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外周血单核细胞hFgl2蛋白表达与不同临床类型肝病的关系 被引量:5
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作者 玉艳红 原彤彤 +3 位作者 黄力毅 吴继周 李国坚 吴健林 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期436-438,443,共4页
目的探讨人纤维介素蛋白-2凝血酶原酶(hFgl2)在慢性乙型肝炎及肝癌患者外周血单核细胞中的表达及其与慢性乙型肝炎病情严重程度之间的关系。方法测定慢性乙型肝炎轻、中、重度,慢性重型乙型肝炎,肝癌患者共78例外周血单核细胞hFgl2蛋白... 目的探讨人纤维介素蛋白-2凝血酶原酶(hFgl2)在慢性乙型肝炎及肝癌患者外周血单核细胞中的表达及其与慢性乙型肝炎病情严重程度之间的关系。方法测定慢性乙型肝炎轻、中、重度,慢性重型乙型肝炎,肝癌患者共78例外周血单核细胞hFgl2蛋白的表达进行比较,并将其与配对患者谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及总胆红素(TBiL)行相关分析。结果hFgl2蛋白可以表达于外周血单核细胞,在慢重肝组和肝癌组表达高于对照组和慢乙肝组,而慢重肝组表达高于肝癌组。慢乙肝重度组hFgl2蛋白的表达与其ALT、AST及TBiL成正相关。结论 hFgl2蛋白可以表达于外周血单核细胞并呈现随着肝病严重程度增加而表达升高的趋势。 展开更多
关键词 hfgl2 慢性乙型肝炎 肝癌 外周血单核细胞
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IFN-γ,IL-2诱导人脐静脉内皮细胞及单核细胞hfgl2表达的研究 被引量:1
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作者 苏凯 陈芳 +1 位作者 罗小平 宁琴 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第16期2410-2414,共5页
目的探讨肿瘤微环境中的一些细胞因子(IFN-γ、IL-2等)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和人单核细胞(THP-1)hfgl2表达的影响。方法分别用免疫组化,RT-PCR方法检测HUVEC和THP-1在静息和细胞因子作用下人纤维介素(hfgl2)蛋白和mRNA水平的表达,... 目的探讨肿瘤微环境中的一些细胞因子(IFN-γ、IL-2等)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和人单核细胞(THP-1)hfgl2表达的影响。方法分别用免疫组化,RT-PCR方法检测HUVEC和THP-1在静息和细胞因子作用下人纤维介素(hfgl2)蛋白和mRNA水平的表达,并对细胞因子刺激前后细胞的促凝功能做了检测。结果IFN-γ、IL-2均可明显增强hfgl2蛋白和mRNA的表达。并且刺激后的细胞出现明显升高的促凝活性(PCA),刺激后细胞的PCA产生于Ⅹ因子的下游,与Ⅱ因子密切相关。结论IFN-γ、IL-2增强hfgl2蛋白和mRNA的表达,hfgl2能直接催化凝血酶原转化为凝血酶,进而通过凝血酶的凝血依赖及非依赖途径促进肿瘤血管新生和转移。 展开更多
关键词 癌症 人纤维介素(hfgl2) 凝血酶 IFN-Γ IL-2
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重型乙型肝炎患者外周血细胞促凝血活性及新型促凝血因子hfgl2的表达 被引量:4
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作者 朱永芬 田德英 +5 位作者 习东 严伟明 宋建新 黄加权 聂华 宁琴 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2006年第3期136-138,T0001,共4页
目的:了解各种临床类型乙型肝炎患者外周血细胞的促凝血活性(PCA)及新型促凝血因子人纤维介素(human fibrinogen like protein 2,hfgl2)的表达情况,及其与疾病进展的关系。方法:病毒性乙型肝炎慢性重型25例,健康对照25例,分离外周血单... 目的:了解各种临床类型乙型肝炎患者外周血细胞的促凝血活性(PCA)及新型促凝血因子人纤维介素(human fibrinogen like protein 2,hfgl2)的表达情况,及其与疾病进展的关系。方法:病毒性乙型肝炎慢性重型25例,健康对照25例,分离外周血单个核细胞(PBMC);病毒性乙型肝炎慢性重度和重型患者标本33例,病毒性乙型肝炎慢性轻度、中度共25例,健康对照25例分离其外周血白细胞(WBC)。用一期冻融法测量其PCA。采用免疫组化的方法检测hfgl2的表达。结果:病毒性乙型肝炎慢性重型患者PBMC的PCA较健康对照高出20倍。WBC的PCA在以下各组(健康对照组、病毒性乙型肝炎慢性轻中度组、病毒性乙型肝炎慢性重度和重型组)呈逐步上升过程,但组间差异无显著性意义。PCA在病毒性乙型肝炎慢性重型组患者PBMC中的表达显著高于其在WBC的表达。PCA在健康对照组PBMC和WBC的表达无显著差异,hfgl2在病毒性乙型肝炎慢性重型患者PBMC中的表达水平显著高于其在健康对照组中的表达。结论:病毒性乙型肝炎慢性重型患者PBMC中的PCA和hfgl2表达均显著升高,且其表达与疾病严重程度相关,hfgl2表达的强度(阳性细胞数)与PCA的升高呈正比相关。 展开更多
