混合人血清诱发豚鼠过敏性休克猝死模型的建立

目的建立多人混合血清致豚鼠过敏性休克死亡动物模型。方法将健康豚鼠18只随机分为致敏组与生理盐水对照组,将致敏组豚鼠右侧后爪掌皮内注射致敏原免疫3周后,诱发过敏性休克,对照组以生理盐水代替致敏原。结果致敏组豚鼠均出现过敏性休克的典型临床表现及体征,放射免疫法检测血清IgE水平显著增高。结论本实验成功地建立了过敏性休克的豚鼠实验动物模型,进一步证明了异体混合血清的高致敏性,为过敏性休克的临床及法医学诊断及治疗研究提供了一个良好的载体。

过敏性休克死亡豚鼠器官中IgE的表达及其法医学意义

目的寻找法医学鉴定过敏性休克死亡的病理形态学诊断指标。方法利用组织芯片技术采用免疫组化SP法检测豚鼠过敏性休克死亡后0,6,12,24h等4个时间点的心、肝、肺、肾、脾、胃、肠、气管及扁桃体组织中的IgE的表达。结果实验组肺及气管组织IgE呈阳性表达,脾组织IgE呈弱阳性表达,以死亡即刻表达最强,且随死亡时间的延长而减弱,各时间点的显色信号强度存在显著性差异(P<0.05);实验组其它器官及对照组9个器官均无表达。结论应用免疫组化方法检测IgE在肺、气管、脾组织中的表达,可作为法医学鉴定过敏性休克死亡的病理形态学诊断指标;肺及气管组织IgE阳性强度随时间的延长而减弱,提示法医学鉴定过敏性休克死亡应尽早尸检。

吐温80及其配制的鱼腥草注射液致豚鼠过敏反应的实验研究

目的评价2种吐温80及其配制的鱼腥草注射液静脉给药对豚鼠的致敏性。方法采用全身主动过敏试验方法,豚鼠分别腹腔注射各组受试药液以致敏,致敏期间每日观察动物状态。末次致敏后第11天,各组豚鼠由足趾静脉注射2倍致敏剂量的相应药液进行激发,激发给药前15 min及激发后连续40 min观察豚鼠的反应,记录症状出现、消失时间,评价动物反应症状。激发停药后40 min取血,ELISA方法检测血浆IgE、组胺含量,并结合反应症状结果综合评价致敏性。结果各组豚鼠致敏期间无异常反应,激发后综合判定致敏性,卵白蛋白阳性对照组、0.5%吐温80(1)组可诱发豚鼠过敏反应阳性,其他各组均未诱发豚鼠出现典型的过敏反应。结论控制吐温80质量,并将浓度限定在0.25%及以下,可在保证药物增溶效果的同时避免过敏反应的发生。在进行豚鼠全身主动过敏试验时,以豚鼠反应症状为主要指标,血浆IgE、组胺升高为辅助指标综合判定致敏性,可在一定程度上提高试验的灵敏性。

过敏性休克豚鼠血浆咽喉肺组织中P物质的观测

目的探讨过敏性休克法医学鉴定的诊断指标。方法制备豚鼠过敏性休克的动物模型,应用放射免疫法测定其血浆中P物质浓度;免疫组化SABC法和BI-2000图像分析系统对咽喉和肺组织的P物质免疫反应进行染色观测,计算阳性指数(PI)。结果与对照组含量(87．70pg±7．60pg／μl)相比,过敏性休克豚鼠血浆中P物质含量 (131．01pg±18．93pg／μl)增加,其差异具有极显著意义(P<0．01);呼吸道内P物质免疫阳性反应增强,实验组咽喉和肺组织PI值分别为63．59±14．51和55．98±14．8,对照组咽喉和肺组织PI值分别为33．32±8．04和20．51±6．76, 两组差异具有极显著意义(P<0．01)。结论 P物质在过敏性休克豚鼠血浆浓度增加和呼吸系统组织中免疫阳性反应增强,可能有助于过敏性休克的法医病理学诊断。

IL-4与IL-10在过敏性休克中的表达及意义

目的复制过敏性休克豚鼠动物模型,探讨IL-4与IL-10在豚鼠血清中的表达,为法医学和临床对过敏性休克的诊断提供科学、客观的参考依据。方法采用多人混合血清建立过敏性休克的豚鼠模型,豚鼠40只(实验组30只,对照组10只),用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测过敏性休克豚鼠血清中IL-4与IL-10的表达情况。结果实验组血清IL-4、IL-10水平明显高于对照组(P<0.01)。结论实验组血清IL-4与IL-10水平明显高于对照组,为过敏性休克的法医学和临床的诊断提供了参考依据。

