三氧化二砷对Hela细胞hTERTmRNA表达的调节和对端粒酶活性的影响

目的 :观察三氧化二砷 (As2 O3 )对人宫颈癌细胞 (Hela细胞 )端粒酶活性及端粒酶逆转录酶 (hTERTmR NA)表达的影响。方法 :以 2 μmol/L的As2 O3 作用于人宫颈癌Hela细胞 ,在不同时间点用MTT法检测Hela细胞活力的变化 ,用流式细胞仪检测细胞周期的变化 ,用RT PCR法检测hTERTmRNA表达的变化 ,用TRAP ELISA法检测端粒酶活性的变化。结果 :随着As2 O3 作用时间的延长 ,Hela细胞的活力逐渐降低 ,G0 /G1期细胞所占比例升高 ,S期细胞所占比例减少 ,hTERTmRNA表达水平逐渐降低 ,端粒酶活性逐渐下降。结论 :As2 O3 可引起Hela细胞周期阻滞 ,hTERTmRNA的表达水平下调 ,端粒酶活性降低。

甘氨脱氧胆酸钠对人肝癌细胞端粒酶活性及其hTERTmRNA表达的影响

目的探讨甘氨脱氧胆酸钠(glycodeoxycholic acid,GDCA)对肝癌SMMC7721细胞端粒酶活性以及hTERTmRNA表达影响。方法采用PCR-ELISA法检测端粒酶活性;应用RT-PCR检测hTERTmRNA的表达。结果GDCA作用肝癌SMMC7721细胞后,端粒酶活性与hTERTmRNA表达均降低,GDCA200、400μmol/L处理组与对照组端粒酶活性(A450nmOD值)分别为(0.140±0.04)、(0.077±0.01)、(0.248±0.05),差异有统计学意义(P<0.05),抑制率为43.5%和69.0%。hTERTmRNA表达明显降低,相对表达率分别为1.33、0.59、1.89。结论甘氨脱氧胆酸钠抑制肝癌SMMC7721细胞端粒酶活性,且下调hTERTmRNA的表达。

hTERTmRNA在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义

目的 探讨端粒酶逆转录酶 (humantelomerasereversetranscriptase ,hTERT)mRNA的表达在膀胱移行细胞癌诊断中的价值及临床意义。方法 采用实时荧光定量PCR检测 5 5例膀胱移行细胞癌组织、2 8例癌旁组织及 9例正常膀胱组织中hTERTmRNA的表达情况。结合临床资料分析评价其表达与膀胱癌临床生物学行为的关系。结果 5 5例膀胱移行细胞癌中hTERTmRNA的阳性率为 92 .7% (5 1 5 5 ) ,2 8例癌旁组织中hTERTmRNA的阳性率为 17.9% (5 2 8) ,9例正常膀胱组织中没有表达。hTERTmRNA的表达与患者的年龄、性别、肿瘤数目、大小及病理分级无关 (P >0 .0 5 ) ,不同的临床分期与肿瘤发病情况间的差异有显著意义 (P <0 .0 1)。结论 hTERT mRNA的表达与膀胱移行细胞癌组织的恶性行为密切相关 ,提示hTERT在膀胱移行细胞癌的发生及恶化过程中或许发挥重要作用。hTERTmRNA是一种有价值的肿瘤分子标记物 ,运用实时荧光定量PCR对其表达的检测有助于膀胱移行细胞癌的早期诊断。

PTENmRNA和hTERTmRNA与子宫内膜样腺癌生物学行为关系的探讨

目的:探讨PTENmRNA、hTERTmRNA在子宫内膜样腺癌中的表达及其与生物学行为的关系。方法:采用原位杂交法检测50例子宫内膜样腺癌组织和50例正常子宫内膜组织PTENmRNA、hTERTmRNA的表达情况,分析二者与子宫内膜样腺癌生物学行为的关系。结果:PTENmRNA、hTERTmRNA在子宫内膜样腺癌组织中的阳性表达率分别为30.0%和78.0%。PTENmRNA、hTERTmRNA表达与子宫内膜样癌的分化程度、FIGO分期、淋巴结转移及浸润深度均有关,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:PTENmRNA和hTERTmRNA与子宫内膜样腺癌的发生、发展密切相关,联合检测PTENmRNA和hTERTmRNA可作为评估子宫内膜样腺癌恶性程度和预后预测的指标。

