人成纤维细胞生长因子-21分泌型表达及鉴定

利用基因工程手段,将人成纤维细胞生长因子-21(hFGF21)与分泌信号肽相融合,构建得到能够分泌表达FGF21蛋白的表达载体。将该表达载体导入到Rosetta(blue)宿主细胞中,在分泌信号肽的引导下,在细胞周质中表达。经IPTG诱导表达可获得分子量为21 kD的蛋白,Western-Blotting证明该蛋白为FGF21蛋白。经SDS-PAGE证明获得了可溶性的FGF21蛋白。该方法简化了纯化工序,提高了成品率,使大规模生产重组人成纤维细胞生长因子-21(rhFGF21)成为可能。

重组人成纤维细胞生长因子21对胡萝卜遗传转化的研究

人成纤维细胞生长因子21(FGF21)是肝脏合成的一种可分泌多肽,对糖脂代谢的调控具有重要作用。以胡萝卜(Daucus carota L.)七寸人参品种为试验材料,用含重组人成纤维细胞生长因子21(rh FGF21)质粒p1390RⅡ的根癌农杆菌LBA4404对胡萝卜进行了遗传转化实验。PCR扩增和Western blot结果表明外源基因FGF21已成功转入胡萝卜基因组中。此研究为今后用胡萝卜产业化表达生产FGF21提供参考。