hTERT核心启动子调控的hNIS重组腺病毒的构建与鉴定

目的:构建含人端粒酶逆转录酶(hTERT)核心启动子调控的人钠碘转运体(hNIS)基因重组腺病毒,并初步鉴定。方法:将hTERT核心启动子从hTERT/pcDNA3.1(+)质粒中切出,亚克隆至含全长hNIS cDNA序列的质粒载体FL*-hNIS/pcDNA3,应用限制性内切酶将hTERT-hNIS片段切出后连入穿梭质粒载体pAdTrack,应用AdEasy系统构建出重组腺病毒Ad-hTERT-hNIS。同时,构建CMV启动子调控的hNIS重组腺病毒Ad-CMV-hNIS作为阳性对照。应用RT-PCR方法验证hTERT在转染肿瘤细胞中的转录活性。结果:成功构建重组腺病毒Ad-hTERT-hNIS、Ad-CMV-hNIS并经PCR验证正确。RT-PCR证实hNIScDNA能从Ad-hTERT-hNIS转染的细胞中扩增出来。结论:成功构建重组腺病毒Ad-hTERT-hNIS;hTERT核心启动子在转染的肺癌A549细胞中具有转录活性。为下一步的碘治疗实验提供了实验依据。

hNIS基因转导黑色素瘤细胞介导^(125)I摄取的实验研究

目的 探讨克隆的人钠 碘同向转运体 (hNIS)基因cDNA的生物学性能及其用于黑色素瘤放射治疗的可能性。方法 用反转录 聚合酶链反应 (RT PCR)从人甲状腺组织总RNA中扩增出hNIS基因cDNA序列 ,将其克隆至pUCm T载体并亚克隆至真核载体pcDNA3中 ,电击法将重组质粒导入黑色素瘤细胞 (B16 )建立新细胞系 (B16 A) ,在体外培养条件下研究其对放射性碘的摄取及外流情况。结果 成功克隆了hNIS基因 ,建立了能稳定表达hNIS基因的新型细胞系B16 A和单转空质粒pcDNA3的细胞系B16 B。B16 A细胞的摄碘能力较B16细胞高 17倍 ,较单转空质粒pcDNA3细胞系B16 B高 19倍。碘的外流过程十分迅速 ,有效半衰期 (T1 2 )仅 10min。结论 体外培养条件下 ,hNIS基因转导黑色素瘤细胞其本身足以介导碘的摄取 ,但有效半衰期较短 ,有待进一步研究如何增加放射性碘的摄取量及延长其细胞内滞留时间 ,从而提高放射生物学效应。

hNIS基因转导黑色素瘤细胞介导放射性碘摄取的实验研究

目的 获取人钠 /碘同向转运体 (hNIS)基因cDNA ,研究其转导黑色素瘤细胞在体外和体内能否介导放射性碘摄取 ,从而探索该策略用于黑色素瘤放射性碘治疗的可能性。方法 运用逆转录聚合酶链反应从人甲状腺组织总RNA中扩增出hNIS基因cDNA ,将其克隆至真核载体pc DNA3 中 ,电转化法分别将重组质粒pc DNA3 hNIS及空质粒pc DNA3 转导黑色素瘤细胞 (B16 ) ,分别建立了细胞系B16 A和B16 B。在体外培养条件下检测其对放射性碘的摄取及外流情况 ,继而将三种细胞系接种C5 7小鼠行13 1I显像和肿瘤摄取12 5I动态定量测定。结果 成功克隆到hNIS基因 ,并建立了能稳定表达hNIS的新型细胞系B16 A。B16 A细胞的摄碘能力较B16细胞高 17倍 ,较B16 B细胞高 19倍。碘的外流过程迅速 ,T1/ 2eff仅 10min。体内实验发现B16 A细胞所形成肿瘤能摄取放射性碘 ,腹腔注射12 5I后 1、2、4、12、2 4h肿瘤组织的 %ID/ g平均为 12 .2 2、10 .91、8.73、1.2 4、0 .19,12 5I在肿瘤组织内的生物半衰期约为 6h。B16 A细胞系所成肿瘤摄碘量与对照组相比较 ,P <0 .0 1,差别具有高度统计意义。结论 hNIS基因转导黑色素瘤细胞足以介导放射性碘摄取 ,但有效半衰期较短 ,难以产生足够的治疗剂量 ,有必要进一步研究如何增加放射性碘的摄取?

