冠心病病人外周血微RNA-133b表达与预后的关系分析

目的 探究冠心病病人外周血微RNA-133b(miR-133b)表达水平,并分析其表达与病人预后的关系。方法 选取2019年7月至2021年1月于华北石油管理局总医院就诊的冠心病病人95例,其中稳定性冠心病(SACD)病人54例为SACD组,急性冠状动脉综合征(ACS)41例为ACS组,另选同期该院进行体检的健康人群60例作为对照组。采用实时荧光定量PCR法检测血清miR-133b水平;随访6个月,根据是否出现主要心脏不良事件,分为预后不良组(出现主要心脏不良事件,33例)和预后良好组(未出现主要心脏不良事件,62例)。采用Spearman相关性分析检验血清miR-133b水平与Gensini评分的关系;采用多因素logistic回归分析影响冠心病病人预后的危险因素;采用受试者操作特征曲线(ROC曲线)分析血清miR-133b水平对冠心病病人预后不良的预测价值。结果 SACD组、ACS组身体质量指数、高血压、吸烟史及血脂异常者比例高于对照组(P<0.05),ACS组Gensini评分、病变支数≥3支占比高于SACD组(P<0.05)。ACS组、SACD组血清miR-133b(1.59±0.15比1.36±0.12比1.02±0.05)水平均高于对照组(P<0.05),ACS组血清miR-133b水平高于SACD组(P<0.05)。SACD组病人血清miR-133b水平与Gensini评分呈正相关(r=0.58,P<0.001),ACS组病人血清miR-133b水平与Gensini评分也呈正相关(r=0.57,P<0.001)。预后不良组病人Gensini评分、血清miR-133b水平及病变支数≥3支占比高于预后良好组(P<0.05)。Gensini评分、病变支数、miR-133b均为影响冠心病病人预后的危险因素(P<0.05)。血清miR-133b水平预测冠心病病人预后不良的曲线下面积为0.83,最佳截断值为1.55,灵敏度高达97.0%,特异度为64.5%。结论 冠心病病人血清miR-133b水平升高,对病人的预后不良有一定的预测价值。

RohA信号通路介导miR-133b调控脑缺血再灌注后血脑屏障通透性

目的:探究miR-133b在脑缺血再灌注后血脑屏障通透性调控中的作用及其机制。方法:采用大脑中动脉闭塞再灌注(MCAO/R)小鼠模型,小鼠脑内注射miR-133b agomir进行miR-133b过表达,TTC染色检测miR-133b过表达对小鼠脑梗死体积的影响;实时定量PCR检测MCAOR小鼠缺血侧脑组织及外周血miR-133b表达水平;采用悬挂实验评估miR-133b过表达对MCAO/R模型小鼠神经功能改善的影响;Western blot及ELISA检测miR-133b过表达对MCAO/R模型小鼠脑内RohA、claudin-5、ZO-1表达水平的影响;采用伊文思蓝渗透法评估小鼠血脑屏障通透性。结果:在MCAO/R模型小鼠缺血侧脑皮层组织与血浆中的miR-133b表达水平均降低,miR-133b过表达可显著减少MCAO/R小鼠脑梗死的体积,改善小鼠神经功能损害;miR-133b过表达可使MCAO/R小鼠脑内缺血区RohA、claudin-5、ZO-1蛋白表达显著降低。结论:小鼠脑缺血再灌注后体内miR-133b表达水平下降,miR-133b过表达具有降低脑缺血再灌注后脑血屏障通透性,发挥抗脑缺血作用,其机制可能是通过RohA信号通路介导的。

地红方通过miR-133b/DUSP1/JNK通路干预糖尿病肾病氧化应激损伤

目的研究地红方对糖尿病肾病细胞模型氧化应激损伤的影响。方法地红方含药血清制备,小鼠肾小球系膜细胞常规培养、传代。按以下分组:对照组(5.5mmol/L葡萄糖+正常血清)、高糖组(30mmol/L葡萄糖+正常血清)、地红方低剂量组(30mmol/L葡萄糖+5%地红方含药血清)、地红方中剂量组(30mmol/L葡萄糖+10%地红方含药血清)、地红方高剂量组(30mmol/L葡萄糖+20%地红方含药血清)。采用实时荧光定量PCR检测miR-133b、DUSP1 mRNA表达。Western blotting检测DUSP1、p-JNK、Drp1、Fis1蛋白表达。Elisa检测SOD、MDA表达。结果与高糖组比较,地红方组miR-133b、MDA、p-JNK、Drp1、Fis1表达明显下降(P<0.05),而DUSP1、SOD表达显著升高(P<0.05)。结论地红方可通过miR-133b/DUSP1/JNK通路调控线粒体分裂改善糖尿病肾病氧化应激损伤。

