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沟眶象味觉受体基因EscrGR8对雌成虫繁殖力的影响
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作者 郭晓丽 文超 +1 位作者 温俊宝 温晓健 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期307-317,共11页
【目的】分析和阐明沟眶象Eucryptorrhynchus scrobiculatus味觉受体基因EscrGR8的分子特性和功能,揭示其调节雌成虫繁殖力的作用。【方法】基于沟眶象触角转录组数据库,采用RACE克隆EscrGR8的cDNA全长序列;利用qRT-PCR检测EscrGR8在沟... 【目的】分析和阐明沟眶象Eucryptorrhynchus scrobiculatus味觉受体基因EscrGR8的分子特性和功能,揭示其调节雌成虫繁殖力的作用。【方法】基于沟眶象触角转录组数据库,采用RACE克隆EscrGR8的cDNA全长序列;利用qRT-PCR检测EscrGR8在沟眶象不同发育阶段(卵、1-6龄幼虫、蛹、雌成虫和雄成虫)和雌雄成虫组织(去除触角和喙的头、触角、口器、中肠、前足、睾丸、卵巢、雄虫交配器和雌虫产卵器)中的表达量。显微注射雌成虫dsRNA后0,6,12,24,36,48和72 h时利用qRT-PCR检测RNAi后EscrGR8的表达量。检测显微注射dsEscrGR8后1-5 d和6-11 d时沟眶象雌成虫在不同土壤含水量(0~10%,11%~20%,21%~40%,41%~60%,61%~80%和81%~100%)条件下的产卵选择率、总产卵数量和所产卵的孵化率,研究抑制EscrGR8表达对雌成虫产卵选择性和繁殖力的影响。【结果】成功克隆了沟眶象EscrGR8(GenBank登录号:OR836580)的cDNA全长序列,开放阅读框(ORF)长1251 bp,编码了416个氨基酸,具有6个跨膜结构域。多序列比对和系统发育进化分析结果表明,EscrGR8与其他昆虫的GR的氨基酸序列同源性普遍较低,其中与棉铃象甲Anthonomus grandis的AgraGR64f氨基酸序列一致性为30.96%。qRT-PCR检测结果表明,EscrGR8在沟眶象不同发育阶段和成虫组织中的表达量具有显著差异,EscrGR8在雌成虫中的表达量最高,在卵中的表达量最低;EscrGR8在雌成虫卵巢中特异性高表达。显微注射dsEscrGR8不仅在一定时间内显著降低EscrGR8的表达量,并且对雌成虫的产卵选择性具有显著影响。显微注射dsEscrGR8后1-5 d时沟眶象雌成虫在含水量21%~40%土壤条件下的产卵选择率和所产卵的孵化率与显微注射dsGFP的对照组相比分别显著降低了24.66%和15.83%;在含水量81%~100%土壤条件下的产卵选择率与显微注射dsGFP的对照组相比显著增加了28.39%,雌成虫所产卵几乎不孵化。【结论】本研究证实了味觉受体基因EscrGR8对沟眶象雌成虫产卵选择和繁殖力的影响,有助于理解昆虫味觉受体基因的多样性和功能特异性。 展开更多
关键词 沟眶象 产卵量 味觉受体基因 RNAI 表达模式
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苦味受体的非味觉功能研究进展
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作者 王辉 冯平 《广西师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2024年第1期18-27,共10页
苦味的识别对动物生存至关重要,该过程由苦味受体介导。食物中的化学物质刺激口腔内的苦味感受器,经信号传导反馈给大脑,产生苦味感知并最终影响食物的选择和排斥。除了基本的味觉功能,苦味受体在口腔外的其他器官和组织中普遍表达,在... 苦味的识别对动物生存至关重要,该过程由苦味受体介导。食物中的化学物质刺激口腔内的苦味感受器,经信号传导反馈给大脑,产生苦味感知并最终影响食物的选择和排斥。除了基本的味觉功能,苦味受体在口腔外的其他器官和组织中普遍表达,在细胞增殖、代谢调控、免疫反应等重要的生理生化过程中发挥作用。尽管苦味受体的蛋白结构仍未得到全部解析,具体的功能和作用机制未知,但由于其亚型众多且分布广泛,是理想的靶点,并将成为各类疾病治疗的重要探究方向。本文介绍苦味受体在口腔外部分器官组织中的表达和在相关疾病中的研究进展,有助于全面系统理解苦味受体的重要作用。 展开更多
关键词 苦味受体 味觉功能 苦味激动剂 代谢调控
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艾灸对实验性RA大鼠海马下丘脑垂体GR表达影响的研究 被引量:13
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作者 刘旭光 周海燕 +6 位作者 黄迪君 罗荣 魏铮 杨露晨 高骏 余小夏 陈婷 《中华中医药学刊》 CAS 2009年第9期1797-1799,共3页
目的:在观察艾灸对实验性RA大鼠抗炎效应的基础上,研究艾灸对海马、下丘脑及垂体GR表达的影响,探索艾灸治疗RA的GR机制。方法:将雄性SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、艾灸组,用福氏完全佐剂塑造大鼠实验性RA病理模型,艾灸"肾俞&... 目的:在观察艾灸对实验性RA大鼠抗炎效应的基础上,研究艾灸对海马、下丘脑及垂体GR表达的影响,探索艾灸治疗RA的GR机制。方法:将雄性SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、艾灸组,用福氏完全佐剂塑造大鼠实验性RA病理模型,艾灸"肾俞"、"足三里"治疗,测定大鼠右后足容积,采用免疫组化法检测海马、下丘脑、垂体GR表达。结果:造模后模型组大鼠足肿胀度明显高于空白对照组(P<0.01),艾灸组大鼠足肿胀度明显低于模型组(P<0.01);海马GR表达,模型组与空白组比较有增高趋势(P>0.05),艾灸组明显低于模型组(P<0.01);下丘脑GR表达,模型组明显高于空白对照组(P<0.01),艾灸组较模型组明显降低(P<0.01);垂体GR表达,模型组较空白对照组显著升高(P<0.01),而艾灸组与模型组比较无显著性差异(P>0.05)。结论:艾灸对实验性RA具有抗炎效应,艾灸对RA大鼠海马、下丘脑GR表达的调控可能是其实现抗炎效应的重要机制。 展开更多
