高分化肝细胞癌19例临床病理分析

目的探讨高分化肝细胞癌(HCC)的临床病理特征及鉴别诊断要点。方法收集19例高分化肝细胞癌,对其临床及病理特征进行观察,并进行免疫组化染色分析。结果 19例高分化肝细胞癌,男性12例,女性7例,年龄35~72岁,平均57岁,14例有慢性肝炎病史。巨检:肿瘤最大径0.6 cm^2 cm,平均1.5 cm。镜下肿瘤多呈梁索状排列,梁索状细胞超过3层,细胞密度增加,有轻度异型性,有假腺样结构,部分可见脂肪变性。免疫组化:15例glypican3(GPC3)(+),阳性率78.9%(15/19);4例AFP(+),阳性率21.1%(4/19);所有患者CD34显示特有毛细血管化的丰富血管;9例CD10(+),阳性率为47.4%(9/19);Ki-67阳性指数为10%。结论高分化肝细胞癌病理诊断比较困难,需要与肝细胞腺瘤、肝脏局灶性结节性增生、肝上皮样血管平滑肌脂肪瘤等进行鉴别,免疫组化尤其是GPC3(+)和血管CD34阳性表达模式对鉴别诊断高分化肝细胞癌具有重要的参考价值。

甲胎蛋白对人肝癌Bel 7402细胞caspase信号传递及耐受TRAIL的影响

目的研究甲胎蛋白(AFP)对人肝癌Bel 7402细胞内caspase信息通路信号传递的影响,以及对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导肝癌细胞凋亡的对抗作用。方法激光共聚焦显微镜观察AFP与caspase-3、caspase-8在Bel 7402细胞内的共定位;免疫共沉淀(Co-IP)技术研究AFP与caspase-3、caspase-8的相互作用;RNA干扰(RNAi)技术封阻AFP表达,并用Western blotting检测RNAi干扰肝癌Bel 7402细胞内AFP表达的效果;用蛋白酶活性比色法检测AFP对肝癌细胞caspase-3、caspase-8活性的影响;MTT法分析干扰AFP表达30 h后再给予TRAIL(2 nmol/L)处理24 h,Bel 7402细胞的生长情况,并用荧光显微镜观察经TRAIL处理后肝癌细胞的凋亡状况。结果共聚焦显微镜观察发现AFP、caspase-3、caspase-8主要表达于Bel 7402细胞的细胞质,发现AFP能与caspase-3共定位于细胞质,但与caspase-8在细胞质的共定位可能性很小;Co-IP技术研究发现AFP能与caspase-3结合,但不能与caspase-8结合;2 nmol/L剂量的TRAIL单独处理Bel 7402细胞并不能显著改变caspase-3活性,但能提升caspase-8活性,而用全反式维甲酸(ATRA)40μmol/L加TRAIL(2 nmol/L)处理时,则能提高Bel 7402细胞caspase-3活性;干扰AFP表达后,单独用TRAIL(2 nmol/L)也能激活caspase-3,而干扰AFP表达前后对caspase-8活性没有显著性改变;MTT分析发现,2 nmol/L剂量的TRAIL对Bel 7402细胞的生长并没有显著性抑制作用,但是干扰AFP表达后TRAIL(2 nmol/L)能明显抑制Bel 7402细胞生长(抑制率为48.4%);荧光显微镜观察表明,干扰AFP表达后TRAIL(2 nmol/L)能诱导Bel 7402细胞凋亡。结论AFP选择性抑制caspase-3活性是阻断人肝癌Bel7402细胞内凋亡信息传递的重要机制,也是AFP抵抗TRAIL诱导肝癌细胞凋亡的关键环节。

原发性肝癌合并胆管癌栓12例的外科治疗体会

目的探讨原发性肝癌合并胆管癌栓的外科手术治疗情况及治疗效果。方法回顾性分析原发性肝癌伴胆管癌栓12例的外科治疗情况。结果本组1例术后15d死于肝细胞功能衰竭,其他11例均定期随访。随访1、2、3年,生存率分别为66.7%(8/12),16.7%(2/12),8.3%(1/12),平均生存时间为14.1个月。结论原发性肝癌合并胆管癌栓行外科手术治疗能明显改善患者生活质量,延长生存时间,而根治性手术是本病最为理想的手术方式。