非小细胞肺癌患者外周血hTERT mRNA水平检测的临床意义

目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)发展与外周血端粒酶逆转录酶(hTERT)表达的相关性。方法:采用Real-time PCR技术检测114例NSCLC患者和35例肺部良性病变患者外周血hTERT mRNA表达水平,比较二者之间的差异并分析。结果:检测结果显示,肺鳞癌Ⅰ~Ⅳ期hTERT mRNA表达量分别为(0.134±0.018)×10^(-3)、(0.185±0.044)×10^(-3)、(0.576±0.267)×10^(-3)、(3.409±2.544)×10^(-3),Ⅰ、Ⅱ期之间差异无统计学意义(P>0.05),其余各组之间差异有统计学意义(P<0.05);肺腺癌Ⅰ~Ⅳ期hTERT活性分别为(0.156±0.006)×10^(-3)、(0.220±0.052)×10^(-3)、(0.630±0.282)×10^(-3)、(3.230±2.245)×10^(-3),Ⅰ、Ⅱ期之间差异无统计学意义(P>0.05),其余各组之间差异有统计学意义(P<0.05);同期鳞癌与腺癌之间差异无统计学意义(P>0.05);肺部良性病变组外周血hTERT mRNA表达水平为(0.042±0.017)×10^(-3),与肺癌组之间存在显著性差异(P<0.05)。结论:NSCLC患者外周血hTERT mRNA表达显著升高,并与NSCLC临床分期正相关,提示其可作为肺癌诊断和临床分期的有益参考,但与NSCLC的病理类型无关。

端粒酶逆转录酶蛋白及mRNA在胃癌中的表达及相关性研究

目的通过对胃癌组织中hTERT蛋白及hTERTmRNA表达的研究,探讨hTERT与胃癌临床病理特征的关系和意义。方法采用免疫组化法及原位杂交法检测10例正常胃组织和51例胃癌组织中hTERT蛋白及hTERTmRNA表达情况。结果胃癌中hTERT蛋白及hTERTmRNA阳性表达率显著高于正常胃粘膜;胃癌中hTERT蛋白表达阳性率与患者发生部位及患者的年龄显著相关。hTERT蛋白阳性胃癌标本中hTERTmRNA阳性为74.36%;hTERT蛋白阴性的胃癌标本中,hTERTmRNA阳性为0%。结论 hTERT与胃癌的发生有关,且在胃癌中呈高表达。hTERT蛋白与hTERTmRNA在胃癌中表达量呈正相关,其阳性表达可能是胃癌的标志之一。

hTERT mRNA和MDR mRNA在人肝癌中的表达及其意义

目的 探讨hTRTmRNA及MDRmRNA在人肝细胞肝癌 (HCC )组织中的表达及其意义。方法 检测 5 8例HCC患者癌组织及癌旁组织中hTERTmRNA和MDRmRNA的表达情况。结果 在 5 8例肝癌患者癌组织及其癌旁组织中 ,hTERTmRNA阳性率分别为 44 .83 % ( 2 6/5 8)和 5 .17% ( 3 /5 8) ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ;MDRmRNA阳性率分别为 60 .3 4% ( 3 5 /5 8)和 3 2 .76% ( 19/5 8) ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。hTRTmRNA ,MDRmRNA在人肝癌组织中的检出率与临床分期、肝外转移、术后复发、肿瘤大小等明显相关 (均P <0 .0 5 ) ,而与肿瘤数目、血清AFP水平等无明显相关 (P >0 .0 5 )。MDRmRNA检出率与术前化疗明显相关 (P <0 .0 1) ,但与门静脉癌栓无关 (P >0 .0 5 ) ;而hTERTmRNA与术前化疗无相关 (P >0 .0 5 ) ,但与门静脉癌栓有关 (P <0 .0 5 )。结论 hTERTmRNA和MDRmRNA可能与肝细胞的恶性转化及术后复发有关 ,故可望作为预测肝癌复发。