关键词 艾灸 类风湿关节炎 海马 下丘脑 垂体 糖皮质激素受体
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运动过程中糖皮质激素受体减少的机制探讨——GR mRNA的变化 被引量:6
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作者 陈佩杰 许豪文 +1 位作者 段子才 蔡斌 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期156-160,130,共6页
同步观察大鼠在 7周递增负荷训练过程中血浆皮质酮、肝胞液糖皮质激素受体 (GR)和肝脏GRmRNA的动态变化 ,试图从GRmRNA水平上探讨运动应激后GR变化的机制。SD大鼠随机分为对照组 ,训练 3周组 ,训练 5周组 ,训练 7周组 ,训练 7周 +恢复 ... 同步观察大鼠在 7周递增负荷训练过程中血浆皮质酮、肝胞液糖皮质激素受体 (GR)和肝脏GRmRNA的动态变化 ,试图从GRmRNA水平上探讨运动应激后GR变化的机制。SD大鼠随机分为对照组 ,训练 3周组 ,训练 5周组 ,训练 7周组 ,训练 7周 +恢复 1周组。动物训练采用递增负荷的跑台训练。采用放射配体结合分析法测定肝胞液GR结合量 ;定量RT -PCR检测肝GRmRNA表达。结果发现 :(1) 7周递增负荷训练过程中 ,血浆皮质酮浓度表现为不断增加 ,至第 7周达最高 ,第 8周 (恢复周 )又降至接近对照组水平。 (2 )大鼠在 7周递增负荷训练过程中 ,肝胞液GR呈持续下降 ,至训练第 7周降至最低 ,恢复 1周后大鼠肝胞液GR有回升。 (3)在 7周递增负荷训练过程中 ,肝脏GRmRNA的变化与肝胞液GR的变化相近 ,与肝胞液GR的变化不同 ,恢复 1周后肝GRmRNA已恢复至正常水平。结果表明 ,递增运动负荷训练过程中GR结合容量的减少至少部分地发生在mRNA水平上 ,即由于GRmRNA的减少 ,造成GR分子的合成减少。但是 ,GR结合容量的恢复速度比GRmRNA慢 ,提示训练过程中 ,大鼠肝GR结合容量的减少不全是GRmRNA减少的结果 ,可能还有其他影响因素 ,比如GR结合活性的减少和 /或GR蛋白分解加速。 展开更多
关键词 运动 糖皮质激素 糖皮质激素受体 grmRNA
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艾灸对实验性类风湿性关节炎大鼠海马GR、MEL1B表达影响的研究 被引量:13
5
作者 周海燕 刘旭光 高骏 《辽宁中医杂志》 CAS 2012年第11期2313-2315,共3页
目的:探索艾灸治疗实验性类风湿性关节炎(RA)大鼠海马中枢的功能机制。方法:将SD大鼠随机分为空白对照组、RA模型组、艾灸组,用弗氏完全佐剂制造实验性RA病理模型,艾灸"肾俞"、"足三里"穴治疗,用免疫组化法测定大... 目的:探索艾灸治疗实验性类风湿性关节炎(RA)大鼠海马中枢的功能机制。方法:将SD大鼠随机分为空白对照组、RA模型组、艾灸组,用弗氏完全佐剂制造实验性RA病理模型,艾灸"肾俞"、"足三里"穴治疗,用免疫组化法测定大鼠海马糖皮质激素受体(GR)表达,用原位杂交法检测海马褪黑激素受体1B(MEL1B)表达。结果:模型组与空白组比较,GR表达有增高趋势(P>0.05),艾灸组显著低于模型组(P<0.01)。模型组与空白组比较,MEL1B光密度值显著增高(P<0.01),艾灸组明显低于模型组(P<0.05)。结论:艾灸对实验性RA海马中枢有良性调整作用,海马GR、MEL1B在艾灸治疗实验性RA大鼠抗炎效应中具有重要作用。 展开更多
关键词 艾灸 类风湿关节炎 海马 糖皮质激素受体 褪黑激素受体1B
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PTSD样大鼠海马MR和GR变化的研究 被引量:15
6
作者 杜喆 韩芳 石玉秀 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2007年第6期695-700,共6页
目的研究PTSD大鼠海马神经元核受体MR(mineralocorticoid receptor,盐皮质激素受体)和GR(glu-cocorticoid receptor糖皮质激素受体)表达的变化。方法采用国际认定的SPS方法刺激大鼠建立PTSD大鼠模型,分别取SPS处理后24h、7d、14d大鼠脑... 目的研究PTSD大鼠海马神经元核受体MR(mineralocorticoid receptor,盐皮质激素受体)和GR(glu-cocorticoid receptor糖皮质激素受体)表达的变化。方法采用国际认定的SPS方法刺激大鼠建立PTSD大鼠模型,分别取SPS处理后24h、7d、14d大鼠脑组织;同时取正常脑组织(非SPS刺激)作为对照,应用免疫组化、Western Blot方法分别进行各组海马神经元GR和MR表达变化的观察及定量检测。结果(1)经SPS处理后,免疫组化和Western Blot结果显示海马神经元MR表达呈现随着24h、7d、14d逐渐下调的趋势;(2)经SPS处理后,免疫组化和Western Blot结果显示海马神经元GR表达于24h时下调,而7d、14d时呈现逐渐回升趋势。结论大鼠经SPS处理后,海马MR表现为持续下调状态;而GR表达为短暂下调,随后回调,揭示PTSD大鼠海马神经元核受体—MR和GR的表达变化可能是引发海马功能降低的重要因素之一。 展开更多
关键词 创伤后应激障碍 单一连续应激 糖皮质激素受体(gr) 盐皮质激素受体(MR) 海马 神经元
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清醒小鼠严重颅脑闭合性撞击伤后外周血TNF-α IL-1β皮质醇和肝脏GR蛋白表达的变化 被引量:5
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作者 屈强 史忠 +2 位作者 粟永萍 杨天德 陆建华 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期97-99,共3页
