龟鹿二仙汤联合激素治疗肾虚血瘀型卵巢早衰临床研究

目的探究龟鹿二仙汤联合西药常规激素治疗对肾虚血瘀型卵巢早衰(premature ovarian failure,POF)患者中医证候积分及性激素水平的影响。方法选取2020年1月—2022年12月本院收治的肾虚血瘀型POF患者61例作为研究对象,根据随机数字表法分为治疗组和对照组。32例治疗组患者予以龟鹿二仙汤加减联合西药常规激素治疗,29例对照组患者予以西药常规激素治疗。比较2组患者治疗前后中医证候积分及血清卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、雌二醇(estradiol,E_(2))水平。结果治疗后,治疗组各项中医证候积分明显低于对照组(P<0.05)。治疗组FSH、LH水平明显低于对照组(P<0.05),治疗组E_(2)水平明显高于对照组(P<0.05)。结论龟鹿二仙汤联合西药常规激素治疗能够缓解肾虚血瘀型POF患者临床症状,有效调节患者性激素水平。

加味龟鹿二仙汤时辰用药调节乳腺癌化疗后骨髓造血功能的临床研究

目的:探讨加味龟鹿二仙汤及时辰用药方案在防治乳腺癌化疗后骨髓抑制方面的作用。方法:共纳入乳腺癌术后患者120例,随机分为3组,其中西药对照组36例(化疗后予利血生、鲨肝醇、V itB4服用);中药(加味龟鹿二仙汤)不拘时口服组43例;中药时辰用药组(加味龟鹿二仙汤组酉时服用)41例。结果:经统计学分析,中药不拘时口服组与时辰用药组在减轻乳腺癌化疗后血液学毒性方面(白细胞、血红蛋白、血小板减少方面)均优于西药对照组(P=0.000),而在白细胞数减少方面,中药时辰用药组尚优于中药不拘时服用组(P=0.035)。此外,中药组相比于西药对照组,可以明显减少集落细胞刺激因子粒生素的使用量(P<0.01)。结论:补肾中药加味龟鹿二仙汤能明显改善乳腺癌患者化疗后骨髓造血功能,尤以按时辰用药(酉时服用)效果为著。

龟鹿二仙胶汤含药血清对兔体外BMSCs向软骨细胞分化的干预作用

目的:探讨龟鹿二仙胶汤含药血清对骨髓间充质干细胞(BMSCs)向软骨细胞分化的干预作用。方法:抽取兔骨髓液,经体外分离、纯化、培养获得兔BMSCs,将第2代兔BMSCs分为龟鹿二仙胶汤中药含药血清组、软骨细胞组、单纯诱导剂组及空白对照组,进行培养1、2、3周后,通过细胞染色、透射电子显微镜、免疫组化等实验技术,观察各组对BMSCs诱导成软骨细胞的影响。结果:在转化生长因子-β(3TGF-β3)等诱导下龟鹿二仙胶汤中药血清可以明显促进软骨表型化BMSCs的GAG分泌及Ⅱ型胶原mRNA的表达,与软骨细胞组和单纯诱导剂组有显著性差异(P<0.01)。结论:龟鹿二仙胶汤含药血清可促进BMSCs向软骨细胞转化,优化骨组织工程的种子细胞体系,改善软骨组织的质量,延缓软骨的退化过程。