参麦地黄汤联合缬沙坦对糖尿病肾病患者氧化应激、血管内皮功能及血清miR-133b、miR-135b的影响

目的探究参麦地黄汤联合缬沙坦对糖尿病肾病患者氧化应激、血管内皮功能及血清miR-133b、miR-135b的影响。方法选取2017年1月至2020年10月于江阴市中医院门诊就诊的90例糖尿病肾病患者为研究对象,依据随机数字表法将其分为对照组、观察组各45例。对照组采用缬沙坦分散片口服治疗,观察组在对照组治疗基础上加服参麦地黄汤。2组疗程均为3个月,治疗前后评估2组患者中医证候积分变化,检测2组患者空腹血糖(FPG)和血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、尿微量白蛋白/肌酐比值(UACR)、氧化应激指标[超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)]、血管内皮功能指标[可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)及内皮素-1(ET-1)]及miR-133b、miR-135b变化。结果治疗后,2组患者中医症候积分、FPG、SCr、BUN、UACR及MDA、sICAM-1、ET-1、miR-133b、miR-135b表达水平均显著下降,SOD活性明显升高(P<0.01),观察组优于对照组(P<0.01)。观察组治疗总有效率高于对照组(P<0.01)。结论参麦地黄汤联合缬沙坦可有效改善糖尿病肾病临床症状,可能与其调控机体氧化应激、血管内皮功能、血清miR-133b、miR-135b水平有关。

MicroRNA-133b调节FGFR1-ERK1/2-SOX2信号通路对裸鼠肺癌NCI-H1975细胞移植瘤生长的影响

目的探讨microRNA-133b(miR-133b)对裸鼠肺癌NCI-H1975细胞移植瘤生长的抑制作用以及对成纤维细胞生长因子受体1-细胞外信号调节激酶1/2-性别决定区Y-box蛋白2信号通路(FGFR1-ERK1/2-SOX2)的影响。方法q RT-PCR检测人肺成纤维细胞、肺癌细胞株miR-133b表达。miR-133b过表达NCIH1975细胞。将NCI-H1975细胞分为对照组、mimic NC组、miR-133b mimic组、miR-133b mimic+pcDNA3.1组、miR-133b mimic+pcDNA3.1 FGFR1组。CCK-8法检测NCI-H1975细胞增殖抑制率,Transwell实验观察NCI-H1975细胞侵袭、迁移情况。复制裸鼠移植瘤模型并分组,将裸鼠分为对照组、mimic NC组、miR-133b mimic组、miR-133b mimic+AZD4547组,观察各组裸鼠肿瘤体积与重量,HE染色观察各组裸鼠肿瘤组织变化,TUNEL检测肿瘤组织细胞凋亡情况,免疫组织化学法观察裸鼠肿瘤组织Ki-67、Cyclin D1、VEGF-A的表达,Western blotting检测各组肿瘤组织FGFR1、p-ERK1/2/ERK1/2、SOX2蛋白相对表达量。结果与人肺成纤维细胞HLF-α比较,肺癌细胞株NCI-H1975、A427、NGE-1、A549中miR-133b mRNA相对表达量降低(P<0.05),其中以NCI-H1975细胞中miR-133b mRNA相对表达量最低。miR-133b mimic组miR-133b mRNA相对表达量较对照组和mimic NC组升高(P<0.05)。miR-133b可通过负调控FGFR1抑制肺癌NCIH1975细胞增殖和迁移。miR-133b mimic组移植瘤重量较对照组降低、体积缩小,miR-133b mimic+AZD4547组移植瘤重量较miR-133b mimic组降低、体积缩小(P<0.05)。miR-133b mimic组空泡样变性程度较对照组、mimic NC组减轻(P<0.05),miR-133b mimic+AZD4547组空泡样变性程度较miR-133b mimic组减轻(P<0.05)。miR-133b mimic组肿瘤组织细胞凋亡率较对照组升高(P<0.05),miR-133b mimic+AZD4547组肿瘤组织细胞凋亡率较miR-133b mimic组升高(P<0.05)。miR-133b mimic组VEGF-A、Cyclin D、Ki-67阳性细胞比例较对照组降低(P<0.05),miR-133b mimic+AZD4547组VEGF-A、Cyclin D、Ki-67阳性细胞比例较miR-133b mimic组降低(P<0.05)。miR-133b mimic组FGFR1、p-ERK1/2/ERK1/2、SOX2蛋白相对表达量较对照组降低(P<0.05),miR-133b mimic+AZD4547组FGFR1、p-ERK1/2/ERK1/2、SOX2蛋白相对表达量较miR-133b mimic组降低(P<0.05)。结论miR-133b过表达可能通过抑制FGFR1-ERK1/2-SOX2轴,抑制裸鼠肺癌NCI-H1975细胞移植瘤生长。

