Xpert MTB/RIF与Hain MTBDRplus检测技术快速诊断肺结核及其耐药性的临床应用价值

目的评价利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(Xpert MTB/RIF,Xpert)与Hain MTBDRplus检测技术快速诊断肺结核及其耐药性的临床应用价值。方法选择2016年1月至2016年5月北京胸科医院261例疑似肺结核的住院患者,同时行痰Xpert检测、痰Hain MTBDRplus检测、痰罗氏培养,培养阳性的结核分枝杆菌行绝对浓度法药敏检测。以临床诊断参考标准为金标准,评价Xpert和Hain MTBDRplus检测痰中结核分枝杆菌的敏感度和特异度。以痰罗氏培养及绝对浓度法为金标准,评价Xpert和Hain MTBDRplus检测痰中结核分枝杆菌耐药性的敏感度。结果以临床诊断参考标准为金标准,Xpert和Hain MTBDRplus的敏感度分别为83.1%和72.3%,特异度分别为94.7%和100%。以痰罗氏培养为金标准,Xpert诊断肺结核的敏感度为81.7%;Hain MTBDRplus诊断肺结核的敏感度为74.4%。以绝对浓度法药敏结果为金标准,Xpert检测利福平耐药的敏感度为77%,Hain MTBDRplus检测利福平和异烟肼的敏感度分别为78.4%和80.5%。应用NRI比较Xpert和Hain MTBDRplus两种检测技术的诊断能力,NRI=0.055。结论痰Xpert和Hain MTBDRplu检测结核分枝杆菌的敏感度和特异度高,可用于肺结核的早期诊断及其耐药性检测。

HAIN技术快速检测耐药结核病及耐多药结核病效果评价

目的评价线性探针(HAIN)技术快速检测耐药结核病及耐多药结核病(MDR-TB)的临床应用效果。方法应用HAIN技术和传统比例法药敏试验(简称"药敏法")检测300株结核分枝杆菌临床分离株的耐药性,以药敏法结果为金标准,分析HAIN技术对诊断耐药结核病及耐多药结核病的特异性、敏感性和符合率。结果 HAIN技术检测与药敏法检测临床毒株耐药率和耐多药率结果差异均无统计学意义(P值均>0.05)。HAIN技术检测菌株对利福平耐药性的敏感性、特异性和符合率分别为96.30%、99.20%和99.33%;对异烟肼耐药性的敏感性、特异性和符合率分别为97.47%、99.09%和99.33%;对MDR-TB耐药性的敏感性、特异性和符合率分别为92.86%、99.27%和99.33%。HAIN技术检测时间一般为≤6h,药敏法为4~6w。结论 HAIN技术能够快速检测耐药、耐多药结核病,可在有条件的实验室进行推广。

HAIN用于检测原发性耐药结核的研究

目的通过与传统的比例法在新发涂阳病人中对结核分枝杆菌进行耐药检测比较,评价HAIN(线性探针)用于检测原发性耐药结核的可行性。方法随机抽取我院2012年1月至2013年3月新发涂阳病人的痰标本,分别进行HAIN检测和酸性罗氏培养、比例法药敏试验,并对结果进行分析比较,共323例病人被纳入分析。结果以比例法为金标准,HAIN方法对异烟肼(P=0.823)和利福平(P=1.000)的耐药检测结果与金标准的差异无统计学意义,HAIN检测异烟肼耐药的灵敏性为80.4%、特异性为96.6%,检测利福平耐药的灵敏性为95.8%、99.6%。HAIN对原发耐多药结核的检测(P=0.790)与金标准的差异也无统计学意义,灵敏性为78.9%、特异性为97.9%。结论 HAIN技术适用于临床原发耐药结核的快速筛查。