龟鹿二仙汤加减联合针刺治疗帕金森病睡眠障碍疗效观察

目的观察龟鹿二仙汤加减联合针刺治疗帕金森病睡眠障碍(PDSD)的临床疗效。方法将82例PDSD患者按照随机数字表法分为2组。2组均行抗帕金森病(PD)药物治疗,对照组41例予阿普唑仑治疗;观察组41例在西医开放性治疗基础上加龟鹿二仙汤加减联合针刺治疗。2组均治疗4周后统计临床疗效,并观察2组治疗前后睡眠进程[睡眠潜伏期(SL)、总睡眠时间(TST)、觉醒次数(AT)]、睡眠结构[非快动眼相(nREM)-S 1期、nREM-S2期、nREM-S3+S4期、快动眼相(REM)睡眠占总睡眠时间的百分比]、帕金森病睡眠量表(PDSS)评分、汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评分、统一PD评定量表(UPDRS)第Ⅲ部分(UPDRS-Ⅲ)评分、中医症状分级量化积分、血清5-羟色胺(5-HT)及P物质(SP)变化情况。结果观察组总有效率95.12%,对照组总有效率78.05%,观察组临床疗效优于对照组(P<0.05)。治疗后2组睡眠进程指标中SL均缩短(P<0.05),TST均延长(P<0.05),AT均减少(P<0.05),且观察组改善优于对照组(P<0.05);观察组睡眠结构指标中nREM-S1期缩短(P<0.05),S2、S3+S4期均延长(P<0.05),REM睡眠占总睡眠时间的百分比增加(P<0.05),且观察组改善优于对照组(P<0.05)。治疗后2组PDSS评分均升高(P<0.05),HAMD评分、UPDRS-Ⅲ评分及中医症状分级量化积分均降低(P<0.05),且观察组改善优于对照组(P<0.05)。治疗后2组血清5-HT水平均升高(P<0.05),SP水平均降低(P<0.05),且观察组改善优于对照组(P<0.05)。结论龟鹿二仙汤加减联合针刺治疗PDSD疗效确切,可改善患者睡眠进程和睡眠结构,减轻抑郁和运动异常症状,降低神经系统兴奋性,促进睡眠质量提高。

加味龟鹿二仙汤对乳腺癌患者化疗骨髓毒性的影响

目的:观察加味龟鹿二仙汤对乳腺癌化疗骨髓毒性的影响。方法:将96例乳腺癌患者分为两组,治疗组(n=49)化疗同期服用加味龟鹿二仙汤,对照组(n=47)化疗同期服用鲨肝醇。连续6个疗程,比较化疗前后两组患者重组人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)使用率、毒副反应。结果:治疗组较对照组G-CSF使用率低(P<005);治疗组白细胞、中性粒细胞、血红蛋白、血小板下降程度轻,恢复快,单个核细胞对乳腺癌细胞杀伤活性增强。结论:化疗联合使用加味龟鹿二仙汤不仅可以减少升白药物使用频率,同时有效减轻化疗所致的骨髓毒性,提高患者的免疫力。

龟鹿二仙汤含药血清对大鼠成骨细胞增殖功能、OPG及ODF系统的研究

目的:探讨龟鹿二仙汤含药血清对大鼠成骨细胞(osteoblast,OB)增殖功能、OB关键基因骨保护素(OPG)、破骨细胞分化因子(ODF)的mRNA表达变化的研究,分析龟鹿二仙汤防治骨质疏松症的作用机理。方法:①采用胰蛋白酶-Ⅱ型胶原同浓度(10%、15%、20%)的龟鹿二仙汤含药血清培养大鼠成骨细胞(OB)24、48、72 h,应用MTT比色法来检测其对OB增殖功能的影响。②采用荧光定量PCR测定OB中OPG、ODF的表达。结果:龟鹿二仙汤含药血清对OB的增殖作用呈浓度依赖性,即20%>15%>10%;在培养24、48 h、72 h后显著促进其增殖作用。OPG mRNA表达在龟鹿二仙汤含药血清20%浓度时最强,且明显高于对照组(P<0.01),而ODF基因mRNA表达在20%浓度时最低,且明显低于对照组(P<0.01)。结论:龟鹿二仙汤含药血清对体外培养SD大鼠OB增殖具显著作用且呈浓度依赖性,可在分子水平上调节OPG、ODF表达,可能与其治疗骨质疏松机制相关。

