人Man2c1转基因小鼠模型的建立

目的为在体内研究MAN2C1的生物学意义而建立转hMan2c1基因的小鼠。方法构建pIRES2-EGFP-hMan2c1重组表达载体,经体外转染实验鉴定转染的基因能在COS-7细胞表达后,注射入ICR小鼠受精卵,以制备转基因小鼠。用基因组PCR鉴定目的基因在宿主基因组DNA的整合。用RT-PCR和Western blot分析hMan2c1在转基因小鼠的表达。结果在116只原代小鼠中,有7只hMan2cl基因组PCR阳性。在所检测的20只F1代小鼠中,有9只hMan2c1基因组PCR阳性。在所检测的21只F2代小鼠中,有16只基因组PCR阳性。用鼠尾组织RT-PCR和Western blot检测hMan2c1基因表达,确定基因组PCR阳性的7个系中有4个系阳性。结论建立了4个稳定表达hMan2c1的转基因小鼠系,为深入研究MAN2C1的生物学意义打下了基础。