目的研究小鼠严重闭合性脑创伤后外周血中白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的变化与肝脏糖皮质激素受体(GR)变化的关系。方法利用BIM-III型小型多功能动物撞击机对小鼠清醒致伤,于致伤后30min、2h、8h、24h、48h、72h采... 目的研究小鼠严重闭合性脑创伤后外周血中白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的变化与肝脏糖皮质激素受体(GR)变化的关系。方法利用BIM-III型小型多功能动物撞击机对小鼠清醒致伤,于致伤后30min、2h、8h、24h、48h、72h采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组外周血清中细胞因子的含量,放免法检测皮质醇含量,WesternBlot免疫印迹法检测肝脏GR的蛋白水平的变化。结果致伤后外周血中TNF-α、IL-1β、皮质醇较对照组有明显升高,均具有两个峰值特征;GR在致伤2h后开始出现蛋白水平表达降低,72h仍未完全恢复正常。结论严重颅脑外伤后外周组织存在糖皮质激素抵抗,与TNF-α、IL-1β关系密切。 展开更多
关键词 外伤性脑损伤 白细胞介素 肿瘤坏死因子 糖皮质激素受体
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艾灸调整实验性RA大鼠HPAA功能的GR机制研究 被引量:15
8
作者 周海燕 刘旭光 +6 位作者 黄迪君 罗荣 高骏 杨露晨 魏铮 余小夏 陈婷 《中华中医药学刊》 CAS 2010年第6期1167-1169,共3页
目的:探索艾灸调整实验性类风湿性关节炎(RA)大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPAA)功能的糖皮质激素受体(GR)机制。方法:将SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、艾灸组、艾灸加注射RU28362组,用福氏完全佐剂塑造实验性RA病理模型,以GR激动剂RU... 目的:探索艾灸调整实验性类风湿性关节炎(RA)大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPAA)功能的糖皮质激素受体(GR)机制。方法:将SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、艾灸组、艾灸加注射RU28362组,用福氏完全佐剂塑造实验性RA病理模型,以GR激动剂RU28362腹腔注射作为干预研究手段,艾灸"肾俞"、"足三里"穴治疗,检测大鼠足容积,用ELISA法测定大鼠血浆CRH、ACTH、GC含量。结果:模型组大鼠足肿胀度明显高于空白对照组(P<0.01),艾灸组大鼠足肿胀度明显低于模型组(P<0.01),艾灸加注射RU28362组足肿胀度与模型组比较无显著性差异(P>0.05);与空白组对照组比较,模型组血浆CRH、GC含量显著增高(P<0.01),ACTH含量显著降低(P<0.05);艾灸组血浆CRH、GC含量明显低于模型组(P<0.01),ACTH含量明显高于模型组(P<0.05),但艾灸加注射RU28362组血浆CRH、ACTH、GC含量与模型组比较无显著性差异(P>0.05)。结论:艾灸对实验性RA具有明显的抗炎效应;艾灸对实验性RA大鼠的HPAA功能紊乱有良性调整作用;海马GR在艾灸调整实验性RA大鼠HPAA功能中具有重要作用。 展开更多
关键词 艾灸 类风湿关节炎 促肾上腺皮质激素释放激素 促肾上腺皮质激素 糖皮质激素 糖皮质激素受体
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辽东楤木根皮和人参茎叶总皂苷提取物对过度训练大鼠海马盐皮质类固醇受体MR,糖皮质激素受体GR蛋白表达的影响 被引量:2
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作者 常波 高珊珊 +4 位作者 郭琪 宋洋 周丹丹 房亮 李腾 《广州体育学院学报》 北大核心 2014年第3期94-97,106,共5页
研究目的:为了加快机体的恢复,提高机体对大运动负荷的适应能力,我们从分子生物学和生物化学角度探讨长时间大运动量训练和不同中药提取物对海马的调节,进一步探索加快机体恢复,提高运动能力的调理方式,为科学训练提供理论依据。研究方... 研究目的:为了加快机体的恢复,提高机体对大运动负荷的适应能力,我们从分子生物学和生物化学角度探讨长时间大运动量训练和不同中药提取物对海马的调节,进一步探索加快机体恢复,提高运动能力的调理方式,为科学训练提供理论依据。研究方法:Wistar大鼠77只,随机分为五组:正常对照组(NC组)12只、运动对照组(EC组)17只、运动+人参组(PG组)16只、运动+辽东楤木低剂量组(LA组)16只、运动+辽东楤木高剂量组(HA组)16只,采用6周递增负荷游泳训练模型,最后一次训练结束,随机剔除多余大鼠,使各组样本数均为8只,24h后,取样。采用不同的方法对大鼠脑组织(海马)代谢和调节指标进行测定。研究结果:各组MR无显著差异。与NC组相比较,EC组GR蛋白表达极显著下降,P<0.01。与EC组相比较,PG、LA和HA组GR蛋白表达显著升高(P<0.01;P<0.05;P<0.05)。与PG组相比较,LA和HA组GR蛋白表达明显下降(P<0.05)。研究结论:过度训练可导致海马GR蛋白表达显著降低,提示过度训练导致运动性高皮质酮血症出现与海马中GR蛋白表达下降引起的海马损伤及功能失调,HPA轴负反馈障碍有关。人参和辽东楤木提取物均可提高海马GR蛋白的表达,对于改善海马对HPA轴负反馈的调节,对降低过度训练导致的应激反应(高皮质醇血症),避免免疫抑制的发生具有积极作用,且人参提取物优于高、低剂量的辽东楤木提取物。 展开更多
关键词 过度训练 盐皮质激素受体 糖皮质激素受体 蛋白表达
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在应激低反应期新生大鼠的海马和视交叉上核核受体-MR、GR表达的变化 被引量:1
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作者 韩芳 肖冰 +4 位作者 李慢 刘虹 丁金兰 罗斐斐 石玉秀 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2009年第6期617-622,共6页