龟鹿二仙汤合辛伐他汀片治疗绝经后骨质疏松症90例临床对比研究

目的:观察龟鹿二仙汤合辛伐他汀片治疗绝经后骨质疏松症患者的效果。方法:选取2018年1月至2018年10月在辽宁中医药大学附属二院骨科门诊就诊的绝经后骨质疏松症患者90例,所有患者均以碳酸钙D3作为基础药,据随机数字表将以上患者随机分为三组(龟鹿二仙汤组、辛伐他汀片组、龟鹿二仙汤联合辛伐他汀片组),每组30例,每组患者应用相对应的药品。进行6个月治疗,治疗后对患者的骨痛程度及腰椎及股骨颈的骨密度进行比较分析,治疗后均获得随访。结果:与治疗前比较,三组治疗6个月后,患者腰椎及股骨颈的骨密度增加(P<0.05),疼痛视觉模拟评分降低(P<0.05)。但龟鹿二仙汤联合辛伐他汀片组治疗效果明显优于以上两组(P<0.05)。结论:龟鹿二仙汤合辛伐他汀片治疗绝经后骨质疏松症疗效良好,安全性高,值得推广应用。

龟鹿二仙汤加减联合针刺治疗阿尔茨海默病疗效观察

目的:研究龟鹿二仙汤加减联合针刺治疗阿尔兹海默病的临床疗效.方法:借助计算机随机抽取2018年5月-2019年5月至日照市人民医院就诊的46例阿尔茨海默病患者作为研究对象,根据临床治疗方案进行分组.试验组患者使用龟鹿二仙汤联合针刺疗法治疗方案,参照组患者选择常规西医治疗方案,比较两组患者临床治疗效果.结果:试验组患者接受治疗后临床治疗总有效率高于常规组患者,组间差异存在统计学意义(P<0.05);试验组患者接受治疗后简易智力状态检查量表(Mini-Mental State Examination,MMSE)评分高于常规组患者,组间差异具备统计学意义(P<0.05).结论:应用龟鹿二仙汤加减联合针刺治疗阿尔兹海默症临床疗效较好,建议在临床中应用.

冥想训练联合龟鹿二仙汤加减治疗轻症阿尔茨海默病疗效观察

目的:探讨冥想训练联合龟鹿二仙汤加减治疗轻症阿尔茨海默病(Alzheimer Disease,AD)的疗效。方法:选取2018年11月-2020年11月在南阳医专第二附属医院神经内科治疗的轻症老年AD患者96例,采用随机数字表法分为观察组和对照组各48例。对照组采用常规西医加精神干预治疗,观察组采用冥想训练联合龟鹿二仙汤加减治疗。比较两组临床治疗效果,观察两组患者治疗前、治疗3个月后躯体功能、认知功能的改善情况。结果:观察总有效率高于对照组(P <0.05)。治疗3个月后,两组患者简易精神状态评定表(Mini-mental State Examination,MMSE)评分、剑桥老年认知量表(Cambridge Cognitive Examination-Chinese Version,CAMCOG)评分均升高,且观察组MMSE评分、CAMCOG评分高于对照组(P <0.05)。结论:冥想训练联合龟鹿二仙汤加减治疗AD疗效确切,能减轻患者躯体功能及认知功能缺损程度,提高患者日常生活能力,具有良好的临床应用价值。

龟鹿二仙汤治疗绝经后骨质疏松症临床观察

目的：观察龟鹿二仙汤治疗绝经后骨质疏松症患者的临床疗效及作用机制。方法：选择绝经后骨质疏松症患者60例,所有患者均以碳酸钙D3（600 mg/d）作为基础药,将其分为治疗组和对照组,治疗组应用龟鹿二仙汤;对照组应用阿仑膦酸钠,每组各30例,评价治疗前后疼痛和骨密度、性激素的变化。结果：龟鹿二仙汤组腰椎、股骨颈的骨密度明显增加,疼痛明显减轻,龟鹿二仙汤组在疼痛控制、骨密度的增加方面明显优于阿仑膦酸钠组,在性激素检测中发现龟鹿二仙汤组的雌二醇（E2）、睾酮（TESTO）较治疗前有明显提高,与治疗前比较有明显差异,具有统计学意义。阿仑磷酸钠组雌二醇（E2）、睾酮（TESTO）相对治疗前无明显差异,无统计学意义。结论：龟鹿二仙汤能够提高绝经后骨质疏松症的腰椎、股骨颈的骨密度,能缓解其疼痛,其作用机制考虑与雌二醇、睾酮的提升有关。龟鹿二仙汤治疗绝经后骨质疏松安全、有效。

