血浆HSP90α检测在肺癌诊断中的临床应用价值研究

目的探讨血浆热休克蛋白90α(HSP90α)检测在肺癌诊断中的意义。方法应用酶联免疫法检测166例肺癌患者血浆HSP90α浓度,化学发光法检测CEA,NSE,SCC,CYFRA21-1;同期健康体检者20例为正常对照组,两组数据采用之检验进行统计学分析;采用Pearman's相关法分析肺癌患者HSP90α与CEA,NSE,SCC和CYFRA21-1间的关系;采用ROC曲线评估HSP90α对肺癌的诊断效能。结果①肺癌组与对照组HSP90α,CEA,NSE,SCC,CYFRA21-1分别为190.33±105.8.6 vs 41.02±19.73 ng/ml,8.68±5.02 vs 4.02±1.36 ng/ml,36.32±13.16 vs 8.32±3.96 ng/ml,6.21±1.62 vs 1.23±0.64 ng/ml,10.63±4.33 vs 3.0.2±1.66 ng/ml;与对照组比较,HSP90α,CEA,NSE,SCC和CYFRA21-1明显高于健康对照组,差异有统计学意义(t=10.48,8.66,12.36,9.52,15.36,均P值<0.001)。②以生物参考区间(HSP90α:0~86 ng/ml,CEA 1.0~5 ng/ml,NSE:1.0~17.5 ng/ml,SCC:0.2~1.6 ng/ml,CYFRA21-1:1.0~2.6 ng/ml)为标准,肺癌组中,HSP90α增高占73.49%,CEA增高占19.27%,NSE增高占37.95%,CYFRA21-1增高占21.68%,SCC增高占29.51%。③肺癌患者按病理组织分型,不同肿瘤分型HSP90α浓度比较无差异(P>0.05)。④Spearman秩相关分析显示,HSP90α与CYFRA21-1水平呈正相关(r_s=0.44,P<0.01),差异有统计学意义(F=14.98,P=0.00);HSP90α与CEA,NSE,SCC无相关性。⑤HSP90α与CEA,NSE,SCC和CYFRA21-1诊断肺癌的ROC曲线下面积(AUC)分别为:0.961,0.562,0.731,0.465和0.632,最佳cutoff值分别为89.3 ng/ml,6.32 ng/ml,18.63 ng/ml,1.93 ng/ml和2.36 ng/ml;灵敏度分别为73.49%,52.3%,63.2%,59.6%和62.1%:特异度分别为98.6%,46.3%,66.3%,61.3%和63.4%;准确度分别为88.4%,80.3%,86.9%,87.2%和89.2%。五项联合诊断肺癌的灵敏度和特异度分别为100%和75%。结论用ROC曲线分析的结果表明,HSP90α对诊断肺癌具有辅助作用,联合CEA,NSE,CYFRA21-1及SCC可显著提高肺癌的检出率。

血浆热休克蛋白90α定量检测在肺癌患者中的应用价值

目的研究肺癌患者中的血浆热休克蛋白90α(Hsp90α)水平,探讨其在肺癌患者中的临床应用价值。方法选取2018年5月至2019年8月住院确诊的118例肺癌患者(其中肺腺癌50例,鳞癌47例,小细胞肺癌21例)和肺炎患者及健康体检者各30例作为检测对象,对其进行Hsp90α、CA72-4、CEA、CYFRA 21-1、NSE、ProGRP和SCC等肿瘤指标的检测并对检测结果进行统计分析。结果肺癌患者血浆Hsp90α蛋白水平明显高于正常对照组(P<0.0001),按其组织学分类其各类与正常组相比亦具有统计学意义(P<0.001)。通过绘制ROC曲线判断其诊断效能,分析血浆Hsp90α在肺癌中的诊断价值,使用75.08 ng/mL的最佳诊断临界值其曲线下面积(AUC)为0.802(95%CI 0.736~0.858),敏感性和特异性分别为72.03%和86.67%。联合检测其他的肺肿瘤指标对肺癌进行预测其AUC为0.966(95%CI 0.928~0.987),敏感性和特异性分别达到88.98%和96.67。结论研究证明血浆Hsp90α蛋白可作为肺癌的一种辅助诊断方法。通过联合检测其他的肿瘤标志物指标来预测肺癌的诊断效能,明显高于单项指标,进一步提高了肺癌的检出率。