目的搞清新生大鼠HPA轴改变在应激低反应时期(stress hyporesponsive period、SHRP))的核受体-MR(盐皮质激素受体)和GR(糖皮质激素受体)在海马和视交叉上核(SCN)的表达变化。从而进一步了解新生大鼠发育时间对MR和GR的影响。方法本研究... 目的搞清新生大鼠HPA轴改变在应激低反应时期(stress hyporesponsive period、SHRP))的核受体-MR(盐皮质激素受体)和GR(糖皮质激素受体)在海马和视交叉上核(SCN)的表达变化。从而进一步了解新生大鼠发育时间对MR和GR的影响。方法本研究应用免疫荧光技术研究了生后4d(PD4)和生后12d(PD12)的新生大鼠海马和SCN的MR、GR的表达。同时采用RIA方法测定了血清中皮质类固醇的浓度水平。结果RIA结果显示在应激低反应期给予刺激,血清皮质类固醇水平没有明显改变。在海马,PD12较PD4,MR-和GR-i mmunoreactivity在CA1区表达增强;在齿状回没有明显变化;在海马门(hilus)减弱。而在海马的CA3区和SCN中,PD4 GR-ir强烈表达,在PD12却下降。同时也发现在hilus细胞出现GR和nestin(巢蛋白)阳性表达的共存,但是却没有发现MR和nestin的共存。结论新生大鼠阶段,发育时间对MR和GR的影响因区域不同影响不同。GR和nestin(巢蛋白)的共存为探讨在新生大鼠阶段GR对神经干细胞的分化有否影响提供了实验资料。本研究也为进一步研究新生大鼠应激低反应状态下海马及SCN与低活性的HPA轴的关系提供了形态学依据。 展开更多
关键词 盐皮质激素受体 糖皮质激素受体 新生大鼠 海马 视交叉上核
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The temporal-spatial expression and functional analysis of three gustatory receptor genes in Solenopsis invicta using sweet and bitter compounds
11
作者 Muhammad Irfan Waris Yanyuan Lei +4 位作者 Guojun Qi Ziying Guan Abdul Rashied Jie Chen Lihua Lyu 《Insect Science》 SCIE CAS CSCD 2024年第2期448-468,共21页
The insect gustatory system participates in identifying potential food sources and avoiding toxic compounds.During this process,gustatory receptors(GRs)recognize feeding stimulant and deterrent compounds.However,the G... The insect gustatory system participates in identifying potential food sources and avoiding toxic compounds.During this process,gustatory receptors(GRs)recognize feeding stimulant and deterrent compounds.However,the GRs involved in recognizing stimulant and deterrent compounds in the red imported fire ant,Solenopsis invicta,remain unknown.Therefore,we conducted a study on the genes SinvGR1,SinvGR32b,and SinvGR28a to investigate the roles of GRs in detecting feeding stimulant and deterrent compounds.In this current study,we found that sucrose and fructose are feeding stimulants and the bitter compound quinine is a feeding deterrent.The fire ant workers showed significant behavior changes to avoid the bitter taste in feeding stimulant compounds.Reverse transcription quantitative real-time polymerase chain reaction results from developmental stages showed that the SinvGR1,SinvGR32b,and SinvGR28a genes were highly expressed in fire ant workers.Tissue-specific expression profiles indicated that SinvGR1,SinvGR32b,and SinvGR28a were specifically expressed in the antennae and foreleg tarsi of workers,whereas SinvGR32b gene transcripts were also highly accumulated in the male antennae.Furthermore,the silencing of SinvGRI or SinvGR32b alone and the co-silencing of both genes disrupted worker stimulation and feeding on sucrose and fructose.The results also showed that SinvGR28a is required for avoiding quinine,as workers with knockdown of the SinvGR28a gene failed to avoid and fed on quinine.This study first identified stimulant and deterrent compounds of fire ant workers and then the GRs involved in the taste recognition of these compounds.This study could provide potential target gustatory genes for the control of the fire ant. 展开更多