加味龟鹿二仙汤治疗老年外伤后血虚证

目的:研究加味龟鹿二仙汤治疗老年人骨折术后血虚证的效果和作用机制,探索该汤剂的应用经验。方法:总结2018年1月-2019年12月手术治疗的120例老年股骨近端骨折手术患者的临床资料,其中治疗组60例应用西药联合加味龟鹿二仙汤治疗,对照组60例只采用西药治疗。对治疗前后患者血液血红蛋白(Hemoglobin,Hb)、网织红细胞计数(Reticulocyte Count,RTC)、维生素D_(3)(Vitamin D_(3),VD_(3))、碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase,ALP)等指标进行对照分析,同时观察对血虚症的治疗效果。结果:治疗组比对照组Hb、RTC、VD_(3)、骨钙素(Osteocalcin,OC)对比有显著性差异(P<0.05),而ALP、破骨细胞分化因子(Osteoclast Differentiation Factor,ODF)水平无显著性差异(P>0.05)。治疗组血虚证有效率明显高于对照组(P<0.05)。药物不良反应主要为轻度呕吐和腹泻,两组对比有显著性差异(P<0.05),无明显肝肾功能损害。结论:加味龟鹿二仙汤可有效治疗老年患者术后血虚证,促进骨折愈合。

加味龟鹿二仙饮联合辅酶Q10对化疗源性卵巢储备功能减退的疗效

目的:分析加味龟鹿二仙饮联合辅酶Q10在化疗源性卵巢储备功能减退患者中的临床疗效。方法:选择2021年11月至2023年5月在黔南布依族苗族自治州中医医院诊治的60例需进行化疗的女性肿瘤患者作为研究对象,按照随机数表法将其分为对照组和观察组,各30例。化疗期间,对照组患者使用辅酶Q10进行治疗,观察组患者使用加味龟鹿二仙饮联合辅酶Q10的治疗方法,比较两组患者的临床疗效。结果:化疗结束后1个月观察组患者的月经周期较对照短、月经量大于对照组;化疗结束后1个月观察组患者围绝经期症状发生率为23.33%,低于对照组的50.00%;化疗结束后1个月观察组患者的血清抗缪勒管激素(AMH)水平、窦卵泡数量(AFC)高于对照组,血清促卵泡生成激素(FSH)水平、FSH/促黄体生成素(LH)低于对照组;观察组患者的不良事件发生率低于对照组;观察组患者的治疗有效率为93.33%,高于对照组的70.00%,上述差异均具有统计学意义(P <0.05);化疗前及化疗结束后1个月两组患者血清谷丙转氨酶(ALT)、白蛋白(ALB)、总胆红素(TBIL)、血肌酐(Scr)比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。结论:加味龟鹿二仙饮联合辅酶Q10对于化疗源性卵巢储备功能减退患者有较高应用价值,可改善患者月经周期、月经量、AMH、AFC、FSH、FSH/LH等指标,降低围绝经期的症状发生率、不良事件发生率。

补肾健脾汤对去卵巢骨质疏松模型大鼠骨代谢指标的影响

目的:观察龟鹿二仙胶、补肾健脾汤等不同补肾方对去卵巢骨质疏松模型大鼠骨质疏松的影响及干预作用。方法:取3月龄SPF级雌性SD大鼠70只,随机分为假手术组、模型组、龟鹿二仙胶组、二仙汤组、补肾健脾汤组、雌二醇组和仙灵骨葆组,每组10只。对假手术组大鼠行假手术,余6组行双侧卵巢摘除术,12周后测定各组大鼠血清中Ⅰ型胶原羧基端肽(β-Crosslaps)、总Ⅰ型胶原氨基端延长肽(P1NP),以双能X线骨密度测定仪测定大鼠的骨密度(BMD)。结果:与雌二醇组比较,龟鹿二仙胶治疗组、补肾健脾组、仙灵骨葆组BMD显著增高(P<0.05);二仙汤组、仙灵骨葆组β-Crosslaps含量显著降低(P<0.05),补肾健脾汤组P1NP含量显著增高(P<0.05);与二仙汤组比较,龟鹿二仙胶组、补肾健脾汤组BMD显著增高(P<0.05);补肾健脾汤组β-Crosslaps及P1NP含量均显著增高(P<0.05),龟鹿二仙胶组P1NP含量显著增高(P<0.05)。结论:龟鹿二仙胶、补肾健脾汤补肾中药可以促进骨形成,减缓骨吸收,能有效防止去卵巢模型大鼠骨质疏松的形成。

