hPin1原核表达、纯化及热稳定性研究

利用E．coli BL21原核表达，纯化得到了His-hPin1融合蛋白，并研究了它的热稳定性．在中性条件下进行不同温度处理，SDS-PAGE分析表明，低于40℃处理不会影响His-hPin1的溶解性，50～100℃处理会使其部分变性而沉淀．荧光发射光谱研究表明，未处理的His-hPin1具有339nm的荧光发射峰；热处理使荧光发射峰的位置变化，低于40℃处理对His—hPin1的荧光强度影响较小，50～100℃热处理使HiS-hPin1的荧光强度明显降低．圆二色谱研究表明，热处理对His-hPin1的二级结构有影响，引起α-螺旋含量的明显减少，而无规卷曲增加．以上数据表明hPin1是一个相对热稳定的蛋白．