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题名人IL-23R胞外区基因的克隆及蛋白表达研究
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作者
车昌燕
张国华
刘力
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机构
山西医科大学汾阳学院
北京协和医学院基础学院病原生物学系
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出处
《中国病原生物学杂志》
CSCD
2009年第5期340-342,358,共4页
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基金
国家自然科学基金项目(No.30671944)
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文摘
目的克隆人IL-23R(hIL-23R)胞外区基因,并对其在Escherichia coliBL21(DE3)中的表达进行鉴定分析。方法通过PCR获得hIL-23R胞外区基因片段,将其克隆至原核表达质粒pGEX-4T-1中,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-hIL-23R(O)。重组质粒经双酶切鉴定及序列测定后,转化E.coliBL21(DE3),经IPTG诱导蛋白表达,通过SDS-PAGE和Western blot对目的蛋白进行检测分析。结果获得全长为990 bp的hIL-23R胞外区基因,以构建的重组质粒pGEX-4T-1-hIL-23R(O)转化E.coliBL21(DE3)后,SDS-PAGE显示表达蛋白分子质量单位约为64 ku,Westernblot检测该蛋白能被兔抗GST多克隆抗体识别。结论成功构建了hIL-23R胞外区基因的原核表达载体pGEX-4T-1-hIL-23R(O),并在E.coli中表达出重组蛋白,为进一步研究hIL-23R的功能奠定了实验基础。
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关键词
hil-23r
胞外区基因
克隆
蛋白表达
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Keywords
hil-23r
extracellular domain gene
clone
protein expression
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分类号
R392
[医药卫生—免疫学]
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