miR-133b、Bcl-w在老年食管鳞癌中表达及相关机制

目的探讨microRNA(miR)-133b、B细胞淋巴瘤(Bcl)-w在老年食管鳞状细胞癌中的表达及对食管鳞状细胞癌细胞的影响。方法使用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测30例老年患者食管鳞状细胞癌组织及其对应癌旁组织中miR-133b及Bcl-w mRNA表达。将miR-133b mimics及阴性对照转染至食管鳞状细胞癌ECA109细胞株,检测转染效率。检测转染后ECA109细胞的增殖和凋亡情况,使用TargetScan和miRDB软件预测miR-133b的靶基因,并通过双荧光素酶报告实验方法验证,Western印迹检测靶基因Bcl-w蛋白表达。结果食管鳞状细胞癌中miR-133b mRNA表达量明显低于癌旁组织(P<0.001),而食管鳞状细胞癌中Bcl-w蛋白表达量明显高于癌旁组织(P<0.001),miR-133b与Bcl-w表达呈负相关(r=-0.792,P<0.01)。miR-133b mimics转染能明显上调ECA109细胞中的miR-133b水平,并明显降低其增殖能力,明显促进其凋亡(P<0.001)。miR-133b与Bcl-w存在靶向调控关系,过表达miR-133b可明显下调Bcl-w蛋白表达水平(P<0.05)。结论miR-133b可能通过靶向下调Bcl-w基因的表达抑制食管鳞状细胞癌细胞的增殖并促进其凋亡。

miR-133b与慢性乙型肝炎肝纤维化相关性研究

目的:探究miR-133b与慢性乙型肝炎(CHB)肝纤维化(HF)的相关性。方法:收集144例CHB患者(CHB组)和50例健康体检者。测定两组血清miR-133b、结缔组织生长因子(CTGF)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、透明质酸酶(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-Col);改良HAI Ishak系统评估CHB患者肝脏纤维化情况。比较分析不同肝脏纤维化患者miR-133b、CTGF、TGF-β1、HA、PCⅢ、Ⅳ-Col及其相关性。结果:与对照组比,CHB组患者的miR-133b水平明显下降,CTGF、TGF-β1、HA、PCⅢ、Ⅳ-Col水平显著升高,比较差异具有统计学意义(均P<0.01)。不同肝脏纤维化程度CHB患者的miR-133b、TGF-β1、CTGF、HA、PCⅢ和Ⅳ-Col水平间比较差异存在统计学意义(均P<0.01),高纤维化患者的miR-133b<低纤维化<无纤维化,高纤维化患者的CTGF、TGF-β1、HA、PCⅢ和Ⅳ-Col水平>低纤维化>无纤维化(均P<0.01)。Pearson相关系数法分析显示,CHB患者miR-133b水平与肝脏纤维化评分、CTGF、TGF-β1、HA、PCⅢ和Ⅳ-Col水平均呈负相关(均P<0.01)。结论:miR-133b低表达可能参与CHB患者HF发生发展过程,可能与其表达下降影响对CTGF表达的抑制作用有关。