关键词 behavioral responses feeding assays gustatory receptors RNA interference Solenopsis invicta temporal-spatial expression
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Ligand dose-dependent activation of signaling pathways through the gustatory receptor NlGr11 linked to feeding efficacy in Nilaparvata lugens 被引量:1
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作者 Wei-Wen Chen Kai Lin +4 位作者 Jun Lv Qin Su Meng-Yi Zhang Kui Kang Wen-Qing Zhang 《Insect Science》 SCIE CAS CSCD 2023年第5期1420-1430,共11页
Insects often face both conditions with sufficient nutrients and conditions of undernutrition in the field.Through gustatory receptors,insects sense nutrients and regulate their physiological functions such as feeding... Insects often face both conditions with sufficient nutrients and conditions of undernutrition in the field.Through gustatory receptors,insects sense nutrients and regulate their physiological functions such as feeding and reproduction.However,it remains unclear whether signaling pathways activated by gustatory receptors depend on the concentration of nutrients and whether the difference in signaling pathways directly affects insects’physiological functions.Herein,we found that a sugar gustatory receptor,NlGr11,from the brown planthopper(BPH),Nilaparvata lugens,activated G protein-coupled signaling and ionotropic pathways when bound to high galactose concentration.BPHs subsequently demonstrated longer feeding times,feeding loads,and higher vitellogenin(NlVg)expression than BPHs exposed to high galactose concentrations,which only activated the ionotropic pathway.For the first time,our findings link plant nutrient conditions,signaling pathways activated by nutrients,and their gustatory receptors,and nutrient dose-dependent feeding efficacy and vitellogenin(Vg)expression in an insect.This will help us to better understand the molecular mechanism for insect feeding strategies on plants at different stages of nutritional conditions. 展开更多
关键词 feeding efficacy GALACTOSE G protein-coupled signaling pathway insect gustatory receptor ionotropic pathway
原文传递
糖皮质激素受体GR真核表达载体的构建与鉴定
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作者 李秀英 徐晓玉 +2 位作者 孙锦帆 陈林 杨国汉 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2007年第9期943-945,共3页
目的:构建糖皮质激素GR的真核表达载体,为探讨GR与中医肾阳虚的关系奠定基础。方法:以GR基因为靶基因,以pBS/U6-Neo质粒为载体,设计构建重组体,根据GR mRNA基因序列,设计有小发夹结构的2对寡核苷酸序列,克隆到空载体pBS/U6-Neo,转化DH5... 目的:构建糖皮质激素GR的真核表达载体,为探讨GR与中医肾阳虚的关系奠定基础。方法:以GR基因为靶基因,以pBS/U6-Neo质粒为载体,设计构建重组体,根据GR mRNA基因序列,设计有小发夹结构的2对寡核苷酸序列,克隆到空载体pBS/U6-Neo,转化DH5a菌株,提取质粒,进行PCR鉴定和测序分析。结果:经PCR鉴定筛出的重组体测序结果与目的序列相同,重组载体构建成功。结论:利用RNA干扰技术可成功构建小干扰RNA重组体,为后续稳定转染及培育转基因小鼠奠定基础。 展开更多
关键词 糖皮质受体gr RNA干扰 pBS/U6-Neo载体
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烟粉虱味觉受体基因BtabGR1和BtabGR2的克隆与表达模式分析
14
作者 渠成 王然 +1 位作者 李峰奇 罗晨 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第13期2552-2561,共10页