关键词 重型肝炎 单个核细胞 白细胞 人纤雏介素 促凝血活性
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hFgl2在不同型别肝病患者中表达的临床意义
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作者 麦强才 罗婷 +3 位作者 颜幸杰 孟南南 陈玉娟 蒙国雁 《成都医学院学报》 CAS 2013年第6期667-669,共3页
目的 研究hFgl2在不同型别肝病患者中的表达,分析hFgl2的表达水平与肝病发展的关系.方法 收集我院2011年1月~2013年6月入住我院的不同型别肝病的患者,把健康受试者45例、慢性乙型肝炎轻度患者50例、慢性乙型肝炎中度患者45例、慢性乙型... 目的 研究hFgl2在不同型别肝病患者中的表达,分析hFgl2的表达水平与肝病发展的关系.方法 收集我院2011年1月~2013年6月入住我院的不同型别肝病的患者,把健康受试者45例、慢性乙型肝炎轻度患者50例、慢性乙型肝炎中度患者45例、慢性乙型肝炎重度患者47例、慢性重型乙型肝炎患者50例及肝癌患者45例分别分为A、B、C、D、E和F组,采用Northern blot分析不同组织中hFgl2的表达强度,表达最强的组织利用Western Blot法测定hFgl2在不同型别肝病患者中的表达,两组间进行比较,观察hFgl2在各组间的表达差异是否具有统计学意义.结果 在选取的8个组织中,hFgl2在外周血中表达水平最强;慢性乙型肝炎中度组、重度组、慢性重型乙型肝炎组及肝癌组中hFgl2的表达高于健康对照组,差异有统计学意义(P〈0.01),慢性乙型肝炎重度组、慢性重型乙型肝炎组及肝癌组的hFgl2表达均高于慢性乙型肝炎中度组,差异有统计学意义(P〈0.05),而慢性乙型肝炎轻度组hFgl2的表达略低于健康对照组,差异无统计学意义(P〉0.05),慢性重型乙型肝炎组hFgl2表达略高于肝癌组,但差异无统计学意义(P〉0.05).结论 hFgl2在不同型别的肝病患者中表达水平不同,并随肝病严重程度的增加表达升高. 展开更多
关键词 hfgl2 慢性乙型肝炎 慢性重型乙型肝炎 肝癌 不同表达
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SARS冠状病毒N蛋白激活hfgl2凝血酶原酶基因的研究 被引量:1
5
作者 姚华宁 王战会 +3 位作者 韩梅芳 侯金林 罗小平 宁琴 《中国病毒学》 CSCD 2006年第4期319-323,共5页
研究鉴定激活hfgl2凝血酶原酶基因的SARS冠状病毒结构蛋白。从SARS尸检肺组织中抽提RNA后制备cDNA,分别扩增SARS-CoV的N、S2和M全长基因序列,再分别克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)上。应用免疫组织化学分析鉴定pcDNA3.1-N、pcDNA3.1-M和... 研究鉴定激活hfgl2凝血酶原酶基因的SARS冠状病毒结构蛋白。从SARS尸检肺组织中抽提RNA后制备cDNA,分别扩增SARS-CoV的N、S2和M全长基因序列,再分别克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)上。应用免疫组织化学分析鉴定pcDNA3.1-N、pcDNA3.1-M和pcDNA3.1-S2的表达。构建人纤维介素(hfgl2)启动子荧光素酶报告基因质粒,并将SARS冠状病毒结构蛋白表达质粒分别与其共转染以明确激活hfgl2基因转录的SARS冠状病毒结构蛋白。将目的片段克隆至pcDNA3.1(+),经酶切鉴定和测序鉴定无误;免疫组织化学染色可见明显的CHO细胞胞浆棕染。与hfgl2启动子共转染实验阐明SARS冠状病毒膜(M)蛋白和刺突糖(S2)蛋白对hfgl2基因的激活与对照组无显著差异,而SARS冠状病毒核心(N)蛋白可激活hfgl2启动子,使其转染活性提高4.6倍。SARS冠状病毒N蛋白可增强hfgl2基因的转录活性。 展开更多
关键词 凝血致活酶 冠状病毒 核蛋白质类 基因表达调控 严重急性呼吸综合征
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Molecular cloning of promoter in human fibrinogenlike protein 2 (hfgl2) gene and functional analysis of its sequence
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作者 MEI FANG RAN YAO YONG ZHOU +3 位作者 DONG XI WEI MING YAN XIAO PING LUO QIN SING 《Journal of Microbiology and Immunology》 2006年第4期258-264,共7页
