人甲状腺过氧化物酶的提取、纯化及鉴定

目的：提取较纯的ｈＴＰＯ，为甲状腺激素合成过程的研究和建立ｈＴＰＯＡｂ检测方法提供了实验材料。方法：本文采用胰蛋白酶和脱氧胆酸钠处理手术切除人甲状腺组织，经超速离心和ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－３００柱层析提纯人甲状腺过氧化物酶（ｈＴＰＯ），并进行了愈创木酚氧化法ｈＴＰＯ酶活性测定。结果：本研究获得的ｈＴＰＯ比生物活性为８．４３愈创木酚单位（ＧＵ）／ｍｇ。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳鉴定示提纯的ｈＴＰＯ在分子量１０７ｋＤ处有一清晰色带，而于９３ｋＤ处也有一色带，但较浅。结论：该方法提纯ｈＴＰＯ操作简便、快速，获得的ｈＴＰＯ较纯。

甲状腺微粒体抗体和甲状腺过氧化物酶抗体相关性研究

研究了105例自身免疫性甲状腺病（AITD）患者血清甲状腺微粒体抗体（TMAb）和甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）测定值的相关性，其中TMAb和TPOAb的阳性率分别为56．2％（59／105）和73．3％（77／105），呈正相关（r＝0．55，P＜0．001）;另外，TMAb阳性血清稀释度和其对甲状腺过氧化物酶单克隆抗体（TPOmAb）结合125I－hTPO的抑制性呈显著的量效关系（r＝0．98，P＜0．001），提示制备TPO单抗和AITD患者的TPOAb存在共同的hTPO的B细胞表位，以上实验结果支持TPOAb即为TMAb的观点。

经皮冠状动脉介入治疗术后氯吡格雷低反应患者的剂量相关分析与随访研究

目的探讨大剂量氯吡格雷维持应用对经皮冠状动脉介入治疗（PCI）术后患者氯吡格雷低反应的发生率及临床事件的影响,并分析发生氯吡格雷低反应的可能相关危险因素。方法选取2014年1月至2015年6月在扬州大学医学院附属常熟医院心血管内科行PCI术的患者134例,应用血栓弹力图（TEG）测定血小板抑制率,根据术后24 h的测定结果分为氯吡格雷低反应组（45例）和氯吡格雷敏感组（89例）,术后分别给予氯吡格雷150 mg、每日1次和75 mg、每日1次口服维持,3个月后复查TEG,观察氯吡格雷低反应变化情况并分析氯吡格雷低反应相关危险因素。随访6个月间的主要不良心血管事件（MACE）和出血事件的发生情况。结果 3个月后,氯吡格雷低反应的发生率从33.6%（45/134）降至11.9%（16/134）。随访6个月,两组患者死亡、非致死性心肌梗死的发生率比较,差异均无统计学意义（均P〉0.05）;氯吡格雷低反应组的总体MACE[15例（33.3%）比20例（22.5%）]、靶血管再次血运重建[5例（11.1%）比6例（6.7%）]、再次因心绞痛住院[12例（26.7%）比15例（16.9%）]的发生率显著高于氯吡格雷敏感组,差异均有统计学意义（均P〈0.05）。氯吡格雷低反应的独立影响因素有吸烟史（OR 4.498,95%CI 1.378~4.018,P=0.036）、合并2型糖尿病（OR 4.385,95%CI 1.370~7.552,P=0.026）、氯吡格雷剂量（OR 0.597,95%CI1.005~2.676,P=0.019）。结论对于氯吡格雷低反应的PCI患者,术后3个月持续应用氯吡格雷150 mg、每日1次维持剂量与氯吡格雷敏感患者75 mg、每日1次维持剂量在严重不良事件（包括死亡、非致死性心肌梗死）方面的获益相当。

人血小板生成素 cDNA 合成、克隆及序列测定

利用ＲＴＰＣＲ方法从中国人胎肝总ＲＮＡ中扩增出人血小板生成素（ｈＴＰＯ）的ｃＤＮＡ。序列分析结果表明，我们所获得的ｈＴＰＯｃＤＮＡ与文献报道中的基因序列高度同源，其中第４９７ｂｐ、５９５ｂｐ、７６７ｂｐ和７９５ｂｐ位碱基分别由Ｔ、Ｇ、Ｔ和Ｔ代替了文献中的Ｇ、Ａ、Ｇ和Ｃ，从而导致了１６６、１９９和２５６位氨基酸由报道中的Ｓｅｒ、Ｌｙｓ和Ｇｌｙ变为Ｐｈｅ、Ｇｌｕ和Ｖａｌ。