【目的】烟粉虱(Bemisia tabaci)为世界性分布的重要农林入侵害虫,寄主植物种类众多,但对不同寄主植物存在嗜性差异,而味觉受体(gustatory receptor,GR)基因在其取食选择等行为中发挥重要作用。本研究通过克隆烟粉虱味觉受体GR1和GR2基... 【目的】烟粉虱(Bemisia tabaci)为世界性分布的重要农林入侵害虫,寄主植物种类众多,但对不同寄主植物存在嗜性差异,而味觉受体(gustatory receptor,GR)基因在其取食选择等行为中发挥重要作用。本研究通过克隆烟粉虱味觉受体GR1和GR2基因,明确其在烟粉虱不同发育期和成虫不同组织中的表达特性,为基因功能的深入研究提供依据。【方法】从烟粉虱MED隐种成虫头部转录组中筛选获得味觉受体基因序列,利用巢式PCR技术克隆获得两个味觉受体基因的完整开放阅读框(open reading frame,ORF)序列,两个基因分别命名为BtabGR1和BtabGR2,运用生物信息学软件对其编码氨基酸序列特征、结构域等信息进行预测,基于邻接法构建BtabGR1、BtabGR2与其他半翅目昆虫味觉受体基因的系统进化树,并利用实时荧光定量PCR方法分析两个基因在烟粉虱不同发育期(卵、1—4龄若虫和雌、雄成虫)和雌、雄成虫不同组织(头、胸、腹、足)中的表达情况。【结果】克隆获得BtabGR1和BtabGR2基因序列(GenBank登录号:OL845904和OL845905),完整开放阅读框为1287和1344 bp,分别编码428和447个氨基酸,预测蛋白分子量为48.54和51.50 kD,理论等电点为8.85和8.74,具有4个和6个跨膜结构域。氨基酸序列比对和系统进化分析结果显示,BtabGR1和BtabGR2与其他半翅目昆虫GR28b和GR43a-like基因亲缘关系较近。发育期表达谱分析表明,BtabGR1和BtabGR2在烟粉虱的不同发育历期均有表达,其中BtabGR1在成虫中表达量高于其他发育期,而BtabGR2在卵中的表达量最高;组织表达谱结果表明,BtabGR1和BtabGR2在烟粉虱雌、雄成虫不同组织中均有表达,且均在成虫头部高表达。【结论】BtabGR1和BtabGR2具有昆虫味觉受体基因的典型特征,二者均在烟粉虱成虫头部高表达,推测两基因在烟粉虱寄主植物适应过程中发挥重要作用,可作为烟粉虱新型防控措施的潜在靶标。 展开更多
关键词 烟粉虱 味觉受体 基因克隆 序列分析 表达谱
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IL-6、TNF-α、GR-α、GR-βmRNA与常见眼眶疾病患者对糖皮质激素敏感性的关系
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作者 赵珂 马建民 +1 位作者 肖飞 刘向祎 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第5期747-753,共7页
目的分析白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)α亚型(GR)及β亚型(GR-β)mRNA与常见眼眶疾病如甲状腺相关性眼病(thyroid-associated op... 目的分析白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)α亚型(GR)及β亚型(GR-β)mRNA与常见眼眶疾病如甲状腺相关性眼病(thyroid-associated ophthalmopathy,TAO)和特发性眼眶炎性假瘤患者(idiopathic orbital inflammatory pseudotumor,IOIP)与糖皮质激素(glucocorticoid,GC)敏感性的关系。方法收集首都医科大学附属北京同仁医院眼肿瘤门诊TAO患者62例及IOIP患者36例,包括糖皮质激素敏感组和抵抗组。收集EDTA-K 2外周抗凝血,将标本一分为二,分为处理组和对照组。处理组加入终浓度为100 nmol/L的地塞米松,对照组加入等体积的二甲基亚砜,室温下处理7 h。实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,q-PCR)法检测患者外周血白细胞GR-α、GR-β、IL-6及TNF-α的mRNA表达量,分析其与患者对GC敏感性的关系。受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评价GR-α/β指标区分患者对GC敏感性的效能。结果TAO敏感组和抵抗组IL-6、TNF-α、GR-α及β的差异无统计学意义(P>0.05);GR-α/β的差异有统计学意义(P<0.05);GR-α/β的ROC曲线下面积(area under the ROC curve,AUC)为0.70(95%CI:0.54~0.87),临界值取1.255,此时灵敏度和特异度分别为85%和53%。IOIP敏感组与抵抗组IL-6、TNF-α及GR-α的差异无统计学意义(P>0.05);GR-β及GR-α/β在两组之间差异有统计学意义(P<0.05);GR-α/β的AUC为0.77(95%CI:0.58~0.95),临界值取1.005,此时灵敏度和特异度分别为90%和72%。结论GR-α/β有望成为预测TAO和IOIP患者对GC敏感性的指标。 展开更多
关键词 糖皮质激素 敏感性 甲状腺相关性眼病 特发性眼眶炎性假瘤 糖皮质激素受体
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二化螟味觉受体基因鉴定、克隆与表达模式分析
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作者 黄玉萱 沈忱 +3 位作者 鞠佳菲 杨磊 罗光华 方继朝 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第13期2504-2517,共14页