hNIS基因转导黑色素瘤细胞介导放射性碘(^(125)I,^(131)I)摄取的体内实验

采用电转化法分别将含hNIS基因的重组质粒pc-DNA3-hNIS及空质粒pc-DNA3转导黑色素瘤细胞(B16),分别建立了细胞系B16-A和B16-B。将三种细胞系(B16-A、B16-B和B16)分别接种于C57小鼠右侧腹部皮下,当肿瘤生长至直径约10mm时进行131I全身显像;于注射125I后不同时相解剖肿瘤并测量其对125I的摄取量。结果显示:B16-A细胞系所成肿瘤见明显的放射性碘摄取,腹腔注射125I后1、2、4、12、24h每克肿瘤组织摄取125I放射性摄取百分数分别为12.22±0.71、10.91±0.72、8.73±0.99、1.24±0.29和0.19±0.03%ID/g。125I在B16-A肿瘤组织内的生物半衰期约为6h。对照组B16和B16-B细胞系所成肿瘤未见放射性碘摄取,两者相比,无统计学差异(P>0.05),将二组合并成一组作为对照,B16-A细胞系所成肿瘤摄碘量与之相比有显著差异,P<0.01。说明hNIS基因转导黑色素瘤细胞在体内足以介导放射性碘的摄取,但由于碘在肿瘤内的滞留时间较短,难以产生足够的治疗剂量。

hNIS和hTPO-1基因的同时克隆及测序

目的同时克隆人钠/碘同转运体(hNIS)和甲状腺过氧化物酶(hTPO-1)基因,为下一步共同转染肿瘤细胞介导放射性碘的摄取与有机化,延长放射性碘的停留时间,为治疗未分化甲状腺癌和非甲状腺癌提供更为有效的方法。方法运用反转录聚合酶链反应(RT-PCR),从人甲状腺组织总RNA中,同时全长扩增出hNIS和hTPO-1基因cDNA序列,并将它们分别克隆到pUCm-T载体上。结果与结论hNIS和hTPO-1基因cDNA,可同时成功克隆和测序。

挤压态HNi55-7-4-2镍黄铜合金的热变形行为和加工图

首先,以挤压态HNi55-7-4-2镍黄铜合金为对象,应用热模拟机Gleeble-3500对其进行等温热压缩实验,研究该合金在600~800℃和0.01~10 s^(-1)条件下的热变形行为。其次,基于动态材料模型和极性交互模型,分别建立HNi55-7-4-2镍黄铜合金的Prasad、Murty和PRM加工图,并结合不同变形条件下的微观组织演变,对比3种加工图的预测效果。结果表明:Murty加工图预测效果最差,而Prasad加工图和PRM加工图预测效果较好。HNi55-7-4-2镍黄铜合金的最优热变形加工参数范围为:变形温度为600~725℃,应变速率为0.01~0.07 s^(-1)和变形温度为740~800℃,应变速率为0.05~1 s^(-1)。失稳区的变形机制为局部塑性流动和混晶组织,安全区的变形机制为动态再结晶。

hNIS基因突变与碘转运障碍及先天性甲状腺功能减退

人钠/碘同向转运体(hNIS)基因位于第19号染色体上,已发现9种hNIS基因突变类型,以错义突变最多。这些突变经体外实验证实均可使hNIS失去活性,导致碘转运障碍和(或)先天性甲状腺功能减退。其确切机制尚未阐明,可能与突变后hNIS蛋白不能被表达;不能准确表达于甲状腺滤泡细胞膜;或蛋白构型改变使其不具备完整的功能等有关。

