hMLH1和miR-148a表达与散发性结直肠癌微卫星不稳定性的关系

目的检测散发性结直肠癌(sCRC)组织中人类错配修复基因1(hMLH1)蛋白和miR-148a表达及其与微卫星不稳定性(MSI)的关系。方法收集黄冈市中心医院病理科保存的sCRC组织标本90例及其对应癌旁正常组织。收集患者临床病历资料,采用多重荧光PCR法检测组织DNA微卫星不稳定性,免疫组化染色法检测组织hMLH1蛋白表达,实时荧光定量PCR(qPCR)检测组织miR-148a表达量,双荧光素酶报告实验分析miR-148a和hMLH1 mRNA靶向关系。结果90例sCRC组织中,检出MSI 29例(32.22%),hMLH1蛋白表达缺失24例(26.67%)。经荧光素酶报告基因分析,miR-148a mimics可抑制含有hMLH1 mRNA 3′UTR-WT序列的报告基因质粒的荧光素酶活性;而且hMLH1蛋白表达缺失组织中miR-148a相对表达量高于未缺失组织(P<0.05);此外MSI组织中hMLH1蛋白表达缺失率和miR-148a相对表达量均高于微卫星稳定性(MSS)组织。右半结肠和直肠部位、pN_(0/1)期、pM _(0)分期hMLH1蛋白表达缺失率和MSI比例高于左半结肠、pN_(2)期、pM_(0)期(P<0.05);另外肿瘤直径>5.0 cm、右半结肠和直肠、pT_( 3/4)期、pN_(2)期、pM_(1)分组织miR-148a相对表达量低于肿瘤直径≤5.0 cm、左半结肠、pT_(1/2)期、pN_(0/1)期、pM_(0)期组织(P<0.05)。结论约30%的sCRC患者存在hMLH1蛋白表达缺失和MSI状态;sCRC肿瘤组织miR-148a相对表达量降低,导致对hMLH1基因表达的抑制作用减弱,可能是影响sCRC肿瘤细胞MSI状态的重要原因之一。

大肠癌发生中突变型P53与hMLH1表达的关系

[目的]探讨在大肠癌发生过程中错配修复基因hMLH1对p53基因突变的影响。[方法]采用免疫组化SP法检测37例正常大肠黏膜、32例大肠腺瘤与165例大肠癌中P53及hMLH1蛋白的表达。[结果]①正常大肠黏膜组、大肠腺瘤组与大肠癌组P53蛋白的阳性表达率分别为0%、21.9%与48.5%,三组间差异有显著性意义(P<0.05);hMLH1蛋白的阳性表达率分别为100%、87.5%与87.3%,其中正常大肠黏膜组与大肠癌组的差异有显著性意义(P<0.05)。②高中分化、低分化与黏液腺癌组中P53蛋白的阳性表达率分别为53.5%、17.6%与16.7%,其中前者与后两者的差异有显著性意义(P<0.05);hMLH1蛋白的阳性表达率分别为90.8%、70.6%与50.0%,前者明显高于后两者(P<0.05)。③在大肠腺瘤轻中度不典型增生和重度不典型增生组中P53蛋白的阳性表达率分别为18.5%与40.0%(P>0.05);hMLH1蛋白的阳性表达率分别为92.6%与60.0%(P<0.05)。④大肠腺瘤中随hMLH1蛋白的表达减少P53蛋白表达增多,但无明显相关性(P>0.05);大肠癌中两者的表达呈明显负相关(P<0.05)。[结论]大肠癌发生过程中hMLH1基因的功能异常可能是p53基因突变的原因之一。