血浆热休克蛋白90α在乳腺癌诊疗中的应用价值

目的通过检测乳腺癌患者血浆热休克蛋白90α(Hsp90α)水平,探讨其在乳腺癌临床诊疗中的应用价值。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测289例乳腺癌患者、172例乳腺良性疾病患者及90名健康体检者(正常对照组)血浆Hsp90α水平,分析Hsp90α在患者不同病理因素(年龄、肿瘤大小、临床分期及有无淋巴结转移等)间的差异。结果乳腺癌组血浆Hsp90α水平明显高于乳腺良性疾病组和正常对照组(P<0.001)。不同年龄乳腺癌患者之间血浆Hsp90α水平差异无统计学意义(P>0.05),肿瘤≥3 cm、病理分期Ⅱ~Ⅳ期、有淋巴结转移者的血浆Hsp90α水平分别高于肿瘤<3 cm(P=0.003)、病理分期Ⅰ期(P<0.001)和无淋巴结转移者(P=0.031)。结论血浆Hsp90α是一个潜在的乳腺肿瘤标志物,对乳腺癌的辅助诊断和预后判断有一定作用。

热休克蛋白90α在非小细胞肺癌患者血浆中的表达及临床意义

目的分析热休克蛋白90α在非小细胞肺癌患者血浆中的表达及其临床意义。方法回顾性分析2015年1月—2017年8月期间在滁州市第一人民医院诊断的87例非小细胞肺癌患者和46例健康体检者的HSP90α、CEA、CYFRA21-1和SCC检测结果,对检测结果进行统计分析。结果非小细胞肺癌组HSP90α、CEA、CYFRA21-1和SCC结果与对照组比较均显著升高,差异有统计学意义(P均<0.05);HSP90αROC曲线下面积是0.858,最佳诊断截点值为90.95 ng/ml、灵敏度65.7%、特异度92.3%。HSP90α与CEA、CYFRA21-1及SCC经Kappa分析一致性不满意,Kappa值分别是0.318、0.201、0.248。结论 HSP90α在非小细胞肺癌患者血浆中高水平表达,对非小细胞肺癌具有较高的诊断价值。

血清热休克蛋白90早期诊断肝细胞癌的价值

目的探讨血清热休克蛋白90(HSP90)在肝细胞癌(HCC)早期诊断中的价值。方法检测240例HCC患者血清HSP90及甲胎蛋白(AFP)水平。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估HSP90和AFP对HCC的敏感性。结果HSP90诊断HCC的敏感性和特异性分别为89.38%和42.86%,而血清AFP诊断HCC的敏感性和特异性分别为71.68%和64.28%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论HSP90是辅助AFP提高HCC诊断准确率的重要血清标志物,在临床应用中具有一定的价值。

阿帕替尼一线治疗晚期肝细胞肝癌的疗效及安全性

目的探讨阿帕替尼一线治疗晚期肝细胞肝癌的疗效及安全性。方法依据治疗方式的不同将60例晚期肝细胞肝癌患者分为阿帕替尼组(n=36)和常规组(n=24)。常规组予以经导管动脉栓塞化疗(TACE)治疗,阿帕替尼组在常规组的基础上予以阿帕替尼口服治疗。比较治疗3个周期后两组患者的近期疗效、血清肿瘤标志物[血清热休克蛋白90α(HSP90α)、甲胎蛋白(AFP)]水平、生存情况及不良反应发生情况。结果阿帕替尼组的有效率为63.89%(23/36),高于常规组患者的37.50%(9/24)(P﹤0.05)。治疗后,两组患者的HSP90α、AFP水平均低于本组治疗前,且阿帕替尼组患者的HSP90α、AFP水平均低于常规组患者(P﹤0.05)。截至随访结束,阿帕替尼组患者的中位生存时间长于常规组患者,1年生存率高于常规组患者(P﹤0.05)。两组患者≥3级的不良反应的总发生率比较,差异无统计学意义(P﹥0.05)。结论阿帕替尼治疗肝细胞肝癌能够增强抗肿瘤效果,降低血清肿瘤标志物水平,提高生存获益,且安全可靠,不良反应在可控范围内。

PKM2促进肿瘤发展的作用机制研究

为了分析丙酮酸激酶M2型(pyruvate kinase M2,PKM2)在不同肿瘤中的表达情况及其与肿瘤患者临床预后的关系,并探索PKM2对肿瘤细胞增殖和迁移的影响及其作用机制,用TCGA数据库和免疫印迹分析了33种肿瘤中PKM2的表达情况,探索了PKM2与不同肿瘤患者预后的关系。在肺癌细胞系中过表达PKM2,利用CCK8和Transwell方法分析PKM2对肺癌细胞增殖和迁移能力的影响。利用免疫印迹检测不同肿瘤细胞中过表达和敲低PKM2对热休克蛋白90α(Hsp90α)分泌的影响以及上皮-间质转化(epithelial-mesenchgmal transition,EMT)相关蛋白的变化。TCGA数据分析显示,PKM2在包括乳腺癌、肺癌等15种肿瘤中高表达,且9种肿瘤中PKM2的高表达与肿瘤的预后具有显著相关性。在肺癌细胞中过表达PKM2后,肺癌细胞的增殖和迁移能力显著增强。过表达PKM2能够显著增加乳腺癌和肺癌中Hsp90α的分泌。敲低PKM2能够抑制N-钙黏蛋白(N-cadhesion)和波形蛋白(Vimentin)的表达,促进E-钙黏蛋白(E-cadhesion)的表达。研究结果表明,PKM2在多种肿瘤中高表达且与肿瘤预后显著相关,能够通过影响Hsp90α的分泌以及上皮-间质转化相关蛋白的表达从而促进肿瘤的进展。PKM2有望成为潜在的广谱肿瘤标志物和治疗靶点。

