人神经营养因子-4/5基因的克隆及序列测定

目的 :从人胎盘组织基因组 DNA中 ,克隆人神经营养因子 - 4/ 5 (h NT- 4/ 5 )基因。方法 :经 PCR扩增出的 DNA片段用 Pst I单酶切后 ,酶切图谱与文献报道一致。再将大量扩增后的目的 DNA片段连接于测序载体M13m p18,用手工测序和 ABI373A DNA自动序列分析仪自动测序。结果 :两项分析结果都确证所得到的目的基因与天然 h NT- 4/ 5编码序列一致。 结论 :首次成功地从人胎盘组织克隆出人神经营养因子 - 4/

重组人神经营养因子-4/5蛋白抗三氧化二砷神经毒作用

目的初步观察重组人神经营养因子-4／5（hNT－4／5）蛋白对三氧化二砷毒性的抑制作用。方法利用hNT－4／5蛋白具有抗神经毒性的特点，采用本实验室克隆表达及部分纯化的具有天然hNT－4／5蛋白生物学活性的重组hNT-4／5蛋白，以不同水平的重组hNT4／5蛋白（0－100μl）与不同浓度的As2O3（0－160μmol／L）同时加入各组鸡胚前脑神经细胞和PC12细胞培养液中共同孵育24－48小时，观察其对染毒鸡胚前脑神经细胞存活和PC12细胞突起生长的影响作用。结果在鸡胚前脑神经细胞和PC12细胞中与As2O3共同培养48小时后，对照组与实验组的细胞存活率差异有显著性，而且细胞存活率和突起数目随hNT－4／5浓度增高而提高和增加。结论初步观察到重组hNT4／5蛋白具有抑制As2O3的毒性作用，为从基因工程途径寻找抗环境毒物因子提供了依据。