The aim of this study is to investigate the important regulative elements region which plays an important role on the activation of transcription exerted by the 5' noncoding region of hfgl2 gene in response to HBc... The aim of this study is to investigate the important regulative elements region which plays an important role on the activation of transcription exerted by the 5' noncoding region of hfgl2 gene in response to HBc and HBx. A series of promoter luciferase report plasmids, in which the hfgl2 gene has been deleted of the 5' and retained the common 3', were constructed. All the plasmids constructed were subjected to electrophoretic analysis and DNA sequencing. A eukaryotic construct expressing HBc or HBx, a luciferase reporter construct containing hfgl2 promoter and aβ-galactosidase (β-gal) plasmid were co-transfected into Chinese hamster ovary (CHO) cells and hepG2 cells, respectively. Luciferase report plasmids containing hfgl2 promoter were successfully constructed, and a serial assays of deletion of hfgl2 gene promoter showed that a strong regulatory region from -817 to -467 (relative to the transcription start site) was responsible for transcription and expression regulation of hfgl2 gene. The important regulative elements region in the promoter of hfgl2 gene was in response to HBc and HBx. which contributes to further pursuit of cis-acting elements and transcriptional factors involved in the transcription of hfgl2 gene. 展开更多
关键词 Fulminant hepatitis Fibrinogen-like protein 2 hfgl2)/fibroleukin Gene regulation Luciferase
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纤维介素基因hfgl2启动子的SARS冠状病毒核心蛋白反应元件初步分析
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作者 姚华宁 韩梅芳 +3 位作者 严伟明 习东 罗小平 宁琴 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期130-135,共6页
SARS冠状病毒核心蛋白对hfgl2纤维介素基因有激活作用,采用实时荧光定量PCR和Western印迹已验证了hfgl2基因在mRNA和蛋白水平的表达.为进一步明确在SARS冠状病毒核心蛋白刺激下,hfgl2纤维介素基因5′端非编码区对转录激活起重要作用的... SARS冠状病毒核心蛋白对hfgl2纤维介素基因有激活作用,采用实时荧光定量PCR和Western印迹已验证了hfgl2基因在mRNA和蛋白水平的表达.为进一步明确在SARS冠状病毒核心蛋白刺激下,hfgl2纤维介素基因5′端非编码区对转录激活起重要作用的转录调控序列,构建了一系列hfgl2基因启动子荧光素酶报告基因质粒,将其与SARS冠状病毒核心蛋白真核表达质粒共转染CHO细胞.结果表明,转染前3个质粒hfgl2p(-1334)LUC、hfgl2p(-997)LUC、hfgl2p(-816)LUC的细胞的相对荧光素酶活性无显著改变;但转染hfgl2p(-468)LUC质粒的细胞荧光素酶的活性较前明显降低,说明在hfgl2基因启动子-816位至-468位(相对于转录起始点)之间存在着激活该基因的调控序列.本研究在一定程度上从分子水平揭示了SARS冠状病毒蛋白与宿主纤维介素基因之间的关系. 展开更多