龟鹿二仙汤合阿仑膦酸钠治疗绝经后骨质疏松症

目的:观察龟鹿二仙汤合阿仑膦酸钠对绝经后骨质疏松症患者的临床疗效。方法:选择绝经后骨质疏松症患者90例,所有患者均以碳酸钙D3(600mg/d)作为基础药,将其分为3组(龟鹿二仙汤组、阿仑膦酸钠组、龟鹿二仙汤+阿仑膦酸钠组),每组30例,各组予以相应药物。评价治疗前、治疗6个月后患者疼痛VAS评分和腰椎及股骨颈的骨密度。结果:与治疗前比较,3组治疗6个月后,患者腰椎及股骨颈的骨密度增加(P<0.05),疼痛VAS评分降低(P<0.05)。龟鹿二仙汤+阿仑膦酸钠组治疗6个月后其骨密度及疼痛的VAS评分优于龟鹿二仙汤组和阿仑膦酸钠组(P<0.05)。结论:龟鹿二仙汤合阿仑膦酸钠治疗绝经后骨质疏松症安全、有效。

龟鹿二仙胶汤及其拆方对大鼠软骨细胞凋亡基因表达的影响

目的:通过观察龟鹿二仙胶汤及其拆方对SD大鼠软骨细胞凋亡基因表达的影响,比较龟鹿二仙胶汤中各药物组成在全方中的作用。方法:取1月龄SD大鼠膝关节软骨建立软骨细胞体外培养体系,采用实时荧光定量PCR检测Bax、Bcl-2、Caspase-3、p53mRNA表达。结果:龟鹿二仙胶、龟甲、鹿角、人参、枸杞、盐酸氨基葡萄糖均可显著抑制大鼠软骨细胞Bax、Caspase-3、P53的表达;龟鹿二仙胶、龟甲、鹿角与盐酸氨基葡萄糖效果相当,人参、枸杞弱于盐酸氨基葡萄糖。结论:龟甲和鹿角是龟鹿二仙胶抑制凋亡的主要物质。龟甲、鹿角峻补阴阳以生气血精髓的作用可以一定程度上从抑制软骨细胞凋亡来体现。人参大补元气、枸杞滋补肾阴,抑制凋亡有效,但效果明显不如龟鹿二仙胶;而4味药共同作用,具有填补精髓、益气壮阳之功,人参、枸杞可以在一定程度上加强龟甲、鹿角抑制软骨细胞凋亡基因的表达。

加味龟鹿二仙汤对乳腺癌化疗患者骨髓抑制及免疫功能的影响

目的 观察加味龟鹿二仙汤对乳腺癌化疗患者骨髓抑制及免疫功能的影响.方法 收集2012年7月至2013年6月广东惠州第三人民医院乳腺科乳腺癌患者96例,按照随机数字表法随机分为两组各49例,治疗组49例在化疗同期服用加味龟鹿二仙汤,对照组47例化疗同期服用鲨肝醇.3周为一个疗程,连续治疗6个疗程,比较两组患者重组人粒细胞集落刺激因子（G-CSF）使用率、骨髓毒性、免疫功能、生活质量评分.结果 治疗组G-CSF使用率为21.1%、对照组为46.8%,两组G-CSF使用率比较,差异有统计学意义（χ2＝42.363,P＜0.01）;治疗组白细胞、血红蛋白、血小板降低发生率分别为19.14%、12.2%、12.6%,对照组分别为45.3%、26.2%、25.9%,两组比较（χ2值分别为45.31、18.29、16.47,P均＜0.01）.治疗组治疗后CD4＋、CD8＋、CD4＋/CD8＋、自然杀伤（NK）细胞活性分别为（38.87±9.21）%、（31.52±7.06）%、（1.82±0.39）%、（19.52±3.06）%,较同组治疗前有不同程度提高（P均＜0.01）;对照组CD4＋、CD8＋、CD4＋/CD8＋、NK细胞活性分别为（32.12±11.97）%、（25.08±8.95）%、（1.41±0.56）%、（13.98±4.05）%;两组治疗后比较,治疗组高于对照组（P均＜0.01）.治疗后治疗组KPS评分（79.87±9.21）分,高于对照组（72.15±7.09）分（P＜0.01）.结论 化疗联合加味龟鹿二仙汤可减少升白药物使用频率,有效减轻化疗所致的骨髓毒性,增强机体的免疫力,提高患者生活质量.

