敲低高迁移率族蛋白B1(HMGB1)抑制高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞增殖并促进其凋亡

目的探讨敲低高迁移率族蛋白B1(HMGB1)水平对高糖培养大鼠肾小球系膜细胞(GMC)增殖的影响及机制。方法培养大鼠GMC,分为正常组、高糖处理组、阴性对照小干扰RNA联合高糖处理组(siRNA-NC-高糖组)、HMGB1小干涉RNA联合高糖处理组(siRNA-HMGB1-高糖组)。正常组GMC用正常DMEM培养基培养;高糖处理组GMC换用高糖DMEM培养基培养;siRNA-HMGB1-高糖组GMC转染siRNA-HMGB1序列6 h后,用高糖培养液培养24 h;siRNA-NC-高糖组GMC转染siRNA-NC序列6 h后,用高糖培养液培养24 h。实时荧光定量PCR检测GMC中HMGB1 mRNA水平,MTT法检测GMC增殖情况,流式细胞术检测GMC凋亡情况,Western blot法检测GMC中HMGB1、核因子κBp65(NF-κBp65)和核因子κB抑制物α(IκBα)蛋白水平,ELISA检测细胞上清液中白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果与siRNA-NC-高糖组或单纯高糖组相比,siRNA-HMGB1-高糖组GMC中HMGB1 mRNA水平降低,在处理24、48、72、96 h,GMC增殖活性和细胞凋亡率降低;敲低GMC的HMGB1水平后,细胞NF-κBp65蛋白水平降低、IκBα蛋白水平增加,且上清液中IL-1β、IL-6和TNF-α水平降低。结论敲低GMC的HMGB1水平抑制高糖诱导的GMC增殖,并促进其凋亡,可能与抑制NF-κB/IκBα通路有关。

FPS-ZM1拮抗晚期糖基化终末产物受体逆转高糖所致的牙周膜成纤维细胞炎症反应

目的:以体外培养的人牙周膜成纤维细胞(hPDLFs)为研究对象,探讨新型小分子RAGE特异性抑制剂对高糖环境培养下牙周膜成纤维细胞炎性因子的影响。方法:原代培养hPDLFs,Western-Blot检测高糖对RAGE表达的影响,RT-PCR检测FPS-ZM1对高糖环境下IL-6和TNF-α基因表达的影响,ELISA检测IL-6和TNF-α的蛋白分泌变化。结果:高糖可导致hPDLFs表面RAGE表达增加,加重细胞炎症反应。而FPS-ZM1可以下调IL-6和TNF-α的基因表达,同时减少炎症介质IL-6和TNF-α的分泌。结论:RAGE特异性抑制剂FPS-ZM1可以在一定程度上逆转高糖刺激导致hPDLFs产生的炎症反应。