结直肠癌患者外周血中人端粒酶逆转录酶mRNA的表达及其临床意义

目的探讨结直肠癌患者外周血中人端粒酶亚单位hTERTmRNA的表达及其意义。方法以hTERTmRNA为靶基因运用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测76例结直肠癌、22例良性大肠疾病患者和30例正常对照人群外周血中hTERTmRNA的表达。结果76例结直肠癌患者中有52例外周血hTERTmRNA表达阳性,阳性率为68.4%,22例良性大肠疾病患者中有1例外周血hTERTmRNA表达阳性,二者比较有显著性差异(0.001);30例正常对照人群外周血中均无hTERTmRNA表达。hTERTmRNA的阳性检出率与肿瘤分化程度和TNM分期密切相关,与其他因素无相关性。结论外周血细胞中hTERTmRNA的表达与肿瘤分期相关,有可能作为结直肠癌微转移的一个监测指标。

人端粒酶逆转录酶与p53蛋白在甲状腺癌组织中的表达、相关性及临床意义

目的探讨人端粒酶逆转录酶(hTERTmRNA)与突变型p53蛋白在甲状腺癌和甲状腺良性组织中的表达、相关性及临床意义。方法采用原位杂交法检测hTERTmRNA的表达,采用免疫组织化学法检测突变型p53蛋白的表达。结果①hTERTmRNA和突变型p53蛋白在甲状腺癌中高表达(P<0.05)。②hTERTmRNA与p53蛋白阳性率与甲状腺癌的临床病理分型,有无淋巴结转移,肿瘤TNM分期有关(P<0.05),与患者年龄,性别无关。③hTERTmRNA与p53蛋白在甲状腺癌组织中的表达呈显著正相关,具有统计学意义(P<0.05)。结论①hTERTmRNA和突变型p53蛋白的高表达在甲状腺癌的发生发展过程中起到重要作用。②p53蛋白调控hTERTmRNA的表达,p53蛋白在甲状腺癌中表达的增高可激活hTERTm-RNA,从而导致甲状腺癌的发生。③hTERTmRNA和p53蛋白在甲状腺癌中表达的变化可用于评估其生物学行为和判断预后,对临床上甲状腺癌的靶向治疗起到重要的指导作用。

三氧化二砷对腺样囊性癌ACC-2细胞的端粒酶逆转录酶mRNA表达的影响

目的:探讨As2O3对ACC-2细胞端粒酶hTERT mRNA表达的影响。方法:进行ACC-2细胞培养,将As2O3建立不同药物浓度梯度(0、1.0、2.0、4.0、8.0 μmol/L)分别作用于ACC-2细胞24 h,48 h,应用RT-PCR方法,检测As2O3作用前后,ACC-2细胞的hTERT mRNA表达水平。结果:RT-PCR结果显示,在未经药物作用、作为对照组的正常培养的ACC-2细胞中,hTERT mRNA呈现明显高表达;在As2O3作用于ACC-2细胞后24 h与48 h时,随As2O3药物浓度的增高(1.0 μmol/L、2.0 μmol/L、4.0 μmol/L、8.0 μmol/L),hTERT mRNA表达逐渐降低(P As2O3可下调ACC-2细胞的hTERT mRNA转录表达,来诱导ACC-2细胞凋亡。