豚鼠过敏性休克死亡白细胞介素-4、白细胞介素-13与免疫球蛋白E的表达及法医学意义

目的:建立豚鼠过敏性休克死亡动物模型,探讨豚鼠血清中白细胞介素(interleukin,IL)-4、IL-13和免疫球蛋白E(Immunoglobulin E,IgE)的表达,旨在为临床和法医学诊断过敏性休克提供科学、客观的参考依据。方法:用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测30只过敏性休克豚鼠(实验组20只,对照组10只)血清IL-4、IL-13和IgE的表达情况。结果:实验组血清IL-4水平明显高于对照组(P=0.000);实验组血清IL-13水平明显高于对照组(P=0.000);实验组血清IgE水平明显高于对照组(P=0.000)。结论:实验组血清IL-4、IL-13与IgE水平明显高于对照组,为过敏性休克临床诊断及法医学鉴定提供了参考依据。

冲击波暴露合并缺氧对豚鼠内耳的影响

目的探讨急性缺氧对冲击波暴露后豚鼠听功能和听毛细胞损伤的影响。方法对冲击波暴露后不同组采用耳蜗基底膜铺片技术和听性脑干反应测试技术进行观测。结果冲击波暴露后单纯冲击伤组、冲击伤加缺氧组听阈均较暴露前明显下降,差异有统计学意义(P<0.05),听毛细胞受到损伤,冲击伤加缺氧组更为明显。结论冲击波暴露后早期听阈阈值及听毛细胞损伤与缺氧有密切关系。

噪声暴露后豚鼠Corti器内热休克蛋白的变化

目的 观察噪声暴露后豚鼠Ｃｏｒｔｉ器内热休克蛋白的变化。方法 取杂色、耳廓反射正常、鼓膜完整的豚鼠２０只，分为正常对照组（ＮＧ）和高强度噪声暴露组（ＨＧ），所用高强度噪声为１１５ｄＢ ＳＰＬ，噪声暴露后取下耳蜗，应用抗热休克蛋白７０（ＨＳＰ７０）的单抗作免疫组化观察。结果 噪声暴露组豚鼠耳蜗毛细胞ＨＳＰ７０染色强度比对照组强。结论 热休克蛋白在噪声所致豚鼠听力损伤中可能起一定防护作用。

TLR4在过敏性休克死亡豚鼠中的表达及法医学意义

目的探讨过敏性休克豚鼠多种器官TLR4的表达,为过敏性休克死亡的法医学鉴定寻找新指标。方法将35只豚鼠随机分为实验组(26只)和对照组(9只),实验组豚鼠注射人血清致敏原建立过敏性休克豚鼠模型,对照组注射生理盐水。采用RT-PCR及免疫组织化学分别检测2组豚鼠死后即时、冷藏48h、冰冻7d气管、肺、胃和脾等组织TLR4的表达水平。结果实验组豚鼠死后即时、冷藏48h、冰冻7d气管、肺、胃和脾TLR4mRNA及蛋白表达水平均较对照组显著升高(P<0.05);实验组豚鼠死后各时段气管、肺、胃和脾TLR4mRNA及蛋白表达水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 RT-PCR、免疫组织化学检测气管、肺、胃及脾TLR4表达可能为法医学鉴定过敏性休克猝死提供参考;过敏性休克死亡在尸体保存条件良好情况下,TLR4在7d内降解不明显。

冲击波暴露后不同年龄豚鼠耳蜗微血管渗透性的改变及与听阈的关系

目的 :探讨冲击波暴露后 6h ,12h ,青年、老年豚鼠耳蜗血管纹微血管通透性和听阈的变化。方法 :采用胶体镧作为电子示踪剂透射电镜下观察。结果 :冲击波暴露后 6h、12h两组豚鼠听阈均较暴露前明显下降 (P <0 .0 5 ) ,微血管内皮细胞之间的紧密连接遭到破坏 ,老年组更为明显。结论 :暴露后早期听阈阈值的升高 ,可能与血管纹微血管通透性改变密切相关。

国产西替利嗪的抗组胺作用研究

目的研究国产西替利嗪的抗组胺作用。方法用组胺分别诱导豚鼠哮喘、休克和大鼠血管通透性增加的动物模型。结果国产西替利嗪（０．５，１．５和５ｍｇ·ｋｇ－１）具有拮抗组胺诱导的豚鼠哮喘、休克和大鼠血管通透性增加的作用。结论国产西替利嗪具有明显的抗组胺作用。

