内皮细胞靶向的可溶性Notch配体hD1R蛋白对脐血造血干/祖细胞增殖和植入的影响

目的 探讨内皮细胞靶向的可溶性Notch配体hD1R蛋白对脐血造血干/祖细胞增殖和植入的影响.方法 诱导、表达及纯化内皮细胞靶向的可溶性hD1R融合蛋白.以人脐静脉内皮细胞（HUVEC）作为支持细胞,联合应用5种人源性生长因子SCF、TPO、FL、IL-6、IL-3及hD1R蛋白,与人脐血CD34＋细胞共培养,分析在PBS组（PBS代替hD1R）、hD1R组、sup组（HUVEC上清代替HUVEC）、fix组（被固定HUVEC代替HUVEC）、Day 0组（未培养的CD34＋细胞）5种不同培养条件下CD34＋细胞增殖、凋亡及细胞周期,并将培养后的细胞经尾静脉移植给亚致死剂量照射的NOD/SCID小鼠,12周后用流式细胞术分析人源性细胞在小鼠体内植入的情况.结果 hD1R组的培养条件对CD34＋细胞有最佳的扩增作用,hD1R组扩增的细胞是Day 0组的87.50倍,是PBS组的7.98倍.hD1R组扩增的细胞约77.0％处于G0/G1期,hD1R明显抑制细胞凋亡,促进细胞增殖.体内移植实验显示hD1R组扩增的细胞在小鼠体内有明显植入优势.结论 成功建立了基于Notch信号的体外扩增体系,hD1R蛋白促进脐血造血干/祖细胞体外增殖及体内植入.