可上调miR-940表达保护神经细胞免受OGD诱导的氧化应激以及凋亡。

PI3K/Akt相关信号通路在神经细胞病理生理机制中的研究进展

磷脂酰激醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB/Akt)信号通路在细胞生长、增殖、分化和凋亡等多种生物学功能中发挥着重要作用。PI3K/Akt相关信号通路研究众多,并且调控神经细胞发挥着不同或者相同的功能。本文综述了PI3K/Akt相关信号通路在神经细胞凋亡、自噬、氧化应激、神经炎症和其它病理生理机制中的作用研究进展。

Na^(+)通道在锰神经细胞毒性中的作用

目的初步探讨Na^(+)通道在锰神经细胞毒性中对γ-氨基丁酸(GABA)的作用。方法SH-SY5Y细胞建立锰暴露模型,并分为空白对照组、0.25 mmol/L MnCl_(2)、0.50 mmol/L MnCl_(2)、1.00 mmol/L MnCl_(2)。河豚毒素(tetrodotoxin,TTX)0.10μmol/L、0.20μmol/L进行干预,MTT法测其细胞存活率、光学显微镜进行形态学观察、蛋白质印迹法检测Na^(+)通道中Nav1.1通道蛋白和GABA的标记酶谷氨酸脱羧酶65(GAD65)蛋白的表达水平。结果MnCl_(2)可抑制细胞增殖,0.25 mmol/L MnCl_(2)、0.50 mmol/L MnCl_(2)、1.00 mmol/L MnCl_(2)均可显著降低细胞存活率,差异均具有统计学意义(P<0.05);TTX可改善锰暴露所致的神经元损伤,提高细胞存活率,差异具有统计学意义(P<0.05);锰暴露可上调神经元GAD65蛋白表达水平,差异具有统计学意义(P<0.05),但锰暴露未改变神经元细胞Nav1.1蛋白的表达水平,差异无统计学意义(P>0.05)。结论锰暴露所致神经元损伤及GABA能损伤可能与其Nav1.1蛋白表达无关。

左乙拉西坦联合鼠神经生长因子治疗脑卒中后癫痫对患者神经细胞因子和认知功能的影响

目的探讨脑卒中后癫痫患者应用左乙拉西坦联合鼠神经生长因子治疗对其神经细胞因子和认知功能的影响。方法将2021年2月至2023年5月河南省南阳市第一人民医院收治的脑卒中后癫痫90例,依据治疗方法不同分为对照组(30例)、干预组(30例)、试验组(30例)。对照组实施左乙拉西坦治疗,干预组实施鼠神经生长因子治疗,试验组实施左乙拉西坦联合鼠神经生长因子治疗,治疗时间为1个月。对比3组患者临床疗效,治疗前后左大脑中动脉血流、右大脑中动脉血流、基底动脉血流、神经细胞因子[胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、脑源性神经营养因子(BDNF)、S-100β蛋白(S-100β)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)]水平,治疗前及治疗2、4周后炎症因子[微小核糖核酸-222(miR-222)、白细胞介素-6(IL-6)]水平、认知功能[蒙特利尔认知评估量表(MoCA)、简易智力状态检查量表(MMSE)]评分。结果经过临床治疗试验组总有效率高于对照组、干预组(χ^(2)=7.081,P<0.05),3组治疗后左大脑中动脉血流、右大脑中动脉血流、基底动脉血流相较于治疗前升高,试验组相较于对照组、干预组更高(F=42.600、23.662、21.116,P<0.05),3组治疗后GFAP、S-100β、NSE相较于治疗前降低,试验组比对照组更低;BDNF相较于治疗前升高,试验组相较于对照组、干预组更高(F=29.842、97.544、13.495、78.796,P<0.05),3组治疗2、4周后miR-222、IL-6水平相较于治疗前降低,试验组相较于对照组、干预组更高(F=12.572、15.907,12.286、26.380,P<0.05),3组治疗2、4周后MoCA、MMSE评分相较于治疗前升高,试验组相较于对照组、干预组更高(F=12.572、15.907,12.286、26.380,P<0.05)。结论左乙拉西坦联合鼠神经生长因子治疗应用于脑卒中后癫痫患者中,可提高疗效,促进脑部血液代谢,改善神经功能,减轻机体的炎症程度,缓解认知损伤。