BCLC B期肝细胞癌的外科疗效及预后危险因素

目的探讨手术治疗BCLC B期肝细胞癌的疗效及预后危险因素。方法分析东方肝胆医院1996年至2001年共545例肝癌的临床病理资料,随访终点为2008年9月1日,以复发或死亡作为终点事件。对其外科治疗的复发率、生存率及预后相关危险因素进行分析总结。结果545例肝癌中,1、3、5、10年复发率为9.7%、40.9%、58.6%、64.0%,相应的总体生存率为80.5%、50.7%、41.1%、27.4%。结论BCLC B期肝癌患者术后经多因素分析,AFP≥400 ng/mL、肿瘤直径≥10cm、肿瘤数目>3、切缘<2 cm、包膜不完整是影响其手术预后的独立危险因素。该期病人经严格的术前评估和规范的手术操作,亦可达到较好的疗效。

肝癌免疫治疗的临床进展

肝癌患者迫切需要新的有效的治疗方法，免疫治疗因为能够产生清除肿瘤细胞的特异性细胞免疫而受到关注。大量新的肝癌抗原的鉴定促进了肝癌多肽疫苗治疗的发展。目前，一些免疫治疗途径已经应用于肝癌的临床实验，包括细胞因子的注射、过继性免疫治疗、抗原递呈细胞治疗、自体肿瘤细胞疫苗和以甲胎蛋白为基础的多肽疫苗等。这些以免疫为基础的临床实验显示免疫治疗途径引起了肝癌患者特异性的免疫应答，其中一些途径的临床治疗能够抑制肝癌患者的肿瘤复发和促进肝癌患者存活。

体素内不相干运动扩散加权成像技术评价肝癌经导管肝动脉化疗栓塞术/射频消融术的疗效

晚期肝癌失去手术机会或者病人无法耐受手术治疗时,可采取经导管肝动脉化疗栓塞术、射频消融术等非手术治疗方法,其中经导管肝动脉化疗栓塞术和/或射频消融术是肝癌非手术治疗的主要方法。患者治疗前后准确的检查诊断、早期术后疗效评估,是肝癌患者术后最大获益的关键。现已有不同的疗效评估方法,基本都是形态学上的评估,其可靠性及准确性不够。而目前认为反映组织微观变化的多b值体素内不相干运动扩散加权成像(IVIM-DWI)技术,可以先于肿瘤形态学的变化反映肿瘤的残留或新生血管,可进行肿瘤治疗后早期疗效的评估,将有望提高对肝癌经经导管肝动脉化疗栓塞术和/或射频消融术治疗评价的可靠性和准确性。本文对上述内容的研究进展进行综述,目的在进一步深化临床研究对肝癌经经导管肝动脉化疗栓塞术和/或射频消融术治疗后疗效的评价,推动IVIM-DWI技术在临床实践中广泛开展。

分泌抗ALD-A单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立与初步应用

用兔肌ALD-A免疫BALB/c小鼠,经融合、筛选后得到5株分泌高效价特异性抗ALD-A单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其中E_10株所分泌的单克隆抗体经鉴定属IgM。免疫组化定位研究发现,该抗体除对肌肉组织有弱阳性反应外,对正常人肝、脾、肺、胃和结肠组织均呈阴性反应。而对人肝癌组织则不论是血清AFP阳性者或血清AFP阴性者均呈阳性反应。提示抗ALD-A单克隆抗体在肝癌,特别是AFP阴性肝癌的诊断中,具有潜在的应用前景。

