hSAMP32基因疫苗的构建及对小鼠生育的影响

目的构建hSAMP32避孕疫苗,研究其对小鼠生育率的影响。方法扩增hSAMP32基因片段;hSAMP32基因测序;重组质粒pcDNA3.1(+)-hSAMP32的构建;观察BALB/c小鼠生殖能力是否受到影响。结果经对比,目的基因组较对照组穿卵率明显下降。结论 hSAMP32基因可以降低BALB/c小鼠的生殖能力。

基因枪介导人精子顶体膜相关蛋白32基因疫苗在小鼠骨骼肌中的表达

目的:观察pcDNA3.1(+)-人精子顶体膜相关蛋白32(hSAMP32)基因疫苗经基因枪介导肌肉接种后在小鼠体内的表达。方法:BALB/c雌性小鼠6只,实验组鼠(4只)经后腿股内侧肌以基因枪多点注射重组质粒pcDNA3.1(+)-hSAMP325μg,空载体对照组(1只)注射pcDNA3.1(+)载体5μg,空白对照组(1只)注射无菌生理盐水200μl。接种后第7d取小鼠股内侧肌注射部位肌肉,RT-PCR和原位杂交法检测目的基因mRNA的表达,以自制抗血清进行免疫组织化学染色检测目的基因蛋白的表达。取小鼠心、肝、脾、脑、肾、胚胎组织,PCR扩增,行基因疫苗的安全性检测。结果:RT-PCR和原位杂交检测结果显示实验组小鼠注射部位肌肉组织有目的基因及其蛋白的表达,对照组未见表达。实验组小鼠心、肝、脾、脑、肾、胚胎的基因组DNA均未扩增出目的基因条带,说明外源性基因没有整合到宿主染色体。结论:该基因疫苗可在小鼠骨骼肌内有效、安全地表达。