银杏叶片联合氯吡格雷对脑梗死恢复期血液流变学和血清神经细胞因子的影响

目的观察银杏叶片与氯吡格雷联合治疗对脑梗死恢复期患者血液流变学和血清神经细胞因子的影响。方法采用随机数字表法,将江西省中西医结合医院2020年3月至2022年12月期间收治的112例脑梗死恢复期患者分为对照组(n=56,氯吡格雷治疗)和治疗组(n=56,银杏叶片联合氯吡格雷治疗)。对比两组Barthel指数、疗效、美国国立卫生院卒中量表(NIHSS)评分、血液流变学指标、血清神经细胞因子和不良反应。结果治疗组的临床总有效率高于对照组(P<0.05)。与对照组相比,治疗组治疗8周后Barthel指数、脑源性神经营养因子(BDNF)更高,NIHSS评分、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和血液流变学指标(全血高切/低切黏度、血细胞比容、血浆黏度)更低(P<0.05)。两组不良反应发生率对比没有显著差异(P>0.05)。结论银杏叶片联合氯吡格雷可以改善脑梗死恢复期患者的神经功能,有效调节血液流变学和血清神经细胞因子水平,提高患者生活自理能力,具有较好的应用价值。

氧化低密度脂蛋白通过PCSK9/LRP1信号途径促神经细胞凋亡的双向调节

目的阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是多种危险因素引起的中枢神经系统退行性疾病,其中神经细胞凋亡是其主要病理基础之一。高脂血症是AD发生的高危因素,可导致脑组织内氧化低密度脂蛋白(oxidized lowdensity lipoprotein,ox-LDL)水平增高。前蛋白转化酶枯草溶菌素9(proprotein convertase subtilisin kexin type 9,PCSK9)是一个与血脂代谢密切相关的蛋白酶,但有研究显示其与AD发生可能相关。本研究旨在探索PCSK9在介导ox-LDL促神经细胞凋亡中的作用及其机制,进一步阐述高脂血症导致AD等神经退行性疾病的发生机制。方法首先用不同浓度ox-LDL(0、25、50、75、100 mg/L)处理PC12细胞24 h,油红O染色检测PC12细胞脂质蓄积,Hoechst33258染色和流式细胞术检测PC12细胞凋亡,ELISA检测PC12分泌的β淀粉样肽(amyloidβ-peptide,Aβ)含量,蛋白质印迹(Western blot)法检测SREBP2、PCSK9和LRP1的表达。然后用75 mg/L ox-LDL处理PC12细胞不同时间(0、6、12、24、48 h),Western blot检测SREBP2、PCSK9和LRP1的表达情况。最后,100 nmol/L PCSK9 siRNA转染PC12细胞48 h后,用75 mg/L ox-LDL处理PC12细胞24 h,Hoechst33258染色和流式细胞术检测PC12细胞的凋亡率,Western blot检测PCSK9、LRP1、PI3K、AKT、P-PI3K、P-AKT、NF-κB、Bcl-2、Bax、Caspase-9和Caspase-3的表达,ELISA检测PC12细胞的Aβ分泌量。结果ox-LDL可以增加PC12细胞脂质蓄积,促进PC12细胞凋亡和Aβ分泌,同时增加PC12细胞中SREBP2和PCSK9的表达,减少LRP1的表达。敲低PCSK9的表达可以通过PI3K/AKT通路和NF-κB-Bcl-2/Bax-Caspase-9/3通路减弱ox-LDL诱导的PC12细胞凋亡,同时增加PC12细胞中Aβ的分泌。结论ox-LDL通过诱导PC12细胞中PCSK9表达增加,降低LRP1的表达,进而影响下游的不同信号途径,从而在ox-LDL诱导PC12细胞凋亡中发挥双向调节作用。

枸杞多糖对糖尿病大鼠视网膜神经细胞氧化损伤的保护作用

研究枸杞多糖在糖尿病大鼠视网膜神经细胞氧化损伤中的保护作用。方法 将24只大鼠作为研究样本,随机分设3组,每组各8只,其中8只健康大鼠作为对照组,剩余16只制备成糖尿病大鼠模型,并对这16只大鼠采取不同措施,即8只给药,另8只不给药,设置为DM组与LBP组,给药持续24周,在给药期间,分别于用药前与实验结束时测定3组大鼠的体重与血糖指标,并于实验结束时,麻醉大鼠取其眼球,提取出视网膜,测定不同组别大鼠的SDO、MDA等指标,并对视网膜组织中的VEGF表达进行测定。结果 实验过程中,对照组大鼠体重持续增长,血糖水平正常,波动较小,DM组与LBP组大鼠体重下降,血糖升高,与对照组差异明显(P<0.05);将对照组作为参照,DM组与LBP组的SOD表达更低,MDA表达更高,在DM组与LBP组的对比中,DM组SOD表达更低,MDA表达更高,组间差异具有显著性(P<0.05),且GHS-PX、CAT表达也存在组间差异(P<0.05);将对照组作为参照,DM组与LBP组的VEGF及其受体表达更高,在DM组与LBP组的对比中,DM组各项数据高于LBP组,组间差异具有显著性(P<0.05)。结论 枸杞多糖在糖尿病大鼠中的应用,确能对其视网膜神经细胞的氧化损伤起到抑制作用,进而保护其视网膜神经细胞,且其具有调节新生血管生成的作用,临床中应予以重视。