Bender格式塔测验在脑损害疾病中的应用

目的Bender格式塔测验的神经心理效应在脑损害疾病中的应用价值。方法46例脑损害疾病患者与84名正常对照组应用了Bender格式塔卡片测验。结果显示由视觉运动障碍所引起的临摹测验图形发生偏差和错误患者组明显高于正常对照组(P<0.05)。20岁以下年龄组除外,其他各年龄层两组间差异均有统计学意义(P<0.05),其中61～80岁年龄组差异统计学意义更显著(P<0.01)。患者组内部各图形的临摹错误两两对比结果28对中有23对差异有统计学意义(P<0.01),5对差异不显著(P>0.05),各图形显示的差异程度顺序为图Ⅵ>Ⅲ>Ⅳ>Ⅷ>Ⅶ>Ⅴ>Ⅱ>Ⅰ。正常对照组图A位置在测验纸左上为主72例(86%),而患者组散在地位于左上、中上、中央等位置,两组图A位置差异有统计学意义(P<0.05)。对患者是否存在明确的脑器质性损害以Hain标准评定更为敏感和可靠。结论(1)此测验在脑神经科学临床中对是否存在脑损害的判断具有一定的辅助诊断价值,是一个简便易行实用有效快速的普查、筛选、辅助诊断的神经心理测试工具。(2)在脑损害疾病的应用中,判断脑器质损害的程度应以Hain评分标准为基准,Hain脑损害指数超过10分者,应考虑脑器质性损害的可能。(3)该测验在临床实际运用中,应注意到测验图形Ⅵ、Ⅲ、Ⅳ的临摹成绩,对视觉运动功能障碍的判定、脑损害程度的判断参考价值较大。

139株结核分枝杆菌耐药性分析及耐药基因检测

目的了解本地区结核分支杆菌菌株的耐药状况，建立适合本地区结核分支杆菌耐药株的快速检测手段。方法2013年5月至9月143例患者的痰液标本中获得的结核分支杆菌，分离培养获得试验菌株139株，进行菌株鉴定和药物敏感实验，并从中随机抽取12株菌株，利用试剂盒MTBDR-plus（德国HAIN Lifescience）进行rpoB、katG及inhA基因检测。结果139株结核分枝杆菌复合群菌株中，对4种一线抗结核药物的总体耐药率为19．58％，其中17株（12．23％）至少对INH耐药，12株（8．63％）至少对RFP耐药，15株（10．79％）至少对SM耐药，3株（2．16％）至少对EMB耐药。在随机抽取的12株菌株中，耐药基因检测结果与药物敏感试验作比较，结果显示两组数据结果大致相符。结论耐多药结核菌株增多，应迅速建立准确快速的药物敏感性检测方法。试剂盒MTBDR-plus值得推广。

HAIN基因分型试剂盒鉴定临床非结核分枝杆菌的应用研究

目的采用HAIN基因分型试剂盒鉴定临床非结核分枝杆菌，评价其优缺点。方法收集浙江、安徽等地74株临床非结核分枝杆菌，采用HAIN基因分型试剂盒鉴定临床非结核分枝杆菌，并用16SrRNA基因测序方法对其进行比较和评价。结果74株非结核分枝杆菌HAIN基因分型试剂盒鉴定结果为：31株胞内分枝杆菌，12株脓肿分枝杆菌，8株偶发分枝杆菌，6株堪萨斯分枝杆菌，5株鸟分枝杆菌，3株耻垢分枝杆菌，2株草分枝杆菌，2株瘰疬分枝杆菌，1株戈登分枝杆菌，另外有4株菌株只能鉴定为分枝杆菌属，不能鉴定到种。8株结核分枝杆菌鉴定准确。与16S rRNA基因测序相比较，HAIN基因分型试剂盒除了4株菌株只能鉴定为分枝杆菌属以外，其余70株非结核分枝杆菌均能鉴定到种，鉴定符合率为94．59％；并且它能进一步区分脓肿分枝杆菌和龟分枝杆菌，以及堪萨斯分枝杆菌和胃分枝杆菌。如果单纯鉴定HAIN基因分型试剂盒菌株范围之内的临床最常见非结核分枝杆菌菌株，鉴定符合率为100％。结论HAIN基因分型试剂盒鉴定临床非结核分枝杆菌时间短、操作简单、结果准确，可在临床推广使用。

