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动物源大肠埃希菌gyrA基因突变与氟喹诺酮耐药相关性分析 被引量:2
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作者 姜芹 孙冰清 +1 位作者 顾欣 张文刚 《动物医学进展》 北大核心 2020年第4期63-66,共4页
为了解动物源大肠埃希菌对氟喹诺酮类药物的耐药情况及其与gyrA基因突变的联系,采用微量肉汤稀释法测定200株猪鸡源大肠埃希菌对恩诺沙星和氧氟沙星的最低抑菌浓度(MIC);对大肠埃希菌的gyrA基因片段进行PCR扩增,产物进行变性高效液相色... 为了解动物源大肠埃希菌对氟喹诺酮类药物的耐药情况及其与gyrA基因突变的联系,采用微量肉汤稀释法测定200株猪鸡源大肠埃希菌对恩诺沙星和氧氟沙星的最低抑菌浓度(MIC);对大肠埃希菌的gyrA基因片段进行PCR扩增,产物进行变性高效液相色谱(DHPLC)检测和序列测定。结果表明,200株动物源大肠埃希菌对恩诺沙星和氧氟沙星的耐药率分别为44.5%和41.0%;144株大肠埃希菌gyrA基因产物的DHPLC图谱有异常峰型,即核苷酸突变率为72.0%;测序证实gyrA基因存在5个突变位点,其中2个位点的突变可导致Ser83→Leu和Asp87→Asn/Tyr,突变率分别为54.0%和24.0%,其余3个位点为同义突变点;结合恩诺沙星耐药情况可知,敏感菌株gyrA基因的氨基酸突变率最低(18.5%),其次为中介菌株(56.5%),耐药菌株最高(78.6%),氧氟沙星测试结果与此趋势一致。由此可知动物源大肠埃希菌gyrA基因突变引起的氨基酸替代与氟喹诺酮耐药高度相关。 展开更多
关键词 动物源大肠埃希菌 氟喹诺酮类 变性高效液相色谱 gyra基因突变
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淋球菌耐环丙沙星与螺旋酶A亚基突变的关系
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作者 邵圣文 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期163-164,共2页
目的 研究淋球菌对环丙沙星 (CIP)耐药与螺旋酶A亚基基因 (gyrA)上的喹诺酮耐药决定区 (QRDR)突变的关系。方法 PCR扩增gyrAQRDR区 ,回收扩增片段 ,再用直接基法进行DNA测序以观察是否存在突变。结果  6株CIP耐药淋球菌的gyrAQRDR区... 目的 研究淋球菌对环丙沙星 (CIP)耐药与螺旋酶A亚基基因 (gyrA)上的喹诺酮耐药决定区 (QRDR)突变的关系。方法 PCR扩增gyrAQRDR区 ,回收扩增片段 ,再用直接基法进行DNA测序以观察是否存在突变。结果  6株CIP耐药淋球菌的gyrAQRDR区均未发现突变。结论 淋球菌CIP耐药不是由gyrAQRDR突变引起 ,可能存在其它机制。 展开更多
关键词 淋球菌 环丙沙星耐药 gyra突变
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Detection of Shigella gyrA mutations and correlations between gyrA mutations and quinolones resistance 被引量:1
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作者 CHONG ZHEN WANG XUE PING LI XUE QIN QIAN LI SHaG QIAN 《Journal of Microbiology and Immunology》 2005年第2期101-104,共4页
118 clinical strains of Shigella were serotyped, in which 116 strains were tested to be S. flexneri. The susceptibilities of the S .flexneri strains to quinolones were measured by the disk-diffusion method. It was fou... 118 clinical strains of Shigella were serotyped, in which 116 strains were tested to be S. flexneri. The susceptibilities of the S .flexneri strains to quinolones were measured by the disk-diffusion method. It was found that most S .flexneri strains were susceptible to norfloxacin and ciprofloxacin, but resistant to nalidixic acid. To study the correlation between gyrA mutations and quinolones resistance, a fragment within the gyrA gene was amplified by PCR. The SSCP (Single-Strand Conformation Polymorphism) analysis was applied