嗜硫小红卵菌HNI-1菌剂对水稻白叶枯病和细菌性条斑病的防效

为明确嗜硫小红卵菌HNI-1菌剂对水稻细菌性病害的防治效果,试验以感病品种玉针香为供试水稻品种,通过田间小区试验研究了该菌剂对水稻白叶枯病和细菌性条斑病的防治效果,结果表明:2.0亿CFU/m L嗜硫小红卵菌HNI-1悬浮剂100、200、300 mL/667m~2处理对水稻白叶枯病的防效在末次药后14 d为56.76%~69.48%,其中300 mL/667m~2处理的防效高于对照药剂20%噻菌铜悬浮剂100 mL/667m~2处理,但差异不显著;3种浓度药剂对水稻细菌性条斑病的防效在末次药后14 d为62.49%~72.98%,且300 mL/667m~2处理的防效显著高于对照药剂处理。这表明嗜硫小红卵菌HNI-1菌剂具有防控水稻细菌性病害的应用潜力。

HNi55-7-4-2合金高温本构模型构建及应用

HNi55-7-4-2合金是一种新型复杂耐磨黄铜合金,为建立该材料基于有限元FORGE平台的本构模型,用Gleeble-3500热模拟试验机对其在变形温度为600~800℃、应变速率为0.01~10 s^-1的范围内进行等温热压缩试验。基于Hansel-Spittel模型建立该合金的本构模型,引入统计学方法及数值模拟对模型精度量化评估。结果表明:所建立模型的平均相对误差绝对值和均方根误差分别为5.6791%和2.6456 MPa,相关系数为0.9912,数值模拟得到的力-位移曲线与试验数据吻合,本构模型预测精度较高。将该模型应用于某齿环热精锻成形数值模拟,模拟结果与实际生产结果吻合。

同步器齿环用HNi55-7-4-2合金高温本构模型构建及应用

采用Gleeble-3500热模拟试验机在873~1023 K的变形温度、0.01~10 s^-1的应变速率下对HNi55-7-4-2镍黄铜合金进行等温热压缩实验,获得了该合金的真实应力-应变曲线,分析热压缩过程中摩擦和温升效应对其流变应力的影响,修正了流变应力曲线。基于修正的应力-应变数据,分别采用考虑应变补偿的修正Arrhenius(M-Arrhenius)模型和修正Zerilli-Armstrong(M-ZA)模型构建了合金的本构模型,对比分析了两种模型的拟合精度。结果表明:M-ZA模型的相关系数和平均绝对误差分别为0.997和4.21%,其预测精度优于M-Arrhenius本构模型(0.991,6.68%)。将该模型应用于某齿环热精锻成形进行数值模拟,模拟结果与实际生产结果吻合,为HNi55-7-4-2镍黄铜合金高温塑性成形数值模拟提供了准确的材料模型。

SNOW系统高速网络接口板HNI的设计与实现

HNI是为并行机群系统 SNOW研制的高性能网络接口板 ,它可以高效地支持 SNOW系统网络 Homer互联协议和 DSM协议 .HNI采用协议处理器和专门设计的协议硬件加速部件 ,实现了多用户访问模式 ,具有很强的协议处理能力 .首先给出了 HNI的结构方案 ;介绍了它的逻辑实现 ;然后对 HNI进行了测试并对测试结果进行了分析 .

基于修正Arrhenius模型和SVR-PSO模型的HNi55-7-4-2合金高温本构模型的对比

采用Gleeble-3500热模拟试验机对HNi55-7-4-2合金进行热压缩实验,研究其高温流变应力行为。通过等温热压缩实验和摩擦修正获得了HNi55-7-4-2合金在温度为600~800℃、应变速率为0.01~10 s^-1时的应力-应变曲线。结果表明:HNi55-7-4-2合金的流变应力值与温度、应变速率和变形量之间成非线性关系,流变应力值随着应变率增大而升高,随着变形温度的升高而降低。基于实验数据,分别建立修正Arrhenius本构模型和粒子群算法优化的支持向量机回归模型(SVR-PSO),引入统计学方法对模型的精度进行量化评估:修正Arrhenius模型的平均相对误差和均方根误差分别为6.30%和2.43 MPa,SVR-PSO模型的平均相对误差和均方根误差分别为0.61%和0.28 MPa,SVR-PSO模型预测精度和泛化能力均优于Arrhenius模型。