miR-133b在子宫内膜癌中的表达及临床意义

目的探讨微小RNA-133b(miR-133b)在子宫内膜癌(EC)中的表达及临床意义。方法以该院2020年1月至2022年6月在宫腔操作中收集的EC癌变组织(EC组)、子宫内膜增生组织(增生组)和正常子宫内膜组织(对照组)各66例为研究对象。测定3组子宫内膜组织标本中miR-133b表达水平,检测EC组标本中人附睾蛋白4(HE4)、糖类抗原125(CA125)和雌激素受体(ER)表达。对比3组miR-133b表达水平,分析不同临床病理特征EC患者的miR-133b表达水平,分析EC患者miR-133b水平与HE4和CA125表达的相关性,采用受试者工作特征(ROC)曲线评估miR-133b对EC、EC病理分期及淋巴结转移的诊断价值。结果EC组子宫内膜组织miR-133b表达水平显著低于增生组和对照组(P<0.05)。FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移、HE4阳性、CA125阳性的EC患者子宫内膜组织miR-133b表达水平均显著低于FIGO分期Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移、HE4阴性、CA125阴性患者(P<0.05),但不同年龄、病理分型、细胞分化深度、肌层浸润程度和ER表达状况的EC患者子宫内膜组织miR-133b表达水平间差异均无统计学意义(P>0.05)。相关性分析显示,EC组子宫内膜组织miR-133b表达水平与FIGO分期、淋巴结转移、CA125表达、HE4表达呈负相关(r=-0.445、-0.405、-0.445、-0.534,P<0.05)。ROC曲线分析显示,子宫内膜组织中miR-133b表达水平对EC[曲线下面积(AUC)为0.802,95%CI:0.726~0.877]、EC FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期(AUC为0.765,95%CI:0.650~0.880)及淋巴结转移(AUC为0.826,95%CI:0.756~0.895)均具有一定诊断价值(P<0.05)。结论miR-133b在EC患者子宫内膜组织中低表达,其低表达会促进肿瘤细胞增殖、转移,且对EC、病理分期和淋巴结转移均具有一定的诊断价值。

老年AECOPD患者痰培养结果与外周血单个核细胞miR-125b、miR-133、miR-146a的相关性研究

目的观察老年慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者痰培养结果与外周血单个核细胞(PBMC)中微小RNA(miR)-125b、miR-133、miR-146a的相关性。方法回顾性选取2021年1月至12月在江苏东南大学附属南京同仁医院收治的79例老年AECOPD患者为AECOPD组,根据痰培养结果分为阳性组(n=39)和阴性组(n=40);另选取同期在该院收治的43例老年COPD稳定期患者作为COPD稳定组。检测PBMC中miR-125b、miR-133、miR-146a相对表达量与血清中炎症相关指标[降钙素原(PCT)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)]水平,分析各组间指标差异,并采用Spearman相关性分析AECOPD患者PBMC中miR-125b、miR-133、miR-146a与血清炎症指标的相关性。结果AECOPD组患者PBMC中miR-125b相对表达量、血清PCT、TNF-α、IL-6水平为0.87、0.38 ng/mL、41.98μg/L、250.01 pg/mL,高于COPD稳定组(0.49、0.05 ng/mL、21.16μg/L、83.63 pg/mL),miR-133、miR-146a相对表达量为0.57、0.56低于COPD稳定组(0.86、0.89),差异均有统计学意义(P<0.05)。AECOPD阳性组患者PBMC中miR-125b相对表达量、血清PCT、TNF-α、IL-6水平为0.94、0.42 ng/mL、50.38μg/L、273.93 pg/mL,水平高于阴性组(0.82、0.14 ng/mL、38.22μg/L、178.18 pg/mL),miR-133、miR-146a相对表达量0.55、0.40,低于阴性组(0.80、0.78),差异均有统计学意义(P<0.05)。PBMC中miR-125b水平与PCT、TNF-α、IL-6水平呈正相关(r=0.349、0.502、0.329,P<0.05),miR-133、miR-146a水平与PCT、TNF-α、IL-6水平呈负相关(r=-0.368、-0.411、-0.352;r=-0.389、-0.425、-0.374,P<0.05)。结论老年AECOPD痰培养阳性患者miR-125b呈现高表达,miR-133、miR-146a呈现低表达。

Hsa-miR-133b影响人乳腺癌MCF-7细胞增殖及FSCN1蛋白表达的研究

目的:研究Has-miR-133b真核表达载体在人乳腺癌MCF-7细胞中的表达及对细胞增殖和对靶蛋白FSCN1表达的影响。方法:构建pEZX MR04-133b真核表达载体,瞬时转染乳腺癌MCF-7细胞,RT-PCR法检测miRNA-133b在转录水平的表达,MTT检测其对细胞增殖的影响。利用生物信息学的方法,根据Tarbase数据库预测miR-133b的靶基因,并进行基因功能初步分析。Western blot检测miR-133b对细胞中FSCN1蛋白表达情况的影响。结果:真核表达载体pEZX MR04-133b成功转染MCF-7细胞,并经RT-PCR检测可有效表达,MTT结果显示miR-133b能明显降低MCF-7细胞的相对增殖率。Western blot结果显示FSCN1为miR-133b在MCF-7细胞中的作用靶点之一。结论:构建了真核表达载体pEZX MR04-133b,转染乳腺癌MCF-7细胞后能有效表达,并以FSCN1基因作为作用靶点。