参苓白术散合龟鹿二仙汤加减对原发性骨质疏松症脾肾两虚证患者骨代谢及炎症反应的影响

目的探讨参苓白术散合龟鹿二仙汤加减对原发性骨质疏松症脾肾两虚证患者骨代谢及炎症反应的影响。方法将符合入选标准的2018年6月-2019年10月本院82例原发性骨质疏松症脾肾两虚证患者采用随机数字表法分为2组,每组41例。对照组口服碳酸钙D3片与阿仑膦酸钠,观察组在对照组基础上服用参苓白术散合龟鹿二仙汤加减。2组均治疗6个月。分别于治疗前后进行中医症状评分,采用双能X线骨密度分析仪检测腰椎L2~4及股骨颈和桡骨远端1/3处骨密度值,采用电化学发光分析仪检测血清抗酒石酸酸性磷酸酶-5b(TRACP-5b)、Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)水平,采用放射免疫法检测骨钙素(BGP)水平,采用全自动生化分析仪检测IL-6、IL-10、TNF-α、CRP水平。观察治疗期间的不良反应,评价临床疗效。结果观察组总有效率为95.1%(39/41)、对照组为78.0%(32/41),2组比较差异有统计学意义(χ^(2)=5.145,P=0.023)。观察组治疗后腰背疼痛、胫膝酸软、肢体倦怠、神疲乏力、头晕耳鸣、夜尿频数、纳少便溏、面色不华评分均低于对照组(t值分别为14.268、10.732、20.720、7.564、9.055、15.975、10.826、6.552,P值均<0.001)。治疗后,观察组腰椎L_(2~4)[(0.89±0.06)g/cm^(3)比(0.81±0.04)g/cm^(3),t=7.104]、股骨颈[(0.80±0.08)g/cm^(3)比(0.72±0.06)g/cm^(3),t=5.122]、桡骨远端1/3处[(0.65±0.12)g/cm^(3)比(0.56±0.14)g/cm^(3),t=3.125]骨密度值高于对照组(P<0.01)。治疗后,观察组血清BGP及IL-10水平高于对照组(t值分别为3.875、3.714,P<0.01),TRACP-5b、CTX-Ⅰ水平及IL-6、TNF-α、CRP水平低于对照组(t值分别为3.169、5.849、9.412、4.606、5.430,P值均<0.01)。结论参苓白术散合龟鹿二仙汤加减可有效改善原发性骨质疏松症脾肾两虚证患者临床症状,增加骨密度,调节骨代谢,减轻炎症反应,提高临床疗效。