hMLH1 hMSH2蛋白缺失与直肠癌临床病理特征预后的相关性研究

目的：探讨hMLH 1、hMSH2 蛋白缺失与Ⅱ、Ⅲ期直肠癌患者临床病理特征及预后的相关性。方法：选取91例行直肠癌根治术且病理诊断明确的患者，采用免疫组织化学法检测患者hMLH 1、hMSH2 蛋白表达情况，采用χ2检验分析hMLH 1、hMSH2蛋白表达缺失与直肠癌临床病理特征之间的关系；采用Kaplan-Meier 生存曲线、Log-Rank检验、Cox 风险回归模型分析不同因素与预后的关系。结果：hMLH 1 蛋白表达缺失率为30.77% ，hMSH2 蛋白表达缺失率为19.78% ；hMLH 1 和（或）hMSH2 蛋白缺失的患者与hMLH 1、hMSH2 蛋白表达无缺失的患者相比，在性别、年龄、病理类型、浸润深度、淋巴结转移、TNM分期6 个方面临床病理特征差异无统计学意义（P 均〉0.05）；单因素及多因素分析显示hMLH 1 和（或）hMSH2 蛋白情况及淋巴结转移数目为直肠癌患者预后的影响因素（P=0.010，P=0.032），且为独立影响因素（P=0.026，P=0.035）；hMLH 1 和（或）hMSH2 蛋白缺失的患者2 年无病生存率较hMLH 1、hMSH2 蛋白无缺失的患者明显提高（P=0.036）。 结论：hMLH 1、hMSH2 蛋白缺失的直肠癌患者与hMLH 1、hMSH2 蛋白无缺失的患者具备相似的临床病理特征，但hMLH 1、hMSH2 蛋白缺失的患者预后较好。

散发性子宫内膜癌组织中错配修复基因hMLH1表达与微卫星不稳定性的相关性分析

目的:分析散发性子宫内膜癌组织中微卫星不稳定性(microsatellites instability,MSI)与错配修复基因hMLH1表达之间是否存在相关性。方法:应用免疫组化SP法检测40例子宫内膜癌、22例子宫内膜不典型增生、23例正常子宫内膜组织中错配修复基因hMLH1的表达;应用PCR方法检测子宫内膜癌中5个微卫星位点(D2S123、D10S197、D13S175、D10S215和D10S541)的微卫星不稳定性。结果:错配修复基因hMLH1在正常子宫内膜、子宫内膜不典型增生、子宫内膜癌组织中的表达逐渐下降,差异有统计学意义,χ2=33.34,P=0.00;错配修复基因hMLH1蛋白的表达与内膜癌组织分化程度有关,χ2=7.98,P=0.02;hMLH1蛋白在内膜癌G1和G2期表达均为阳性;子宫内膜癌中微卫星不稳定性的发生与错配修复基因hMLH1的失表达密切相关,Pearson相关系数r=1,P=0.00。MSI在内膜癌组织中发生率显著高于正常子宫内膜,χ2=5.26,P=0.02。结论:MSI是子宫内膜癌发生过程中重要的分子水平改变。hMLH1蛋白的表达有望成为筛查子宫内膜不典型增生向内膜癌发展的高危人群的一种手段,同时也可能成为判断内膜癌患者预后的指标。

胃癌中幽门螺杆菌对hMSH2和hMLH1基因表达的影响

目的:探讨胃癌中幽门螺杆菌﹙Helicobacter pylori,Hpylori﹚对hMSH2和hMLH1基因表达的影响。方法:利用尿素酶快速检验法确定胃癌组织及同病例癌旁粘膜、胃镜非癌患者胃粘膜组织有无Hpylori感染;应用免疫组织化学方法检测所有标本的hMSH2、hMLH1蛋白的表达。结果:胃癌组的hMSH2蛋白阳性表达率显著高于癌旁组和非癌组(P<0.05);而后两者无显著差别(P>0.05)。胃癌组、癌旁组和非癌组的hMLH1蛋白阳性表达率无显著差别(P>0.05)。胃癌组织中,Hpylori感染组的hMSH2蛋白阳性表达率和hMLH1蛋白阳性表达率均显著低于非感染组(P<0.05);癌旁组织中,Hpylori感染组的hMSH2蛋白阳性表达率和hMLH1蛋白阳性表达率均显著低于非感染组(P<0.05);非癌患者胃粘膜中,Hpylori感染组与非感染组的hMSH2蛋白阳性表达率及hMLH1蛋白阳性表达率均无显著差别(P>0.05)。结论:胃粘膜hMSH2蛋白表达上调并hMLH1蛋白表达下调可能是胃癌发生的标志;Hpylori感染导致的胃粘膜细胞hMSH2和hMLH1蛋白表达降低,可能是促进胃癌发生的一个因素。