微小RNA-133b和M2型丙酮酸激酶在食管鳞癌组织中的表达及临床意义

目的分析并探讨微小RNA-133b(miR-133b)和M2型丙酮酸激酶(M2 pyruvate kinase,PKM2)在食管鳞癌组织中的表达及临床意义。方法选取2020年1月至2021年12月于西南医科大学附属医院收治的72例食管鳞癌患者手术切除的癌组织作为研究组;配对癌旁正常食管组织作为对照组。采用原位杂交技术检测miR-133b的表达,运用免疫组化法检测PKM2的表达。比较两组miR-133b、PKM2表达差异,分析食管鳞癌组织miR-133b与PKM2表达的相关性及与肿瘤浸润深度、分化程度、淋巴结转移等临床病理特征的关系。结果miR-133b在对照组中的表达水平显著高于研究组,差异有显著性(P<0.05)。PKM2在研究组中的表达水平显著高于对照组,差异有显著性(P<0.05)。miR-133b低表达组PKM2高表达率显著高于miR-133b高表达组,差异有显著性(P<0.05)。Spearman相关性分析结果显示,miR-133b和PKM2在食管鳞癌组织中的表达呈显著负相关(r=-0.532,P=0.000)。食管鳞癌组织中miR-133b的表达水平与患者性别、年龄、肿瘤部位、病理类型、肿瘤直径、病理分级、浸润深度、脉管转移、神经转移及淋巴结转移均无关(P>0.05)。PKM2在男性、高龄(年龄≥60岁)、发生于食管下段、溃疡型、肿瘤直径≤5cm、高/中分化、发生脉管转移和淋巴结转移的食管鳞癌患者中高表达率更高(P<0.05)。49例食管鳞癌淋巴结转移组织中,PKM2高表达率显著高于miR-133b(P<0.05)。结论食管鳞癌组织中,miR-133b表达下调,PKM2表达上调。miR-133b可能通过下调PKM2的表达从而抑制食管鳞癌的浸润转移。

CD_(133)、CD_(44)、CD_(11b)在急性髓系白血病中的表达及其与临床预后的相关性研究

目的探讨CD_(133)、CD_(44)、CD_(11b)在急性髓系白血病(AML)中的表达,并分析CD_(133)、CD_(44)、CD_(11b)与临床预后的相关性。方法选取2020年12月至2022年6月在我院诊治的AML患者50例作为试验组,并选取同期入院的良性血液病患者20例作为对照组,比较两组CD_(133)、CD_(44)、CD_(11b)阳性表达情况,并分析CD_(133)阳性与阴性、CD_(44)阳性与阴性、CD_(11b)阳性与阴性的临床治疗疗效,以及复发情况和预后生存情况。结果试验组CD_(133)阳性率、CD_(44)阳性率、CD_(11b)阳性率分别为42.00%、52.00%、46.00%,明显高于对照组的10.00%、5.00%、15.00%(P<0.05)。CD_(133)阴性的临床治疗疗效优于CD_(133)阳性,且CD_(133)阴性的CR率为57.14%,明显高于CD_(133)阳性的23.53%(P<0.05);CD_(44)阴性的临床治疗疗效优于CD_(44)阳性,且CD_(44)阴性的CR率为70.83%,明显高于CD_(44)阳性的14.29%(P<0.05);CD_(11b)阴性的临床治疗疗效优于CD_(11b)阳性,且CD_(11b)阴性的CR率为59.26%,明显高于CD_(11b)阳性的22.22%(P<0.05)。CD_(133)阳性、CD_(44)阳性、CD_(11b)阳性患者复发率分别为63.16%、66.67%、61.11%,明显高于CD_(133)阴性、CD_(44)阴性、CD_(11b)阴性患者(36.84%、33.33%、38.89%)(P<0.05)。Log Rank(Mantel-Cox)检验显示,CD_(133)阴性、CD_(44)阴性、CD_(11b)阴性患者1年OS率分别为79.31%、83.33%、81.48%,明显高于CD_(133)阳性、CD_(44)阳性、CD_(11b)阳性患者的47.62%、50.00%、47.83%(P<0.05)。结论AML患者CD_(133)、CD_(44)、CD_(11b)阳性表达较高,且CD_(133)、CD_(44)、CD_(11b)阳性患者治疗疗效较差,复发率较高,预后生存较差。