端粒酶反转录酶基因在肝细胞癌中的表达及其意义

目的研究肝细胞癌中端粒酶反转录酶（human telomerase reverse transcriptase,hTERT）基因的表达及其临床意义。方法采用原位杂交方法分别对肝细胞癌及肝炎后肝硬化组织中hTERTmRNA进行检测。结果肝癌中hTERTmRNA表达阳性率明显高于肝硬化组织,差别有统计学意义（P〈0.01）;中、低分化的肝癌hTERT mRNA阳性强度高于高分化者,差别有统计学意义（P〈0.05）;肝癌中hTERTmRNA表达阴性组患者术后3年生存率高于阳性组患者,差别有统计学意义（P〈0.05）;hTERTmRNA表达弱阳性的肝癌患者生存时间较强阳性者延长,差别有统计学意义（P〈0.05）。结论hTERTmRNA阳性表达普遍存在于肝癌组织中,通过检测肝癌中hTERTmRNA表达情况可用来作为肝癌诊断及预后估计的新标志物。

大肠癌患者外周血微转移的诊断研究

目的:检测大肠癌患者外周血中CK20mRNA和hTERT mRNA的表达,探讨其能否作为诊断外周血微转移的生物学指标。方法:采用RT-PCR法检测60例大肠癌患者、21例肠道良性病变患者和20例健康体检者外周血中两项指标的表达。结果:1CK20mRNA和hTERT mRNA在大肠癌患者外周血中的阳性表达率分别为51.67%和56.67%,相对系数分别为0.88±0.14和0.89±0.17;肠道良性病变患者中阳性表达率分别为4.76%和0%,相对系数分别为0.11和0;健康体检者阳性表达率及相对系数均为0。大肠癌患者与肠道良性病变患者、健康体检者相比,二者的表达均有统计学差异。2RT-PCR法检测大肠癌患者外周血中两项指标诊断微转移的灵敏度为77.78%～88.89%,特异度为59.38%～93.75%。3两指标阳性者根治术后复发转移率高于阴性者,生存率低于阴性者。4两指标与CEA、CA19-9的表达呈正相关;hTERTmRNA阳性率高于CA199。结论:大肠癌患者外周血中存在CK20mRNA和hTERT mRNA的表达,可作为诊断大肠癌患者外周血微转移的分子生物学指标。

胸壁、纵隔（081287～081297）

胸腔积液中hTERTmRNA、CEA、CA19-9的检测及其意义；三维适形放射治疗纵隔淋巴结转移性癌的不同剂量分割研究；恶性胸腔积液甘露聚糖肽灌注治疗68例；胸膜黏连术控制肺癌伴恶性胸水的疗效观察；重组改构人肿瘸坏死因子治疗恶性体腔积液26例；

涎腺疾病

涎腺肿瘤中hTERTmRNA表达的研究；PCNA在db／db自发性糖尿病小鼠颌下腺的表达；Genistein对涎腺腺样囊性癌细胞生长及Survivin表达的影响；力学刺激对人腺样囊性癌高低转移细胞株中E-cad／cat复合体的影响；DNA

Effects on Telomerase Activity and Associated-Protein of hRPE Cells by TGF-β_1

Purpose: To investigate the effects on telomerase activity, human telomerase reversetranscriptase (hTERT) gene and TEP1 mRNA of retinal pigment epithelial (RPE) cells weretreated by TGF-β1 of different concentration.Methods: The cultured human RPE cells were treated with TGF-β1 at differentconcentration(0 ng/ml, 0. 01 ng/ml, 0.1 ng/ml, 1 ng/ml, 10 ng/ml) for 24 h, thentelomerase activity was detected by telomerase repeat amplification protocol(TRAP). Theexpression of hTERT mRNA and TEP-1mRNA were detected by reverse transcriptionpolymerase chain reaction(RT-PCR).Results: TRAP and RT-PCR showed when the concentration of TGF-β1 was graduallyincreased, telomerase activity and the expression of hTERTmRNA were gradually reduced,TEP1mRNA showed no apparent differential expression.Conclusion: TGF-β1 can down-regulate telomerase activity and the expression of hTERTmRNA, but no effection on TEP-1mRNA, hTERTmRNA expression was in accordance withtelomerase activity in hRPE cells, hTERT gene plays a crucial role in the expression oftelomerase activity, while TEP1 plays a much smaller role.