【背景】二化螟(Chilo suppressalis)是我国水稻上的重要害虫之一,味觉受体(gustatory receptor,GR)基因在昆虫取食、产卵等过程中发挥重要作用。【目的】基于组学数据鉴定并克隆二化螟GR基因序列,明确其在不同发育阶段和成虫不同组织... 【背景】二化螟(Chilo suppressalis)是我国水稻上的重要害虫之一,味觉受体(gustatory receptor,GR)基因在昆虫取食、产卵等过程中发挥重要作用。【目的】基于组学数据鉴定并克隆二化螟GR基因序列,明确其在不同发育阶段和成虫不同组织中的表达特性,为后续深入研究二化螟GR基因的功能打下基础。【方法】结合二化螟转录组数据和其他昆虫的GR基因序列,通过多重序列比对,鉴定二化螟GR基因。利用RT-PCR方法克隆获得二化螟GR基因的完整开放阅读框(open reading frame,ORF)序列,运用生物信息学分析工具对二化螟GR基因编码的氨基酸序列进行分子生物学特征、结构域等分析;基于最大似然法构建二化螟GR基因蛋白序列与其他昆虫GR基因的系统进化树;利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法分析GR基因在二化螟不同发育阶段(1—6龄幼虫和雌、雄成虫)和成虫不同组织(雌、雄成虫的触角、头、翅、腹、足)中的表达模式。【结果】鉴定并克隆得到5个二化螟GR基因,分别命名为CsupGR1—5,ORF长度为1122—1428 bp,编码氨基酸序列长度为373—475 aa,其中CsupGR2、CsupGR4、CsupGR5具有7个跨膜结构域,CsupGR1、CsupGR3具有8个跨膜结构域。系统进化分析显示,CsupGR1、CsupGR2与黑腹果蝇DmelGR63a及小菜蛾PxylGR7、PxylGR8亲缘关系较近,属于CO_(2)受体家族;CsupGR3与黑腹果蝇DmelGR43a及家蚕BmorGR9、BmorGR10亲缘关系较近,属于果糖/肌醇受体家族;CsupGR4、CsupGR5与黑腹果蝇DmelGR64及家蚕BmorGR5—8亲缘关系较近,属于糖受体家族。发育期表达谱分析表明,二化螟5个GR基因在不同发育时期均有表达,其中CsupGR1、CsupGR4均在雄成虫中高表达,CsupGR2在1龄幼虫和雄成虫中表达量最高,CsupGR3在成虫中高表达,CsupGR5在4龄幼虫中表达量最高;组织表达谱分析表明,5个GR基因在雌、雄成虫的各组织均有表达,其中CsupGR1、CsupGR5在成虫头部表达量高,CsupGR2—4在成虫触角部位高表达。【结论】鉴定克隆的5个二化螟GR基因均具有昆虫味觉受体基因的典型特征,且在成虫触角或头部高表达,推测这5个基因可能与二化螟识别和适应寄主植物有关。 展开更多
关键词 二化螟 味觉受体 基因鉴定 序列分析 表达谱
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奶牛亚临床酮病血液生化指标分析及糖皮质激素影响肝细胞糖异生作用分子机制的研究
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作者 陈灰 李松建 +2 位作者 杜蕊 徐子萱 李薛强 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期959-967,共9页
为探究围产期奶牛亚临床酮病血清中生化指标的变化特征,本研究选取2~4胎次荷斯坦围产期奶牛45头,分别在分娩前7 d、分娩当天晨饲前经尾根静脉采血,以血酮检测值<1.2 mmol/L为健康组,≥1.2 mmol/L为酮病组。采用ELISA试剂盒测定分娩前... 为探究围产期奶牛亚临床酮病血清中生化指标的变化特征,本研究选取2~4胎次荷斯坦围产期奶牛45头,分别在分娩前7 d、分娩当天晨饲前经尾根静脉采血,以血酮检测值<1.2 mmol/L为健康组,≥1.2 mmol/L为酮病组。采用ELISA试剂盒测定分娩前7 d、分娩当天、分娩后7 d、14 d健康组和酮病组奶牛血液中的生化指标。结果显示,酮病组奶牛分娩前7 d和分娩当天血清中皮质醇含量显著高于健康组(P<0.05);并且酮病组奶牛分娩前7 d血清中β-羟丁酸(BHBA)、高密度脂蛋白(HDL-C)含量显著高于健康组(P<0.05);酮病组奶牛分娩前后血清中葡萄糖(Glu)、甘油三脂(TG)、极低密度脂蛋白(VLDL-C)、游离脂肪酸(FFA)含量较健康组虽无显著差异,但均高于健康组。分别以0、1×10^(-7)mmol/L、1×10^(-8)mmol/L、1×10^(-9)mmol/L浓度的糖皮质激素(GC)刺激原代分离培养的犊牛肝细胞,作用0、1 h、3 h、6 h、24 h后采用荧光定量PCR检测肝细胞中糖异生相关受体及其相关酶编码基因的相对转录水平,并以皮尔森相关系数对糖异生相关受体及其相关酶编码基因的转录水平进行相关性分析。q PCR结果显示:高浓度GC促进原代犊牛肝细胞中糖皮质激素受体(GR)NR3CI的转录水平,低浓度GC促进盐皮质激素受体(MR)NR3C2的转录水平。糖异生相关限速酶PC、PEPCK-C、PCK2、11β-HSD1、11β-HSD2编码基因的相对转录水平随GC浓度和其作用时间而变化。皮尔森(Pearson)相关性分析结果显示:PC、PCK2、11β-HSD1基因的相对转录水平与NR3C1极显著相关(P<0.01),PEPCK-C、11β-HSD1、11β-HSD2与NR3C2的相对转录水平显著相关(P<0.05)。上述结果表明酮病奶牛分娩前GC水平升高,而GC可能通过结合其受体GR/MR提高奶牛肝细胞中糖异生关键酶PC、PEPCK-C、PCK2、11β-HSD1和11β-HSD2编码基因m RNA的转录,从而促进糖异生作用。本研究为酮病奶牛体内糖脂代谢相关激素GC的内分泌调节作用及其分子机制和GC的临床应用奠定实验基础。 展开更多
关键词 奶牛酮病 糖皮质激素 糖异生 糖皮质激素受体 盐皮质激素受体
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基于核受体的胆汁淤积治疗药物研究进展
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作者 王安婧 王亚亚 +2 位作者 闫雅婕 苏静 李彩东 《郑州铁路职业技术学院学报》 2023年第1期43-47,共5页
胆汁淤积性肝病是一种在慢性肝病患者中有较高发病率且会加重肝脏损害的疾病,目前美国食品药品监督管理局(FDA)批准的治疗胆汁淤积的唯一药物熊去氧胆酸(UDCA)存在局限性,亟待寻找新的临床用药。核受体几乎参与所有的胆汁酸调节机制,是... 胆汁淤积性肝病是一种在慢性肝病患者中有较高发病率且会加重肝脏损害的疾病,目前美国食品药品监督管理局(FDA)批准的治疗胆汁淤积的唯一药物熊去氧胆酸(UDCA)存在局限性,亟待寻找新的临床用药。核受体几乎参与所有的胆汁酸调节机制,是治疗胆汁淤积的新药研发热点。研究胆汁淤积相关核受体法尼醇X受体(FXR)、过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)和糖皮质激素受体(GR)的作用机制及药物研发进展,可对胆汁淤积治疗提供参考。 展开更多