龟鹿二仙胶汤含药血清对兔骨髓基质干细胞增殖的影响

目的:观察龟鹿二仙胶汤对骨髓基质干细胞(BMSCs)增殖的影响,确定影响BMSCs增殖的最佳中药血清浓度。方法:经前期体外分离、纯化、培养获得兔BMSCs,运用不同浓度的龟鹿二仙胶汤中药含药血清对获得的兔BMSCs进行药物干预24、48、72 h后,采用MTT、免疫组化、流式细胞仪等方法,研究龟鹿二仙胶汤对BMSCs增殖的影响。结果:MTT比色实验显示,龟鹿二仙胶各浓度组均能不同程度地促进BMSCs的能量代谢,促进BMSCs增殖,与空白对照组相比有显著差异(P<0.01),而且以15倍药物浓度组为最佳。免疫组化结果证实,龟鹿二仙胶汤含药血清可通过促进PCNA表达来控制DNA复制,以15倍龟鹿二仙胶汤药物浓度血清培养时BMSCs表达致密的棕褐色颗粒最多,其他浓度组及TGF-β_3组较多,空白对照组则最少。FCM结果显示,二仙胶汤药物血清能显著提高BMSCs增殖指数,且以15倍药物浓度龟鹿血清培养时最明显。结论:龟鹿二仙胶汤刺激BMSCs增值与药物浓度有关,低浓度龟鹿二仙胶汤就能显著刺激BMSCs增殖,无论是48 h、72 h测验均为15倍药物浓度时具有显著的增值作用,而更高浓度龟鹿二仙胶汤则表现为促进BMSCs增殖作用减弱。

加味龟鹿二仙汤对原发性卵巢功能不全小鼠卵巢miR-190表达的影响

目的:观察加味龟鹿二仙汤对原发性卵巢功能不全(POI)小鼠卵巢miR-190表达的影响,探讨加味龟鹿二仙汤对POI的干预作用及机制,为临床上中药治疗POI提供理论依据。方法:将连续两个动情周期正常的40只昆明雌性小鼠纳入实验,随机分为空白组、模型组、野山药复合营养软胶囊(DHEA)组、中药组。模型组、DHEA组及中药组连续15d腹腔注射环境化学物质(VCD)构建POI模型。其后中药组给予加味龟鹿二仙汤中药药液0.015mL/g灌胃,DHEA组给予DHEA药液0.015mL/g灌胃,空白组和模型组均给予0.9%氯化钠溶液0.015mL/g灌胃。4d为1个疗程,每4天停1d,共30d。观察小鼠动情周期和卵巢组织形态学变化;应用实时荧光定量PCR技术检测小鼠卵巢组织中miR-190表达水平。结果:与空白组比较,模型组小鼠卵巢miR-190表达明显升高(P<0.01);与模型组比较,DHEA组和中药组小鼠卵巢miR-190表达量均显著降低(P<0.01);且中药组小鼠卵巢miR-190表达低于DHEA组(P<0.01)。结论:加味龟鹿二仙汤能有效增加POI小鼠卵巢组织原始卵泡和初级卵泡数量,其机制可能与抑制卵巢mi R-190表达有关。

化湿补肾法对膝骨关节炎大鼠软骨修复机制的研究

目的探讨化湿补肾法治疗膝骨关节炎(KOA)的机制。方法将48只SPF级SD大鼠随机分为空白组、模型组、化湿定痛汤组、龟鹿二仙胶组、化湿补肾法组,采用木瓜蛋白酶关节腔注射建立膝骨关节炎模型,造模成功后各组大鼠灌胃相应药物,化湿定痛汤组灌胃化湿定痛汤4.68 g/(kg·d),龟鹿二仙胶组灌胃龟鹿二仙胶汤2.7 g/(kg·d),化湿补肾法组灌胃化湿补肾法中药7.38 g/(kg·d),连续灌胃28 d,于第28天对大鼠进行取材,取右侧股骨行HE染色观察软骨形态,取右侧胫骨平台滑膜、关节液用ELISA检测前列腺素-2(PGE-2)、环氧化和酶-2(COX-2)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达,取右胫骨平台软骨用qPCR检测p38、p53、Ⅱ型胶原的表达。结果 HE染色形态结果表明化湿补肾法组、龟鹿二仙胶组、化湿定痛汤组均优于模型组。与龟鹿二仙胶组相比,化湿补肾法组PGE-2、COX-2、IL-1β、TNF-α表达量下降(P<0.05),软骨的p38、p53表达降低(P<0.05),Ⅱ型胶原表达升高(P<0.05)。结论化湿补肾法可有效减轻滑膜和关节液中炎症因子表达,增加软骨细胞合成代谢,抑制软骨细胞凋亡,从而促进关节软骨的修复,延缓KOA的进程。