to detect mutations in PCR products of different strains. The mutations were then confirmed by DNA sequencing. Altogether, two types of mutation were revealed, in which one type was single mutation ( C42-T), and the other was double mutations ( C42-T and A54- G). By statistical analysis, C42-T (encoding Ser83-keu substitution) was shown to have correlation with nalidixic-acid resistance in the clinical strains of Shigella, while A54-G (encoding Asp87-Gly substitution) was shown to have correlations with both norfloxacin resistance and ciprofloxacin resistance. 展开更多
关键词 Shigella Quinolones resistance PCR-SSCP gyra mutations
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聚合酶链反应-单链构象多态性检测淋病奈瑟菌gyrA基因突变的研究 被引量:5
4
作者 邹明祥 夏忠弟 +3 位作者 唐银 刘文恩 陈淑贞 刘海连 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期175-176,共2页
关键词 淋病 淋病奈瑟菌 gyra基因突变 聚合酶链反应-单链构象 多态性 检测 DNA测序技术
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结核分枝杆菌对氧氟沙星的耐受程度与gyrA基因突变的相关性分析 被引量:3
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作者 张健源 刘毅 +8 位作者 李妍 张旭霞 田苗 高铁杰 张治国 任卫聪 车南颖 程君 李传友 《中华临床医师杂志(电子版)》 CAS 2010年第8期84-88,共5页
目的以氧氟沙星为例,探讨阈值的划分对实验室早期检测出耐氧氟沙星结核分枝杆菌的影响。结合DNA序列分析探讨gyrA基因点突变与结核分枝杆菌对氧氟沙星耐受程度的相关性。方法 (1)在含氧氟沙星改良罗氏培养基上检测101株结核分枝杆菌临... 目的以氧氟沙星为例,探讨阈值的划分对实验室早期检测出耐氧氟沙星结核分枝杆菌的影响。结合DNA序列分析探讨gyrA基因点突变与结核分枝杆菌对氧氟沙星耐受程度的相关性。方法 (1)在含氧氟沙星改良罗氏培养基上检测101株结核分枝杆菌临床分离株对氧氟沙星的敏感性。(2)测序以检测耐氧氟沙星结核分枝杆菌gyrA基因点突变的特征。结果 (1)52株耐氧氟沙星5.0μg/ml的临床分离株中,17株能在含氧氟沙星10.0μg/ml的改良罗氏培养基上生长(约占32.69%),49株对氧氟沙星5.0μg/ml敏感的临床分离株中,有2株能在含氧氟沙星2.0μg/ml的改良罗氏培养基上生长(约占4.08%)。(2)基因扩增产物测序发现;耐氧氟沙星结核分枝杆菌gyrA基因点突变主要发生第90、91和94位点上,有10株在不同的gyrA基因位点上发生了碱基缺失或插入的变异,101株被检测的结核分枝杆菌临床分离株中,发生在第95位点的碱基突变率为100%。结论 (1)判定耐药结核分枝杆菌上、下限的阈值对耐药结核菌的早期检出具有重要的作用。(2)发生在耐氧氟沙星结核分枝杆菌gyrA基因上的点突变是多变的,但与结核分枝杆菌对氧氟沙星的耐受程度没有明显的相关性。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 氧氟沙星 广泛耐药结核 gyra基因突变 阈值
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芯片检测幽门螺杆菌左氧氟沙星耐药gyrA基因突变的应用 被引量:2
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作者 施莉 陈燕萍 黄伟 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1100-1102,共3页
幽门螺杆菌(Hp)是慢性活动性胃炎和消化道溃疡的重要致病菌,且与胃癌和胃黏膜相关淋巴样组织(MALT)淋巴瘤等多种消化系统疾病密切相关,目前已被世界卫生组织癌症研究委员会列为一类致癌原[1].Hp的清除与根治,直接关系到上述疾病的转... 幽门螺杆菌(Hp)是慢性活动性胃炎和消化道溃疡的重要致病菌,且与胃癌和胃黏膜相关淋巴样组织(MALT)淋巴瘤等多种消化系统疾病密切相关,目前已被世界卫生组织癌症研究委员会列为一类致癌原[1].Hp的清除与根治,直接关系到上述疾病的转归.随着抗菌药的大量使用,Hp耐药率日渐增高,左氧氟沙星是一类新型治疗Hp的喹诺酮类抗生素,但也出现了不同程度的耐药现象[2-4].Hp对左氧氟沙星耐药与gyrA基因C261A/G、G271A/T和A272G点突变相关.本研究用针对上述点突变的基因芯片检测Hp对左氧氟沙星耐药的gyrA基因突变,并评价其在检测临床标本中Hp左氧氟沙星耐药的应用价值. 展开更多