慢性心力衰竭患者血清miR-133a、miR-133b水平与心功能和心肌重构的关系

目的探讨慢性心力衰竭(CHF)患者血清miR-133a、miR-133b水平与心功能、心肌重构的关系。方法研究对象为132例CHF患者。心功能NYHA分为Ⅰ~Ⅱ级43例,Ⅲ级52例,Ⅳ级37例。超声心动图检查检测心功能指标心输出量(CO)、左室射血分数(LVEF)及左室舒张末期内径(LVEDD)、左心房内径(LAP)、左心室后壁厚度(LVPW)、左室质量指数(LVMI)、左室重构指数(LVRI)。实时荧光定量PCR法检测血清miR-133a、miR-133b。结果 CHF患者血清miR-133a、miR-133b表达量随心功能分级升高而升高(P均<0.05)。LVEDD、LAP、LVPW、LVMI随心功能分级升高而升高,LVRI、CO、LVEF随心功能分级升高而降低(P均<0.05)。血清miR-133a、miR-133b相对表达量与CO、LVEF均呈负相关(r分别为-0.584、-0.622,-0.477、-0.514,P均<0.05)。miR-133a、miR-133b相对表达量与LAP、LVPW、LVMI均呈正相关(r分别为0.724、0.638,0.681、0.611,0.596、0.573,P均<0.05)。血清miR-133a、miR-133b相对表达量与LVEDD、LVRI无关(P均>0.05)。结论 CHF患者血清miR-133a、miR-133b表达量随心功能分级升高而升高。检测CHF患者血清miR-133a、miR-133b有助于判断患者心室重构情况。

急性心肌梗死患者循环血浆中miR-133a、miR-133b表达的研究

目的分析miR-133a、miR-133b在急性心肌梗死(AMI)患者血浆中的表达,并探讨miR-133a、miR-133b在诊断AMI中的应用价值。方法选取2017年1月至2017年12月于西安交通大学第一附属医院胸痛中心就诊的AMI患者为观察组(n=89),同期就诊于西安交通大学第一附属医院体检中心的既往无心脏病史,心电图正常的对照人群37例为正常对照组(n=37)。收集所有受试者的临床资料并提取血浆标本,实时定量PCR法检测循环血浆中miR-133a及miR-133b的表达水平。应用受试者工作特征曲线ROC评估对AMI的辅助诊断价值。结果AMI患者血浆中miR-133a及miR-133b的含量较正常对照组显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05);受试者工作特征曲线(ROC)分析表明:miR-133a的ROC曲线下面积AUC值为0.845(P<0.01),敏感度为84.5%,特异性为69.0%,漏诊率为15.5%,误诊率31.0%;miR-133b的ROC曲线下面积AUC值为0.702(P<0.01),敏感度为70.2%,特异性为51.7%,漏诊率为29.8%,误诊率为48.3%。结论循环miR-133a及miR-133b在诊断AMI方面具有较好的特异性和敏感性,可作为AMI诊断的生物学标志物。

miR-133b通过靶向调控EGFR影响食管鳞癌的侵袭、转移

目的探讨miR-133b在食管鳞癌侵袭、转移过程中的作用及机制。方法使用生物信息学工具预测miR-133b的靶基因;双荧光素酶报告基因实验验证miR-133b对靶基因表皮生长因子受体(EGFR)的直接靶向调控作用;细胞增殖实验、划痕实验和Transwell实验检测miR-133b的不同表达对食管鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响;qRT-PCR验证miR-133b与EGFR在食管鳞癌组织中的表达,并分析miR-133b与食管鳞癌临床病理特征之间的关系。结果生物信息学工具预测EGFR为miR-133b的靶基因,双荧光素酶报告基因实验证实miR-133b可与EGFR 3'UTR片段结合;体外实验通过上调食管鳞癌细胞中miR-133b的表达使细胞的增殖受阻(ECA109:P<0.05,KYSE150:P<0.01);细胞的迁移(ECA109:P<0.01,KYSE150:P<0.01)和侵袭能力(EC5A109:P<0.01,KYSE150:P<0.01)显著减弱。在食管鳞癌组织中miR-133b与EGFR的表达呈负相关性(P<0.01),且miR-133b的表达与食管鳞癌的TNM分期、淋巴结转移显著相关(P均<0.05)。结论 miR-133b可能通过下调EGFR的表达,抑制食管鳞癌的增殖、侵袭和转移,在食管鳞癌的演进中起负调控作用。

