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人FAM92A1基因诱饵表达质粒的构建与鉴定
被引量:
2
1
作者
方娟
李瑞明
+3 位作者
卢智勇
孙晓东
陈洁
阮绪芝
《医学分子生物学杂志》
CAS
CSCD
2011年第3期240-244,共5页
目的 构建人FAM92A1基因(hFAM92A1)的诱饵表达质粒pGBKT7-hFAM92A1并检测其蛋白表达、毒性和自激活作用.方法 PCR扩增hFAM92A1的基因编码序列并克隆入诱饵表达载体pGBKT7中,酶切和测序鉴定后,转化到酵母AHl09细胞中,Western印迹检测...
目的 构建人FAM92A1基因(hFAM92A1)的诱饵表达质粒pGBKT7-hFAM92A1并检测其蛋白表达、毒性和自激活作用.方法 PCR扩增hFAM92A1的基因编码序列并克隆入诱饵表达载体pGBKT7中,酶切和测序鉴定后,转化到酵母AHl09细胞中,Western印迹检测诱饵蛋白表达情况,同时检测诱饵蛋白的毒性和自激活作用.结果 成功构建FAM92A1基因的诱饵表达质粒pGBKT7-hFAM92A1,测序结果正确.Western印迹实验证实酵母细胞高表达诱饵蛋白hFAM92A1,诱饵蛋白没有自激活作用.结论 构建的诱饵表达质粒pGBKT7-hFAM92A1可用于下一步酵母双杂交系统实验,为进一步研究hFAM92A1功能奠定了基础.
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关键词
hfam92a1
诱饵表达质粒
诱饵蛋白
原文传递
题名
人FAM92A1基因诱饵表达质粒的构建与鉴定
被引量:
2
1
作者
方娟
李瑞明
卢智勇
孙晓东
陈洁
阮绪芝
机构
湖北医药学院胚胎干细胞研究湖北省重点实验室
武汉大学基础医学院病理生理学教研室
出处
《医学分子生物学杂志》
CAS
CSCD
2011年第3期240-244,共5页
基金
湖北省自然科学基金(No.2010CDB09102)
文摘
目的 构建人FAM92A1基因(hFAM92A1)的诱饵表达质粒pGBKT7-hFAM92A1并检测其蛋白表达、毒性和自激活作用.方法 PCR扩增hFAM92A1的基因编码序列并克隆入诱饵表达载体pGBKT7中,酶切和测序鉴定后,转化到酵母AHl09细胞中,Western印迹检测诱饵蛋白表达情况,同时检测诱饵蛋白的毒性和自激活作用.结果 成功构建FAM92A1基因的诱饵表达质粒pGBKT7-hFAM92A1,测序结果正确.Western印迹实验证实酵母细胞高表达诱饵蛋白hFAM92A1,诱饵蛋白没有自激活作用.结论 构建的诱饵表达质粒pGBKT7-hFAM92A1可用于下一步酵母双杂交系统实验,为进一步研究hFAM92A1功能奠定了基础.
关键词
hfam92a1
诱饵表达质粒
诱饵蛋白
Keywords
human FAM92A1
bait expression plasmid
bait protein
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人FAM92A1基因诱饵表达质粒的构建与鉴定
方娟
李瑞明
卢智勇
孙晓东
陈洁
阮绪芝
《医学分子生物学杂志》
CAS
CSCD
2011
2
原文传递
已选择
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引用分析
参考文献
引证文献
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