基于修正JC模型和BP-ANN算法预测HNi55-7-4-2合金高温流变行为的对比

采用Gleeble-3500型热模拟试验机,分别在变形温度为873,923,973,1023,1073 K,应变速率为0.01,0.1,1,10 s^(-1)条件下对HNi55-7-4-2合金进行等温热压缩试验,研究了该合金的高温流变行为;基于试验数据,分别采用修正Johnson-Cook(M-JC)模型和反向传播人工神经网络(BP-ANN)算法构建本构模型,对比分析这2个模型的预测精度。结果表明:HNi55-7-4-2合金的流变应力随着应变速率的增加而增大,随着变形温度的升高而降低。基于M-JC模型和BP-ANN算法建立的本构模型预测得到真应力与试验结果间的平均相对误差绝对值分别为14.63%%,0.35%%,相关系数分别为0.9787,0.9999;基于BP-ANN算法的本构模型的预测精度更高,可以较好地描述H Ni55-7-4-2合金的高温流变行为。

HN1表达与乳腺癌临床病理特征及预后的相关性分析

目的 探讨HN1在乳腺癌分子分型中的表达及对预后的影响.方法 借助TCGA数据库获取乳腺癌和正常乳腺标本mRNA及其临床数据,通过R语言行差异表达与预后价值分析,通过GEPIA、Kaplan-Meier Plotter、TIMER与LinkedOmics数据库对HN1表达在乳腺癌中进行生存预后、免疫细胞表达相关性及基因富集分析.结果 HN1相较于正常乳腺细胞,在乳腺癌中呈现高表达,且在不同乳腺癌亚型、T分级、首次诊断年龄上呈现差异.总体上,HN1高表达对乳腺癌预后产生较差的影响,尤其是luminal A型乳腺癌,HN1高表达明显缩短乳腺癌患者的OS和RFS,HN1高表达的luminal B型乳腺癌患者在RFS上呈现出缩短的现象.通过基因富集分析表明,HN1表达与多种代谢相关基因存在相关性;进一步针对线粒体代谢相关基因、NADPH相关基因进行基因相关性分析发现,HN1与MYC、NQO1、PKM表达呈正相关.结论 HN1高表达对乳腺癌预后产生较差影响,且与代谢相关基因MYC、NQO1、PKM呈现出一定相关性,存在HN1通过调控以上基因对乳腺癌进展产生影响的可能.

宁夏蚤类组成、分布与危害

根据既往鼠疫疫源调查与监测、动物、昆虫区系与种群结构的调查资料,分析宁夏蚤类的组成、分布与危害,为预防控制鼠疫等自然疫源性疾病提供科学依据。按照鼠疫疫源调查与监测、动物、昆虫区系及种群结构调查方法,对所获得的体外寄生虫分类鉴定、登记计数。共发现蚤类100种和亚种,隶属7科39属,其中17种和亚种为宁夏蚤类新记录;证实有7种(亚种)蚤能自然感染鼠疫菌,是宁夏二块鼠疫自然疫源地传播媒介;有些蚤类叮咬人体能引起皮炎或过敏;统计发现宁夏蚤类数量约占我国蚤类的1/6,其中有5种蚤为本亚区所特有。宁夏蚤类不断被发现,传播媒介也会增加,控制杀灭蚤类是预防动物与人间鼠疫的重要措施之一。