miR-133b靶向PKM2基因对肺癌A549干细胞增殖及药物敏感性的影响

背景与目的已有研究表明miR-133b可抑制肺癌细胞生长,miR-133b表达水平在肺癌组织及患者血清中显著降低,miR-133b通过靶向丙酮酸激酶M2型(pyruvate kinase isozyme type M2,PKM2)基因提高鳞癌细胞的放疗敏感性,但其机制尚未明了。本研究通过提取非小细胞肺癌细胞株A549的CD133^+/CD34^+干细胞,研究miR-133b对其增殖及顺铂类药物(cisplatin,DDP)敏感性的影响,探讨miR-133b与PKM2基因的关系,以及它们在肺癌干细胞中的作用。方法使用miRBase和miRNAMap数据库进行miR-133b与PKM2基因的序列比对。应用免疫磁珠分选法从A549细胞中分选出CD133^+/CD34^+肺癌干细胞,流式细胞仪检测纯度。转染miR-133b进入CD133^+/CD34^+细胞,qRT-PCR检测验证miR-133b表达情况,CCK8法检测细胞增殖情况;15μg/mL DDP处理转染miR-133b细胞,检测0 h、12 h、24 h、72 h的细胞凋亡情况;采用Western blot检测PKM2蛋白水平的表达。结果PKM2基因可能为miR-133b的靶基因;流式结果显示CD133^+/CD34^+细胞的纯度为(92.15+4.27)%。qRT-PCR结果显示,与对照组相比,过表达miR-133b后,miR-133b明显上调,miR-133b抑制表达后,miR-133b明显下调(P<0.05)。细胞增殖实验及Western blot结果显示,与对照组相比,miR-133b mimics组细胞的增殖能力显著降低(P<0.05),PKM2蛋白水平明显降低(P<0.05);而抑制miR-133b表达则明显增加细胞的增殖能力及PKM2蛋白水平(P<0.05)。DDP处理12 h后miR-133b mimics组细胞的凋亡持续明显高于对照组(P<0.05)。miR-133b mimics+DDP组PKM2蛋白的表达明显低于对照组及miR-133b inhibitor组(P<0.05)。结论过表达miR-133b能够通过下调PKM2而抑制肺癌干细胞的生长和增殖,并且可以增强肺癌干细胞对DDP的敏感性。

血清微小核糖核酸-133b水平与老年糖尿病肾病患者肾脏损伤及预后的相关性

目的探讨血清微小核糖核酸-133b(miR-133b)水平与老年糖尿病肾病(DN)患者肾脏损伤及预后的关系。方法入选2016年1月至2017年12月海南省人民医院肾病风湿科收治的182例老年DN患者(DN组)及同期来本院进行体检的80名健康人群(对照组),比较2组miR-133b水平及其水平与老年DN患者不同临床指标的关系。采用肾病分级、间质性纤维化和小管萎缩(IFTA)评分、间质炎症来评价肾脏损伤情况,分析不同肾脏损伤程度和miR-133b水平的相关性。根据DN组miR-133b水平平均值将182例患者分为低表达组与高表达组,分析2组miR-133b水平与患者预后的关系。利用2-△△Ct法计算miR-133b的相对表达水平。采用SPSS 19.0统计软件对数据进行分析,根据数据类型,组间比较采用单因素方差分析、成组t检验或χ~2检验。相关性分析采用Pearson法。结果 DN组血清miR-133b水平显著高于对照组,差异有统计学意义[(5.38±1.28)vs(1.06±0.25),P<0.01]。不同的糖尿病病程、24 h尿蛋白定量、血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)及估算肾小球滤过率(e GFR)间血清miR-133b水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。不同肾病分级、IFTA评分及间质炎症分级间血清miR-133b水平比较,差异亦有统计学意义(P<0.05),且随着肾脏病理损伤程度的增加,血清miR-133b水平显著升高(P<0.05)。Pearson相关分析显示,患者血清miR-133b水平与24 h尿蛋白定量、SCr、BUN、肾病分级、IFTA及间质炎症呈正相关(r分别为0.492、0.382、0.415、0.463、0.338、0.547,P<0.01),与e GFR水平呈负相关(r=-0.625,P<0.01)。182例老年DN患者最终有76例发展为终末期肾病(ESRD),其中miR-133b高表达组(65.9%,58/88)相对于低表达组(19.1%,18/94)发展为ESRD的比例显著增加(χ2=6.175,P=0.006)。结论血清miR-133b水平在老年DN患者中明显增高,且与老年DN患者肾脏损伤及预后不良有关,miR-133b水平较高的患者肾脏损伤程度较严重且预后较差。