Hsp70,Toll样受体4抗体与自身免疫性内耳病的关系

目的:建立一种自身免疫性内耳病的动物模型,寻求Toll样受体4抗体与Hsp70的关系.方法:提取豚鼠内耳膜迷路组织为抗原.将豚鼠用环磷酰胺预处理,将抗原与等量弗氏完全佐剂一起免疫豚鼠,观测Hsp70在内耳的表达;通过鼓室注射Toll样受体4抗体,再观测Hsp70在内耳的表达.结果:免疫豚鼠后听性脑干反应阈显著提高,内耳出现显著的炎细胞浸润,Hsp70的表达增强,TNF-α,NF-κB的表达增多,血清中检测到抗Hsp70抗体;加入Toll样受体4抗体后Hsp70的表达减弱,炎细胞减少,TNF-α,NF-κB的表达降低.结论:Toll样受体4抗体可下调Hsp70在自身免疫性内耳病中的表达.

中医院校开展豚鼠过敏性休克虚拟仿真实验项目的构想

医学免疫学与病原生物学实验教学是一门重要课程,虚拟仿真技术可为目前免疫学与病原生物学实验教学提供虚实互补的有效途径,推进实验教学改革的进程。本文针对传统豚鼠过敏性休克实验教学中成本高昂、造模时间长、学生对该实验缺乏整体认识、学生操作不熟练、实验成功率低等一系列问题,对豚鼠过敏性休克虚拟仿真实验项目提出初步构想,以期为免疫学与病原生物学虚拟仿真实验项目的设计与开发提供思路。

国产盐酸氮斯汀抗组胺作用的实验评价

目的 :评价国产盐酸氮 艹卓 斯汀的抗组胺作用。方法 :皮内注射组胺增加豚鼠皮肤通透性 ;静脉注射组胺诱导豚鼠休克 ;组胺诱导离体豚鼠回肠平滑肌收缩。结果 :盐酸氮 艹卓 斯汀 (0 .0 5 ,0 .15 ,0 .4 5mg·kg-1,ig)可剂量依赖性地抑制组胺所致皮肤血管通透性增加 ;盐酸氮 艹卓 斯汀 (0 .0 5 ,0 .1,0 .2mg·kg-1,ig)可剂量依赖性地降低休克的反应程度 ,延长休克的潜伏期 ,降低豚鼠的死亡率。盐酸氮艹卓 斯汀 (10 -8,3× 10 -8,10 -7,3× 10 -7mol·L-1)可剂量依赖性拮抗组胺所致离体回肠平滑肌收缩 ,使组胺量效曲线平行右移 (pA2 值为 8.5 5 )。结论 :国产盐酸氮 艹卓

直流电击对豚鼠快、慢反应心肌细胞电生理特性的影响

在豚鼠正常心室肌、高钾去极化和肾上腺素诱导的慢反应心肌及窦房结标本上，观察了直流电击（ＤＣＳ）的影响。结果表明，ＤＣＳ后正常心室肌跨膜电位出现抑制性改变，且呈电击能量依从性；ＤＣＳ的膜效应不受心肌兴奋状态的影响；ＤＣＳ对高钾去极化的慢反应心肌的作用小于正常心室肌；ＤＣＳ可引起窦房结自律性短暂降低。

葡萄糖酸钙对链霉素过敏休克的保护作用及其机理

葡萄糖酸钙对链霉素—蛋白(ST-BSA)致敏豚鼠过敏休克的保护作用的实验研究,结果对照组一般过敏反应发生率为27%,休克率为53%,死亡率为20%;保护组一般过敏反应率为13%,无休克和死亡发生。致敏豚鼠离体回肠实验结果,对照组肠管收缩高度为48.7±10.8mm,保护组为2.2±4.1mm,两组差异显著(P<0.01);ST-BSA致敏家兔血清异种动物PCA实验结果,对照组抗体滴度为1:4096,原血清蓝斑直径为35.9±1.9mm,保护组抗体滴度为1:512,原血清蓝斑直径为25.2±0.8mm,两组抗体滴度及蓝斑直径差异显著(P<0.01);大鼠腹腔肥大细胞脱颗粒实验结果,致敏对照组脱颗粒率为54.3±7.1%,保护组为17.5±6.8%,两组结果有明显差异(P<0.01)。提示葡萄糖酸钙对ST-BSA致敏豚鼠过敏休克有保护作用,其机理可能与抑制肥大细胞脱颗粒释放组胺等过敏介质有关。