关键词 纤维介素基因 SARS冠状病毒 核心蛋白 基因表达调控
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乙型肝炎病毒蛋白对纤维介素基因的激活作用 被引量:6
8
作者 韩梅芳 习东 +1 位作者 罗小平 宁琴 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期49-54,共6页
纤维介素基因(fgl2)在人和小鼠的重型肝炎的发病机制中发挥重要作用.为探讨乙型肝炎病毒(HBV)编码蛋白对人纤维介素基因(hfgl2)的激活作用,构建了HBV编码蛋白C、S和X的真核表达质粒pcDNA-HBc、pcDNA-HBs和pcDNA-HBx,分别与hfgl2启动子... 纤维介素基因(fgl2)在人和小鼠的重型肝炎的发病机制中发挥重要作用.为探讨乙型肝炎病毒(HBV)编码蛋白对人纤维介素基因(hfgl2)的激活作用,构建了HBV编码蛋白C、S和X的真核表达质粒pcDNA-HBc、pcDNA-HBs和pcDNA-HBx,分别与hfgl2启动子荧光素酶报告基因质粒及β半乳糖苷酶基因质粒(-βGal)共转染到CHO细胞和HepG2细胞,采用免疫组织化学和免疫印记方法(Western blotting)鉴定病毒蛋白的表达.通过检测报告基因荧光素酶(LUC)及β半乳糖苷酶的表达活性,反映病毒蛋白对hfgl2启动子的转录激活作用.结果显示,转染了真核表达质粒的细胞均能瞬时表达相应的肝炎病毒蛋白,在CHO细胞,转染pcDNA-HBc组和pcDNA-HBx组相对荧光素酶的活性是对照组的5.4和6倍,在hepG2细胞,转染pcDNA-HBc组和pcDNA-HBx组相对荧光素酶的活性是对照组的8.7和11倍.研究表明,CHO和HepG2细胞中表达的HBV C蛋白和X蛋白均具有激活hfgl2的功能,而S蛋白则不能激活.进一步揭示了HBV病毒蛋白与宿主基因的相互作用机制. 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 核心(C)蛋白 X蛋白 人纤维介素基因(hfgl2) 基因调控
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纤维介素在硬皮病血管病变中的表达 被引量:2
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作者 陈永乐 周利平 +1 位作者 陈红英 宁琴 《华中医学杂志》 2006年第5期406-407,共2页
目的探讨纤维介素在硬皮病血管病变中的作用。方法运用免疫组织化学方法检测20例硬皮病患者和10例正常人皮肤组织连续切片中的纤维介素和纤维蛋白。结果病变血管的内皮细胞及血管周围巨噬细胞和淋巴细胞内可见多量纤维介素表达,呈胞膜... 目的探讨纤维介素在硬皮病血管病变中的作用。方法运用免疫组织化学方法检测20例硬皮病患者和10例正常人皮肤组织连续切片中的纤维介素和纤维蛋白。结果病变血管的内皮细胞及血管周围巨噬细胞和淋巴细胞内可见多量纤维介素表达,呈胞膜型和浆膜型;在纤维介素阳性区域均发现有不同程度的纤维蛋白沉积,微血栓处出现多量纤维蛋白沉积。结论在硬皮病血管病变机制中,可能存在纤维介素介导的免疫凝血途径的影响。 展开更多
关键词 硬皮病 免疫组化 纤维介素
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重型肝炎相关的人纤维介素基因启动子的克隆及功能分析
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作者 韩梅芳 习东 +2 位作者 严伟明 罗小平 宁琴 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期197-201,共5页
目的明确在病毒蛋白HBc和HBx作用下,hfgl2基因5’端非编码区对转录激活起重要作用的转录调控序列。方法运用基因重组的方法,构建一系列5’端缺失而保留共同3’端的hfgl2基因启动子虫荧光素酶报告质粒,将其分别与病毒蛋白HBc和HBx真... 目的明确在病毒蛋白HBc和HBx作用下,hfgl2基因5’端非编码区对转录激活起重要作用的转录调控序列。方法运用基因重组的方法,构建一系列5’端缺失而保留共同3’端的hfgl2基因启动子虫荧光素酶报告质粒,将其分别与病毒蛋白HBc和HBx真核表达质粒共转染CHO细胞和HepG2细胞,检测各组细胞的相对荧光素酶活性。结果酶切鉴定以及DNA测序等证实一系列hfgl2基因启动子虫荧光素酶报告基因质粒构建成功,系列启动子缺失试验证实:在hfgl2基因启动子-817位至堋位(相对于转录起始点)之间存在着激活该基因的调控序列。结论在HBV病毒蛋白HBc及HBx作用下,hfgl2基因的启动子区存在一个与其转录表达有关的调控序列,探讨了重型肝炎相关的hfgl2基因高度表达的分子机制,为下一步研究相关的顺式作用元件及反式作用因子奠定了基础。 展开更多
关键词 重型肝炎 人纤维介素基因(hfgl2) 基因表达调控 荧光素酶
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