初治涂阳肺结核患者147例治疗2个月末痰培养结果分析

目的分析初诊涂阳肺结核患者治疗2个月末的痰培养情况。方法对147例初治涂阳肺结核患者治疗2个月后，采集痰液标本，采用BacT／ALERT3D仪快速液体培养，阳性培养物送浙江省疾控中心进行HAIN分子生物学试验；并与传统罗氏培养法进行比较。结果147例患者中，涂阳患者56例，痰培养阳性33例；涂阴患者91例，痰培养阳性15例，两者痰培养阳性率差异有统计学意义（χ2=28．4，P〈0．01）。Bact／ALERT3D快速培养分枝杆菌阳性45例（30．6％），传统罗氏固体培养阳性22例（15．0％），两种方法痰培养阳性率差异有统计学意义（χ2=10．26，P〈0．01）。Bact／ALERT3D从接种到HAIN试验出结果，平均需19．3d；传统罗氏培养法平均需3个月。结论初治涂阳肺结核患者治疗2个月末，仍有痰培养阳性患者，且Bact／ALERT3D快速培养法有利于较早及准确发现耐药患者。

GeneXpertMTB/RIF和Hain技术对痰涂片阴性肺结核诊断价值及利福平耐药性的评估

目的探讨利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(GeneXpertMTB/RIF)、线性探针(Hain)技术对痰涂片阴性肺结核的诊断价值及利福平耐药性的评估价值。方法选择2018年3月至2019年6月上海市浦东新区肺科医院收治的3次痰涂片阴性的疑似肺结核患者254例,对其行痰GeneXpertMTB/RIF、痰Hain技术、痰罗氏培养、绝对浓度法药敏试验。以痰罗氏培养结果为金标准,采用受试者工作特征曲线(ROC)分析GeneXpertMTB/RIF、Hain技术检测痰涂片阴性肺结核的效能;以绝对浓度法药敏试验结果为金标准分析GeneXpertMTB/RIF、Hain技术检测利福平耐药的效能。结果GeneXpertMTB/RIF诊断痰涂片阴性肺结核的敏感度、特异度、准确度分别为82.18%、86.93%、83.52%;Hain技术诊断痰涂片阴性肺结核的敏感度、特异度、准确度分别为67.33%、77.12%、73.23%;GeneXpertMTB/RIF评估利福平耐药性的敏感度、特异度、准确度分别为73.33%、98.84%、95.05%;Hain技术评估利福平耐药性的敏感度、特异度、准确度分别为86.67%、82.56%、83.17%。结论GeneXpertMTB/RIF对痰涂片阴性肺结核的诊断价值及利福平耐药性的评估价值优于Hain技术,GeneXpertMTB/RIF对痰涂片阴性肺结核的快速诊断及治疗具有较好的应用价值。

基于Haines跳跃模型的天然气重力驱微观驱替研究

为研究天然气重力驱微观驱油机理,应用理论模型Navier-Stokes方程的浸入边界数值求解方法,分析天然气重力驱条件下孔隙填充的机制和Haines跳越两种模式形成机理,确定了天然气重力驱中油气界面运移的3种状态(稳定驱替、黏性指进和毛管力指进)的形成规律.在此基础上,通过开展天然岩心铸体薄片刻画而成的孔隙仿真模型高温高压微观可视化实验,验证了毛管数Ca增大过程中天然气重力驱油气界面运移由稳定驱替逐渐向黏性指进和毛管力指进转化的规律.研究结果表明:当毛管数Ca小于1.0×10^(-3)时油气界面运移形成Haines折断跳跃,随着毛管数增加,Ca值大于2.5×10^(-3)时形成Haines无折断跳跃;相对较弱的表面张力导致黏性指进一般简单地沿着速度流线运动;当天然气注入速度小于1μL/min时,驱替过程油气界面可以保持动态稳定,采收率较高,模型构造中上部动用程度高,而构造下部原油动用效果较差;稳定驱过程(Ca<1×10^(-2),θ<100°)中驱替前期的油气界面形态主要由毛细管力主导,重力次之,黏滞力最弱;驱替过程中期稳定的界面主要转为重力主导,气体突破后驱替过程由黏滞力主导.