盲肠结扎穿刺致豚鼠急性肺损伤动物模型建立

目的 研究败血性急性肺损伤的动物模型 ,并探讨其在急性肺损伤研究中的意义。方法 用盲肠结扎穿刺(CLP)法的豚鼠急性肺损伤模型 ,结合动脉血气分析、外周血白细胞计数、肺湿重 /干重比值 (W/D)及肺组织病理观察。结果 CLP模型中动物的症状和表现缓慢出现 ,逐渐恶化 ,最后导致败血性休克 ,于 2d左右出现大量死亡。结论 用盲肠结扎穿刺的方法制作豚鼠急性肺损伤动物模型较大鼠内毒素性休克 ,表现更类似于人类的肠源性肺损伤 ,且症状缓慢发生 ,逐渐恶化 。

萘甲异喹的抗过敏作用

本文研究萘甲异喹(NI)的抗过敏作用。NI(10mg/kg,ip)抑制大鼠被动皮肤过敏反应。NI10^(-6)M、3×10^(-6)M 和10^(-5)M 抑制离体豚鼠回肠的过敏性收缩反应,抑制率分别为43%、63%和84%。NI 3×10^(-6)M 和10^(-5)M 抑制由 SRS-A 引起的离体豚鼠回肠收缩,抑制率分别为39%和66%。NI 能以浓度依赖方式对抗组胺、乙酰胆碱和 5-羟色胺所致的离体豚鼠回肠收缩,其抑制最大收缩的 IC_(50)值分别为1.1×10^(-5)M、1.3×10^(-5)M 和2.8×10^(-6)M。结果提示 NI 是一种过敏介质拮抗剂,对过敏反应有一定对抗作用。

过敏性休克死亡豚鼠肺组织中CD63的表达

目的研究过敏性休克死亡豚鼠肺组织中分化抗原簇63(cluster of differentiation 63,CD63)的蛋白表达,探讨CD63对过敏性休克死亡的诊断价值。方法 20只豚鼠随机分为对照组,过敏性休克死亡即刻组、冷藏组(4℃贮藏48 h)、冷冻组(-20℃贮藏7 d)。采用人混合血清注射建立过敏性休克死亡豚鼠动物模型。应用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色、免疫组织化学染色、Western印迹法、酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和real-time RT-PCR检测肺组织中CD63蛋白及CD63mRNA的表达变化。结果 HE染色结果显示,各过敏性休克组肺组织淤血、水肿,嗜酸性粒细胞浸润。Western印迹法检测结果显示,过敏性休克豚鼠肺组织中CD63蛋白表达高于对照组(P<0.05),各过敏性休克组组间比较,差异无统计学意义。免疫组织化学染色、real-time RT-PCR结果与Western印迹法结果一致。ELISA检测结果显示,死亡即刻组CD63蛋白表达高于对照组(P<0.05)。结论过敏性休克死亡豚鼠肺组织中CD63蛋白和CD63 mRNA表达明显增强。动物尸体冷藏48 h和冷冻7 d不影响上述指标的检查,CD63有望成为过敏性休克死亡的辅助诊断指标。

不同强度噪声对豚鼠耳蜗HSP70表达特点的影响

[目的 ]观察无损伤的中等强度的习服声刺激后耳蜗中热应激蛋白 (heatshockprotein ,HSP)的表达特点。 [方法 ]习服组先接受 10d每天 6h习服声暴露 ;对照组静置饲养 10d ;习服 +高噪声暴露组先接受 10d每天 6h习服声暴露 ,休息 2d后 ,再暴露于高强度噪声 2h ;高噪声暴露组直接暴露于高强度噪声 2h。然后以免疫组织化学方法结合图像分析技术检测各组动物耳蜗HSP70表达情况。 [结果 ]习服组耳蜗中HSP70 (积分光密度为 2 2 .99,平均光密度为 0 .2 8)明显高于对照组 (积分光密度为 6.77,平均光密度为 0 .11) (P <0 .0 5 ) ;习服 +高噪声组明显低于高噪声暴露组 (P <0 .0 5 ) ,两组积分光密度分别为 2 0 .0 6和 43 .14 ,平均光度分别为 0 .3 0和 0 .40。 [结论 ]用无损伤的中等强度习服声诱导耳蜗中HSP70的表达高于正常状态时的表达而低于高强度噪声刺激时的表达 。