AFP-L3在肝细胞癌早期诊断中的应用价值研究

目的探讨AFP异质体作为肝癌早期诊断标志物在临床上的应用价值。方法利用微量离心柱法分离得到AFP-L3,采用化学发光法分别检测总AFP与AFP-L3含量,进而计算AFP-L3与总AFP的比值。结果AFP-L3与总AFP比值大于10%时与HCC呈明显相关性(P<0.01)。应用微量离心柱法检测甲胎蛋白异质体AFP-L3对肝癌的早期诊断、预后有重要临床应用价值。

兔VX2肝癌经光子刀治疗后扩散加权成像与B细胞淋巴瘤／白血病-2基因的相关性研究

目的探讨兔VX2肝癌放疗后的DWI特征、B细胞淋巴瘤／白血病-2（Bcl-2）基因的表达情况及其两者的相关性。方法成功制成40只兔肝癌模型后，待肿瘤直径≥1cm时，应用随机数字表法随机抽取28只瘤兔进行放疗，将放疗后28只兔用同样方法随机分成4组，各组兔分别于放疗后1、5、10和15d进行MR扫描，另12只作为对照组，随机分配到各组中，测量VX2肿瘤、肝脏感兴趣区的ADC值，并计算两者比值。肿瘤组织标本行逆转录酶-聚合酶链式反应（Rt—PCR）法测定Bcl-2凋亡基因的表达情况，计算Bcl-2基因PCR反应产物电泳条带灰度值和B-肌动蛋白（β—actin）电泳条带灰度值的相对比值（Bcl-2／β-actin），采用方差分析比较组间差异有统计学意义后，再采用两样本t检验分别比较不同放疗时间点各组ADC比值、相对灰度（Bcl-2／β-actin），并对ADC比值与相对灰度进行相关分析。结果放疗后1、5、10和15d放疗组ADC比值分别为0．55±0．13、1．32±0．27、0．96±0．34、0．72±0.17，相应对照组ADC比值分别为0．69±0．20、0．78±0．24、0．71±0．23、0．79±0．21，放疗组分别与对照组的ADC比值比较，放疗后5和10d差异有统计学意义（t值分别为4．974和3．191，P值均〈0．01），放疗后1和15d差异无统计学意义（t值分别为1．283和0．776，P值均〉0．05）。放疗后1、5、10和15d放疗组相对灰度分别为0．92±0．31、0．56±0．28、0．42±0．24、0．31±0．15，相应对照组相对灰度分别为1．18±0．50、1．15±0．43、1．16±0．41、1．46±0．19，放疗组分别与对照组的相对灰度比较，放疗后5、10和15d差异有统计学意义（t值分别为3．863、5．401和5．894，P值均〈0．01），放疗后1d差异无统计学意义（t值为0．987，P〉0．05）。ADC比值与Bcl-2基因相对灰度呈显著性负相关（r=-0．493，P〈0．01）。结论DWI可以反映兔VX2肝癌放疗后不同时间点分子水平的动态变化。

DAP12在肝细胞癌组织中的表达及临床意义

目的:研究DAP12在肝细胞癌(HCC)组织中的表达并分析其与患者临床病理特征及预后的关系。方法:收集94例手术切除的HCC标本,采用免疫组织化学染色方法检测其DAP12、CD163的表达情况,免疫荧光共定位检测二者在HCC组织中表达的相关性。单因素统计分析DAP12与临床病理特征的关系,进一步以多因素Cox比例风险回归分析影响患者生存时间的危险因素。结果:DAP12和CD163主要表达于HCC组织内的间质细胞,且DAP12和CD163的表达位置重叠,二者表达呈显著正相关性(r=0.775,P=0.001)。DAP12表达与肿瘤直径、病理组织分级及TNM分期有关(P=0.007、0.036、0.013)。DAP12高表达组患者生存时间显著短于低表达组患者(x2=12.018,P=0.005)。DAP12高表达、TNM分期是影响患者预后的独立危险因素(P=0.013,0.039)。结论:DAP12主要在HCC组织内替代活化型巨噬细胞(TAMs)中表达,DAP12阳性TAMs浸润密度与HCC的恶性进展及预后密切相关。