关键词 gyra基因突变 左氧氟沙星 幽门螺杆菌 芯片检测 耐药率 应用 黏膜相关淋巴样组织 消化系统疾病
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耐氟喹诺酮类药物空肠弯曲菌HRM快速检测方法的建立 被引量:2
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作者 崔明全 吴辰斌 +2 位作者 汪洋 沈建忠 吴聪明 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期441-447,共7页
针对空肠弯曲菌介导氟喹诺酮类耐药决定区gyrA基因C-257-T位点突变,探讨高分辨率熔解曲线技术对其检测的可行性。选择gyrA基因已经被测序的菌株NCTC11168和ZP11作为高分辨率熔解曲线法的标准阴性和阳性菌株,建立评价高分辨率熔解曲线方... 针对空肠弯曲菌介导氟喹诺酮类耐药决定区gyrA基因C-257-T位点突变,探讨高分辨率熔解曲线技术对其检测的可行性。选择gyrA基因已经被测序的菌株NCTC11168和ZP11作为高分辨率熔解曲线法的标准阴性和阳性菌株,建立评价高分辨率熔解曲线方法的阴性和阳性标准。利用该技术对已知氟喹诺酮类耐药表型的55株菌株进行检测,结果45株与耐药表型鉴定结果一致,准确率达到81.81%。高分辨率熔解曲线技术检测耐氟喹诺酮类药物空肠弯曲菌gyrA基因C-257-T位点突变具有简单、快速、无污染等优点,有望成为临床检测筛选高耐氟喹诺酮类药物空肠弯曲菌的优选方法。 展开更多
关键词 空肠弯曲菌 氟喹诺酮类药物 gyra突变 高分辨率熔解曲线
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铜绿假单胞菌耐药性在生物被膜形成过程中的变化 被引量:19
8
作者 谢轶 杨维青 +5 位作者 贾文祥 程曦 曾蔚 杜艳 李学如 张再容 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期314-318,共5页
目的 研究铜绿假单胞菌遗传性耐药(gyrA基因突变和MexAB OprM主动外排)在生物被膜形成过程中对药物抗性的作用。方法 通过PCR技术鉴定gyrA基因突变株和MexAB OprM主动外排株,利用三亲杂交的方法将绿色荧光蛋白(GFP)基因转到铜绿假单... 目的 研究铜绿假单胞菌遗传性耐药(gyrA基因突变和MexAB OprM主动外排)在生物被膜形成过程中对药物抗性的作用。方法 通过PCR技术鉴定gyrA基因突变株和MexAB OprM主动外排株,利用三亲杂交的方法将绿色荧光蛋白(GFP)基因转到铜绿假单胞菌药物敏感株中,测定gyrA基因突变株、MexAB OprM主动外排株以及带有绿色荧光蛋白的铜绿假单胞菌在特氟隆上产生生物被膜耐药的规律。结果 筛选出gyrA基因突变株和MexAB OprM主动外排株。通过三亲杂交成功构建了带有pGFPuv质粒的铜绿假单胞菌。将突变株和敏感株培养在最低杀菌浓度(MBC)的环丙沙星溶液中形成生物被膜使菌株的存活率均在50%以上。结论 比较遗传性耐药和生物被膜耐药的作用表明gyrA基因突变和主动外排在生物被膜耐药形成前期发挥主要作用,当生物被膜完全形成之后,铜绿假单胞菌的耐药性有可能是由生物被膜介导的。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 生物被膜 形成过程 耐药性 gyra基因突变 绿色荧光蛋白 基因突变 主动外排 遗传性耐药 最低杀菌浓度 三亲杂交 膜耐药 药物抗性 技术鉴定 环丙沙星 敏感株 PCR 特氟隆 存活率
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浙江省杭州市结核分枝杆菌氧氟沙星耐药研究
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作者 文艳苹 刘伟 +2 位作者 吴琍敏 王乐 陆敏 《疾病监测》 CAS 2013年第7期579-582,共4页
目的了解杭州市结核分枝杆菌对氧氟沙星的耐药情况及耐药菌株gyrA基因的突变特点。方法收集2010年4月至2012年6月杭州市各结核病定点医院分离培养的临床菌株,进行一线抗结核药物、氧氟沙星和卡那霉素敏感性检测,测定氧氟沙星耐药菌株gyr... 目的了解杭州市结核分枝杆菌对氧氟沙星的耐药情况及耐药菌株gyrA基因的突变特点。方法收集2010年4月至2012年6月杭州市各结核病定点医院分离培养的临床菌株,进行一线抗结核药物、氧氟沙星和卡那霉素敏感性检测,测定氧氟沙星耐药菌株gyrA基因的喹诺酮类药物耐药决定区(QRDR)序列。结果收集的1242株临床菌株中,67株(5.39%)对氧氟沙星耐药,其中32株(47.76%)对氧氟沙星单耐药,23株为耐多药结核病(MDR-TB)菌株,占MDR-TB菌株的22.77%。选取55株耐药株进行gyrA序列分析,其中33株(60%)携带gyrA基因突变位点。突变位点包括第90和94位密码子,突变率分别为27.27%和32.73%。结论杭州市氧氟沙星单耐药患者的比例较高,MDR-TB患者中氧氟沙星耐药情况较严重,需加强结核患者的早期发现和用药管理。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 氧氟沙星 gyra基因突变
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