人血小板生成素氨基端功能区cDNA的克隆及其定点突变

以Nested－PCR方法从人肝cDNA基因文库中扩增出编码人血小板生成素（hTPO）前153个氨基酸的氨基端功能区cDNA；在扩增中，采用非连续多核甘酸定点突变的方法．将翻译起始的七个氨基酸的原核中不常用的密码子同又突变成使用频率较高的密码子，以便于其在大肠杆菌中表达。序列测定证实了预期的结果。

PCR法扩增人甲状腺过氧化物酶抗原决定簇基因及基因克隆

ＰＣＲ法扩增人甲状腺过氧化物酶（ｈＴＰＯ）抗原决定簇基因（１７０２～２６２２）片段并插入到载体之中，获得２个参与自身免疫反应的Ｂ细胞抗原决定簇Ｃ２和Ｃ２１、一个Ｔ细胞抗原决定簇和一个可能的Ｂ细胞抗原决定簇。用ＡｐａＩ和ＳａｃＩ双酶切此ｈＴＰＯ基因片段可获得３个较短的肽段，行酶切鉴定后再分别亚克隆，从而为今后的序列测定和ｈＴＰＯ表达产物及其单克隆抗体的研究提供目的基因。

非开挖高密度聚乙烯内衬管破损修复技术研究

油田的输油、输气、油气混输、污水管道多年来一直面临着腐蚀穿孔的问题。高密度聚乙烯内衬技术是将其穿插至已受腐蚀的管道中,使内衬管与金属管道内壁紧密的贴合,形成合二为一的“管中管”复合结构,输送介质与金属管道不发生直接接触,从而达到解决管道腐蚀、延长使用寿命的目的。然而,经过高密度聚乙烯内衬技术修复后的管道若因被盗油开孔、挖掘破坏或自然灾害等外力原因破坏造成管道破漏后,往往造成高密度聚乙烯内衬与金属管道同时破损。其破漏处内外管线的修复,是目前工程施工中亟待解决的现实问题。为此,本文提出一种高密度聚乙烯(HTPO)内衬管破损修复技术方案,采用“内连外焊”技术工艺,可以尽快修复破漏处,恢复管道输油能力。实践证明,修复后的管道运行良好,该方案经济可靠。

甲状腺抗原诱导大鼠实验性自身免疫性甲状腺炎的研究

目的观察人类甲状腺球蛋白（ｈＴＧ），人类甲状腺过氧化物酶（ｈＴＰＯ）以及豚鼠促甲状腺激素受体（ｇＴＳＨＲ）免疫诱导Ｗｉｓｔａｒ大鼠产生实验性自身免疫性甲状腺炎（ＥＡＴ）的过程。方法雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠共分四组，每组１０只，三组分别多次注射ｈＴＧ、ｈＴＰＯ、ｇＴＳＨＲ，第四组注射生理盐水作为对照。自０至１９１天，每次注射后，分别测定循环中ＴＴ３、ＴＴ４水平以及ＴＧＡｂ、ＴＰＯＡｂ、ＴＲＡｂ、ＴＳＡｂ和ＴＢＡｂ的活性；ＥＡＴ的严重程度采用甲状腺切片的显微镜观察进行评估。结果与正常组比较，实验组大鼠血清中存在高水平的ＴＧＡｂ、ＴＰＯＡｂ和ＴＳＡｂ；且甲状腺组织可见不同程度的淋巴细胞浸润，类似人类桥本氏甲状腺炎。此外，在ＴＳＨＲ组中不仅血清ＴＳＡｂ显著升高，而且甲状腺组织显示滤泡上皮增生、乳头状突起等Ｇｒａｖｅｓ’病（ＧＤ）的病理学特征。结论三种异源性抗原均能诱发正常Ｗｉｓｔａｒ大鼠产生ＥＡＴ，ＴＳＨＲ免疫的大鼠还显示了ＧＤ的倾向。