针刺智三针和四神聪穴治疗血管性痴呆的临床研究

【目的】探讨电针疗法对血管性痴呆的疗效。【方法】采用分层随机的方法,将46例血管性痴呆患者按长谷川痴呆修改量表(HDS)评分的不同分为3个等级,再随机分为电针组(主要针刺神庭、本神、四神聪等穴位,连续治疗4周)23例和对照组(口服尼莫通,每次 30 mg,每天3次,连续治疗4周)23例,观察两组患者治疗前后HDS、日常生活能力(ADL)、神经功能缺损评分及主要症状观察表等量表的评分变化。【结果】两组治疗后HDS、ADL、神经功能缺损评分及主要症状评分均较治疗前有好转(P<0.01),其中以电针组的疗效较好(P<0.01)。【结论】提示电针智三针穴、四神聪穴对血管性痴呆的日常生活能力、神经功能缺损所形成的功能障碍,以及主要症状有改善作用。

人甲状腺钠/碘转运体基因全长的克隆及其重组表达质粒的构建

目的:利用基因工程的方法制备甲状腺钠/碘同向转运体(hNIS)cDNA,为今后的转基因治疗奠定物质基础。方法:采用TRIzol一步法,从甲状腺组织中提取总RNA,再应用RT-PCR扩增出hNIS基因全长,然后采用TOPO克隆技术构建重组表达质粒pcDNA3.1D/FLhNIS,并进行酶切和测序鉴定。结果:成功制备了hNIScDNA并构建了其重组表达质粒。结论:为最终实现131I治疗不摄碘的肿瘤提供了分子生物学基础。

穴位综合疗法对先天愚型患者智商的影响

【目的】评价中医穴位疗法对先天愚型患者智商的影响。【方法】将80例先天愚型患者随机分为穴位综合疗法治疗组(简称综合治疗组)、脑复康对照组(简称脑复康组)、空白对照组,综合治疗组取四神针(百会穴前、后、左、右各旁开1.5寸)、智三针(神庭穴和左右本神穴)、颞三针(耳失直上2寸为第1针,左右旁开1寸为第2、3针)、脑三针(脑户穴及两侧脑空穴)为主穴,进行针刺和维生素B_(12)、维丁胶性钙、脑活素穴位注射,脑复康组口服脑复康,空白组不作任何特殊治疗;4个月为1个疗程,期间嘱家长在家对患儿进行相应的教育和训练;治疗前和疗程结束后采用 《中国修订韦氏儿童智力量表》测定患儿的智商(IQ),包括语言IQ(VIQ)、操作IQ(PIQ)和总IQ(FIQ)。【结果】4个月治疗后,综合治疗组总体智力水平均有提高(与空白组比较,均P<0.01),并较脑复康组为优;并且综合治疗组治疗后IQ的提高主要为PIO各项得分的提高所贡献,与操作有关的几个项目的得分与治疗前比,均有显著意义(P<0.05),而VIQ得分治疗后未见显著性提高(均P>0.05)。【结论】穴位综合疗法能提高先天愚型患者的智商。

同盟会,国民革命的联盟——关于同盟会的性质问题

本文认为同盟会的性质不是如过去学术界所说的为资产阶级政党,而是全国各阶级革命群众的联合政党、国民革命的联盟。本文主要从三个方面展开论述:1、从同盟会的三民主义纲领来看,它不仅反映了资产阶级的利益和要求,也代表了包括地主、工人、农民在内的当时一切反对西方列强侵略,要求推翻清朝,振兴中华,改变现状的人们和阶级的利益。2、从同盟会的成员来看,既有资产阶级,也有地主、工人、农民和其他各阶级及其知识分子。3、从同盟会领袖孙中山的思想来看,也不是仅站在资产阶级立场上讲话,而是代表了全国各族各阶级,尤其是工人农民的共同利益。

广东省13届运动会场馆赛后开发与利用研究

本文采用文献研究法、专家访谈法、社会调查法、比较研究法等研究方法,通过梳理、研究和借鉴国内外体育场馆的经营管理理念及赛后利用经验,总结了目前国内外体育场馆运营的模式,提出了省运会后惠州市投资新建和改造的一批大型现代体育场馆赛后运营的基本原则以及省运会场馆赛后利用的建议,为政府及相关职能部门提供一定的参考依据。