错配修复基因hMLH1在胃癌中表达特点的研究

[目的]了解胃癌组织错配修复基因hMLH1蛋白的表达特点。[方法]采用免疫组织化学SP法检测579例胃癌组织、333例癌旁组织和341例非癌患者胃黏膜的hMLH1蛋白表达情况。组间率的差异采用卡方检验法进行比较。[结果]胃癌组、癌旁组与非癌患者胃黏膜组的hMLH1蛋白阳性表达率分别为71.68%(415/579)、84.38%(281/333)与85.92%(293/341),前者显著低于后两者(P<0.05),而后两者间差异无显著性意义(P>0.05)。胃癌组织中,hMLH1蛋白的阳性表达率在高中分化组显著高于低分化组(P<0.05),在无淋巴结转移组显著高于淋巴结转移组(P<0.05),hMLH1蛋白的阳性表达率与患者性别、年龄无关(P>0.05)。[结论]我国部分胃癌发生可能与错配修复基因hMLH1的表达下调有关。

可疑的遗传性非息肉病性大肠癌hMLH1和hMSH2蛋白表达

目的：分析可疑的遗传性非息肉病性结直肠癌（HNPCC）中错配修复蛋白（MMR）hMLH1和hMSH2的表达情况。方法：运用免疫组织化学染色方法检测193例可疑HNPCC中hMLH1／hMSH2蛋白。表达缺失的病例为高度可疑HNPCC。结果：193例可疑HNPCChMLH1／hMSH2表达缺失率为29．02％：不同年龄段依次为：≤30岁为40．00％，31～40岁为28．05％，41。50岁为28．71％：其中3例hMLH1和hMSH2同时表达缺失；在右半结肠、左半结肠和直肠表达缺失率分别为40．74％、32．65％和18．89％；有家族史的病例表达缺失率为46．15％。结论：MMR蛋白表达缺失与年龄、发病部位及家族史密切相关，并且以hMLH1表达缺失为主，MMR蛋白表达缺失是诱发青年大肠癌发生的重要因素；hMLH1／hMSH2蛋白同时表达缺失。说明二者可能协同作用HNPCC的发生。

唾液腺多形性腺瘤及癌在多形性腺瘤中hMSH2、hMLH1蛋白的表达和意义

探讨错配修复基因hMSH2、hMLH1蛋白在唾液腺多形性腺瘤及癌在多形性腺瘤中的表达及意义。免疫组织化学SP法检测涎腺多形性腺瘤27例及癌在多形性腺瘤中蜡块标本22例,共49例标本hMSH2、hMLH1蛋白的表达情况。涎腺多形性腺瘤瘤旁正常组织、涎腺多形性腺瘤和癌在多形性腺瘤组织中hMSH2、hMLH1蛋白表达的阳性率分别为28.57%和42.86%、96.3%和85.19%及90.91%和86.36%。hMSH2及hMLH1在涎腺多形性腺瘤和癌在多形性腺瘤组织中均表达上调。

大肠癌hMLH1蛋白表达与5-氟尿嘧啶敏感性的关系

目的:探讨大肠癌hMLH1蛋白表达与5-氟尿嘧啶(5-Fu)敏感性的关系。方法:应用流式细胞术测定大肠癌hMLH1蛋白表达,用体外肿瘤药物敏感实验(MTT法)检测大肠癌细胞对5-Fu敏感性,并分析hMLH1蛋白表达与大肠癌细胞对5-Fu敏感性的关系。结果:大肠癌hMLH1蛋白阳性和阴性之间5-Fu敏感性存在显著性差异(χ2=5.97,P<0.05)。结论:临床标本中hMLH1蛋白表达缺失与大肠癌细胞对5-Fu耐药密切相关。