关键词 核受体 FXR PPAR gr 胆汁淤积
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Identification and expression profiles of gustatory receptor genes in Bactrocera minax larvae(Diptera:Tephritidae):Role of BminGR59f in larval growth 被引量:2
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作者 Guijian Zhang Shuai Cao +4 位作者 Tong Guo Haoran Wang Xuewei Qi Xueming Ren Changying Niu 《Insect Science》 SCIE CAS CSCD 2022年第5期1240-1250,共11页
Insects employ various types of gustatory receptors(GRs)to identify nutrient-rich food and avoid toxic substances.The larval gustatory system is the critical checkpoint for food acceptance or rejection.As a specialist... Insects employ various types of gustatory receptors(GRs)to identify nutrient-rich food and avoid toxic substances.The larval gustatory system is the critical checkpoint for food acceptance or rejection.As a specialist herbivore,the larvae of Bactrocera minax feed only on unripe citrus fruits.However,how larvae use GRs to check and adapt to the secondary metabolites in unripe citrus fruits remains unknown.In this study,we first performed developmental expression profiles showing that most BminGRs genes were highly expressed in 1st and 2nd instar larvae and that tissue-specific expression indicated high expression of most BminGRs genes in the mouthparts of 2nd instar larvae.Furthermore,we found that silencing BminGR59f by RNA interference(RNAi)affected the growth of 2nd instar B.minax larvae.Hesperidin and naringin were screened as ligands of BminGR59f via RNAi and cell calcium imaging,and the combination of these two flavones increased the body weight of larvae.In summary,we identified a novel gustatory perception pattern in B.minax for detecting hesperidin and naringin,which boosted the growth of B.minax larvae.These results shed light on how specialist herbivores detect and adapt to host metbolites in adverse environments depending on larval GRs. 展开更多
关键词 gustatory receptors secondary metabolites specialist herbivores tephritid unripe citrus fruits
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昆虫味觉感受机制研究进展 被引量:10
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作者 汤清波 马英 +1 位作者 黄玲巧 王琛柱 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1433-1444,共12页
很多昆虫具有极其灵敏的味觉感受系统,在其取食选择、交配和产卵等过程中起重要作用。相对于昆虫的嗅觉机制,对昆虫味觉感受机制的研究较少。传统的味觉感受研究主要集中在味觉感器外部形态、味觉电生理和行为学上。近年来随着分子遗传... 很多昆虫具有极其灵敏的味觉感受系统,在其取食选择、交配和产卵等过程中起重要作用。相对于昆虫的嗅觉机制,对昆虫味觉感受机制的研究较少。传统的味觉感受研究主要集中在味觉感器外部形态、味觉电生理和行为学上。近年来随着分子遗传学、生物信息学和神经生物学技术的应用,昆虫味觉的研究不断深入,主要体现在下列两方面:(1)味觉受体方面,通过分子生物信息学等手段获得了多种昆虫的味觉受体,不同种昆虫之间受体数目差异较大,不同受体之间氨基酸的相似性较低。通常,根据味觉受体配体物质的性质可以把味觉受体分为取食抑制素受体和取食刺激素受体两大类。(2)味觉神经元的投射及味觉编码机制方面,多个研究表明昆虫外围味觉神经元在中枢神经系统中的投射部位为咽下神经节和后脑,但是不同性质的受体神经元投射的具体位置有所不同。本文对昆虫味觉感器和神经元的基本特征,味觉受体的进化、表达和功能,味觉神经元在中枢神经系统中的投射,味觉神经元的编码机制及味觉可塑性等进行了综述。 展开更多
关键词 昆虫 味觉 味觉感器 味觉受体 神经元投射 味觉编码
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