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hOSM在COS-7细胞中表达及对人A375黑色素瘤细胞的生长抑制作用
被引量:
1
1
作者
叶建新
盛伟华
+3 位作者
马丽丽
谢宇峰
缪竞诚
杨吉成
《临床肿瘤学杂志》
CAS
2006年第2期128-132,共5页
目的:克隆人抑瘤素(hOSM)基因并构建真核表达载体,在COS-7细胞中表达具有抑制人A375黑色素瘤细胞生长的基因重组蛋白。方法:用PMA刺激U937细胞,抽提总RNA,经RT-PCR获得cDNA,与pUCmT载体连接,经PCR获得全长hOSM基因,再与pcDNA3·1/my...
目的:克隆人抑瘤素(hOSM)基因并构建真核表达载体,在COS-7细胞中表达具有抑制人A375黑色素瘤细胞生长的基因重组蛋白。方法:用PMA刺激U937细胞,抽提总RNA,经RT-PCR获得cDNA,与pUCmT载体连接,经PCR获得全长hOSM基因,再与pcDNA3·1/myc-his(-)A真核表达载体连接,构建真核表达重组质粒pcDNA3·1A-hOSM,经PCR和限制性酶切及DNA测序鉴定后,在COS-7细胞中进行瞬时表达,采用RT-PCR鉴定hOSM基因的转录,MTT法检测表达产物抑制A375细胞生长的活性。结果:重组入载体中的基因片段不仅方向正确,而且所克隆的hOSM基因,与GeneBank报告序列完全一致,并成功地在COS-7细胞中瞬时表达了具有抑制A375细胞生长的rhOSM蛋白。结论:本研究成功地克隆出hOSM基因并在COS-7细胞中获得瞬时表达,证明了表达的基因重组蛋白具有抑制人A375黑色素瘤细胞生长的活性,为在真核细胞中进行稳定表达,深入研究rhOSM的生物学功能创造了条件。
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关键词
hosm基因
COS-7细胞表达
抑瘤作用
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职称材料
题名
hOSM在COS-7细胞中表达及对人A375黑色素瘤细胞的生长抑制作用
被引量:
1
1
作者
叶建新
盛伟华
马丽丽
谢宇峰
缪竞诚
杨吉成
机构
苏州大学医学院细胞与分子生物学教研室
出处
《临床肿瘤学杂志》
CAS
2006年第2期128-132,共5页
文摘
目的:克隆人抑瘤素(hOSM)基因并构建真核表达载体,在COS-7细胞中表达具有抑制人A375黑色素瘤细胞生长的基因重组蛋白。方法:用PMA刺激U937细胞,抽提总RNA,经RT-PCR获得cDNA,与pUCmT载体连接,经PCR获得全长hOSM基因,再与pcDNA3·1/myc-his(-)A真核表达载体连接,构建真核表达重组质粒pcDNA3·1A-hOSM,经PCR和限制性酶切及DNA测序鉴定后,在COS-7细胞中进行瞬时表达,采用RT-PCR鉴定hOSM基因的转录,MTT法检测表达产物抑制A375细胞生长的活性。结果:重组入载体中的基因片段不仅方向正确,而且所克隆的hOSM基因,与GeneBank报告序列完全一致,并成功地在COS-7细胞中瞬时表达了具有抑制A375细胞生长的rhOSM蛋白。结论:本研究成功地克隆出hOSM基因并在COS-7细胞中获得瞬时表达,证明了表达的基因重组蛋白具有抑制人A375黑色素瘤细胞生长的活性,为在真核细胞中进行稳定表达,深入研究rhOSM的生物学功能创造了条件。
关键词
hosm基因
COS-7细胞表达
抑瘤作用
Keywords
Human oncostatin M gene
Express in cos-7 cells
Effect of inhibiting tumor cells
分类号
R730.45 [医药卫生—肿瘤]
R739.5 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
hOSM在COS-7细胞中表达及对人A375黑色素瘤细胞的生长抑制作用
叶建新
盛伟华
马丽丽
谢宇峰
缪竞诚
杨吉成
《临床肿瘤学杂志》
CAS
2006
1
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