Ⅲ期鼻咽癌组织中hMLH1与p53的表达变化及意义

目的探讨Ⅲ期鼻咽低分化鳞癌中错配修复基因家族成员hMLH1和p53的表达及其与肿瘤临床病理特征的关系。方法应用免疫组化EnVison法检测58例Ⅲ期鼻咽低分化鳞癌标本。结果58例鳞癌组织中,hMLH1阳性率为79.3%,有颅底侵犯者为71.8%,显著低于无颅底侵犯者的94.7%(P<0.05)。hMLH1表达与患者年龄、性别和5a生存期无关。p53阳性率为65.5%,有颅底侵犯者为74.5%,显著高于无颅底侵犯者的47.4% (P<0.05)。p53表达在生存期≥5a者为31.6%,显著低于生存期<5a者的82.1%,P<0.05。结论Ⅲ期鼻咽低分化鳞癌中有颅底侵袭的患者更易出现hMLH1阴性表达和p53的阳性表达。p53阳性表达率随患者生存期的延长而降低。Ⅲ期鼻咽低分化鳞癌中hMLH1与p53的表达,可以作为判断鼻咽癌生物学行为和预后的指标。

ARID1a和错配修复蛋白HMLH1在子宫内膜样腺癌中的表达及意义

目的探讨ARID1a和HMLH1在子宫内膜样腺癌中的表达及意义。方法选取子宫内膜癌患者94例,收集癌灶组织与癌旁组织(包括正常子宫内膜及子宫内膜非典型增生)。采用免疫组化学法测定不同病灶组织中ARID1a与HMLH1蛋白阳性率,分析与临床病理特征的关系。结果子宫内膜癌病灶组织中ARID1a、HMLH1蛋白阳性率低于子宫内膜非典型增生(P<0.05);癌旁组织中正常组织与子宫内膜非典型增生ARID1a、HMLH1蛋白阳性率差异无统计学意义(P>0.05);子宫内膜癌组织中ARID1a、HMLH1蛋白表达与分化类型、肿瘤分期具有统计学意义(P<0.05);与年龄、肿瘤部位、肿瘤直径及肌层浸润深度无统计学意义(P>0.05)。结论ARID1a及HMLH1蛋白均可以在子宫内膜癌中缺失表达,检测两个蛋白表达对诊断早期子宫内膜样腺癌有一定的辅助诊断意义。

DNA错配修复与原发性肝癌易感性Meta分析

目的原发性肝癌是一种由遗传因素和环境因素共同作用而引起的多阶段、多因素复杂性疾病,是消化系统常见的恶性肿瘤之一。错配修复是遗传物质得以稳定遗传的保障,是DNA损伤修复的重要修复机制。本研究应用Meta分析的方法探讨错配修复蛋白与原发性肝癌易感性的关系。方法采用主题词和关键词"错配修复""错配修复蛋白""蛋白表达""免疫组化"和"肝癌",检索2018年以前在Pubmed、Ovid、EBSCO、Cochrane library、Science Direct、中国生物医学文献数据库、CNKI、万方数据库和维普数据库中发表的有关文献,收集关于DNA错配修复蛋白hMLH1表达异常与原发性肝癌易感性关系的病例对照研究,应用Review Manager 5.3和Stata 12.0进行数据合并分析。结果共纳入5篇相关文献,共计238例肝癌患者。文献经NOS量表评分均≥6,质量较高。异质性检验Q=9.02,P=0.06,I2=56%,存在异质性。采用随机效应模型,合并后OR=2.55(95%CI=1.09~5.97),Z=2.15,P=0.03。进一步以种族为亚组因素进行亚组分析显示,亚洲人群组无异质性,固定效应模型结果显示,OR=3.45(95%CI=1.89~6.28),Z=4.03,P<0.05。敏感性分析显示,合并后结果比较稳定。发表偏倚的Begg’s检验,Z=0.98,P=0.327;Egger’s检验,斜率为0.06,P=0.958,结果均显示不存在发表偏倚。结论 DNA错配修复hMLH1蛋白异常表达为原发性肝癌易感性的危险因素。