非小细胞肺癌患者血清miR-133b表达变化及其意义

目的检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清miR-133b相对表达量的变化并探讨其临床意义。方法选择2012年1月~2015年5月我院收治的92例NSCLC患者为观察组,同期100名健康体检者为对照组。采用qRT-PCR法检测两组患者血清miR-133b相对表达量,分析观察组NSCLC患者血清miR-133b相对表达量与NSCLC患者临床病理参数和预后的关系。结果观察组、对照组血清miR-133b相对表达量分别为(0.95±1.56)、(1.92±1.61),两组相比,P<0.05。NSCLC患者血清miR-133b表达水平与患者吸烟史、肿瘤分化程度、淋巴结转移和TNM分期有关(P均<0.05)。NSCLC患者中,血清miR-133b高表达者1年生存率为76.79%(43/56),血清miR-133b低表达者1年生存率为52.78%(19/36),二者1年生存率相比,P<0.05。结论 NSCLC患者血清miR-133b相对表达量低于健康成年人。检测NSCLC患者血清miR-133b相对表达量有助于NSCLC的诊断、病情判断及预后评估。

膀胱尿路上皮癌中miR-133b的表达及其临床意义

目的探讨miR-133b在膀胱癌组织中的表达及其临床意义。方法该研究采用茎环实时荧光逆转录聚合酶链反应(stem-loop real-time,RT-PCR)检测膀胱尿路上皮癌组织和癌旁正常组织中miR-133b的表达丰度,分析miR-133b在不同组织中的表达差异及其与膀胱尿路上皮癌临床病理因素间的关系,探讨miR-133b在膀胱癌发生与进展中的重要作用。结果采用Real-time PCR方法检测41例膀胱尿路上皮癌及配对癌旁正常组织miR-133b的相对表达量,结果显示miR-133b在膀胱尿路上皮癌组织中的表达量较癌旁正常组织明显降低(P<0.001),癌旁正常组织中的表达量是癌组织中的3.02倍。同时发现miR-133b的表达量与肿瘤病理级别存在显著相关(P<0.01),即肿瘤恶性程度越高(高级别组)miR-133b的表达量越低。结论与癌旁正常组织比较,miR-133b在癌组织中呈明显低表达,且与肿瘤病理分级显著相关,提示miR-133b可能在膀胱癌发病过程中发挥重要作用。

微小RNA-133b对心肌纤维化的影响

目的研究微小RNA-133b(miR-133b)对心肌纤维化的影响。方法选取人心肌成纤维细胞(CFs),采用CCK8检测过表达及敲低miR-133b时细胞增殖情况,qRT-PCR及Westernblot检测结缔组织生长因子(CTGF)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ)及Ⅲ型胶原蛋白(collagenⅢ)的表达水平;生物学软件预测miR-133b的靶基因,双荧光素酶报告实验证实miR-133b与靶基因的直接调控作用。结果qRT-PCR检测结果显示,转染miR-133bmimic后miR-133b的表达水平明显高于阴性对照组(t=26.219,P=0.000),转染miR-133binhibitor后miR-133b的表达水平明显低于阴性对照组(t=6.738,P=0.003)。转染CFs21、45、69、93和117h后,与阴性对照组相比,miR-133bmimic组CFs增殖能力明显降低,而miR-133binhibitor组CFs增殖水平明显上升(P均<0.05)。与阴性对照组相比,过表达miR-133b后,CTGF(t=9.213,P=0.001;t=8.195,P=0.001)、α-SMA(t=6.511,P=0.003;t=4.434,P=0.011)、collagenⅠ(t=3.172,P=0.034;t=4.053,P=0.015)及collagenⅢ(t=6.404,P=0.003;t=5.319,P=0.006)的mRNA和蛋白表达水平均明显下调;敲低miR-133b后,CTGF(t=9.439,P=0.001;t=14.100,P=0.000)、α-SMA(t=4.519,P=0.011;t=4.377,P=0.012)、collagenⅠ(t=5.966,P=0.004;t=5.514,P=0.005)及collagenⅢ(t=4.622,P=0.010;t=4.996,P=0.008)的mRNA和蛋白表达水平均明显上升。共转染miR-133bmimic和WT3’UTR表达载体细胞的相对荧光素酶活性明显低于共转染mimiccontrol和WT3’UTR表达载体的细胞(t=5.654,P=0.005),共转染miR-133bmimic和MUT3’UTR表达载体细胞的相对荧光素酶活性与共转染mimiccontrol和MUT3’UTR表达载体的细胞差异无统计学意义(t=0.380,P=0.724)。结论miR-133b可能是通过靶向抑制CTGF来影响CFs的活化增殖,从而改善心肌纤维化。