肝细胞癌早期诊断血清标志物研究进展

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是源于肝脏细胞的恶性肿瘤,其有着恶性程度高,早期诊断困难,临床预后差的特点。近年来,越来越多的研究发现血清甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)对于肝细胞癌诊断敏感性降低,早期诊断效能较差,因此,对于新型肝细胞癌血清肿瘤标志物的研究成为热点。例如甲胎蛋白异质体、热休克蛋白90、高尔基体蛋白73等的出现可能有效提高肝细胞癌的早期诊断率。本文就近年来对于肝细胞癌早期诊断血清标志物研究进展做一综述。

HSP90抑制剂17-AAG经下调HIF-1α抑制甲状腺未分化癌侵袭

目的:研究热休克蛋白90(heat shock protein 90,HSP90)抑制剂17-丙烯氨基-去甲氧基-格尔德霉素(17-Nallylamino-17-demethoxygeldanamycin,17-AAG)对甲状腺未分化癌(anaplastic thyroid carcinoma,ATC)侵袭能力的影响,并探究HSP90与低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor 1-alpha,HIF-1α)及其下游侵袭相关蛋白在ATC细胞中作用的分子机制。方法:本试验通过细胞计数试剂盒-8(cell counting kit 8,CCK8)试验明确17-AAG对ATC细胞系8505c的药物半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50),并确定进一步试验的药物浓度。通过Transwell试验检测17-AAG对ATC细胞侵袭能力的影响,并通过Western blot和蛋白质免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,CO-IP)探索潜在的作用机制。结果:CCK8试验提示,经过不同浓度的17-AAG处理ATC细胞系后,17-AAG表现出对ATC的生长有抑制作用,作用12h、24h、48h的IC50分别为26μM、23μM、5μM,效果呈浓度依赖。根据CCK8试验结果,选取浓度0. 5μM和1μM作用24h用于后续试验。Transwell试验结果显示17-AAG对ATC细胞系8505c的侵袭能力具有抑制作用,并且具有浓度依赖性。Western blot结果表明17-AAG使ATC细胞系HIF-1α与侵袭相关蛋白基质金属蛋白酶2(matrix metallopeptidase 2,MMP2)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达降低。CO-IP结果提示,HIF-1α与HSP90在ATC细胞中形成蛋白质复合物。进一步通过挽救试验证明,过表达HIF-1α后,MMP2和VEGF的表达水平升高,从而减弱了17-AAG对ATC细胞侵袭能力的抑制。结论:17-AAG可能通过调控HSP90与HIF-1α形成的复合物,使HIF-1α下调,导致侵袭相关蛋白MMP2和VEGF表达降低,从而抑制ATC细胞的侵袭能力。

亚砷酸钠染毒对SD大鼠肝脏的损伤作用及血清相关蛋白的表达

目的建立慢性砷中毒模型,探讨亚砷酸钠对SD大鼠肝脏的损伤作用,同时测定血清相关蛋白含量,为发现早期生物标志物提供依据。方法健康成年SD大鼠112只,雌雄对半,随机分为对照组(A组和E组)、低剂量组(B组和F组)、中剂量组(C组和G组)和高剂量组(D组和H组),共8组,采用自由饮水方式进行染毒,对照组(A、E):0 mg/L,低剂量组(B、F):2 mg/L,中剂量组(C、G):10 mg/L,高剂量组(D、H):50 mg/L,其中A^D组染毒三个月,E^H组染毒6个月,检测大鼠尿砷含量,观察肝脏组织病理学变化,测定血清羧肽酶(CPD)、I型胶原蛋白(COI 1)、大鼠热休克蛋白90α的含量。结果亚砷酸钠染毒3个月和6个月,大鼠肝脏重量基本上呈下降趋势,且在中剂量和高剂量下降较为明显(F=3.246,F=0.989,P<0.05),但肝脏系数变化无统计学意义(F=0.188,F=1.542,P>0.05);随着染毒剂量的增加,肝细胞排列逐渐紊乱,炎性细胞浸润程度增加,肝纤维组织增生,在高剂量组出现肝细胞变性坏死;大鼠血清的羧肽酶(CPD)、热休克蛋白90α(HSP90α)、一型胶原蛋白(COI 1)含量在3个月染毒组差异均无统计学意义(F=1.387,F=0.532,F=1.005,P>0.05),但在6个月染毒组,大鼠羧肽酶(CPD)、一型胶原蛋白(COI 1)差异无统计学意义(F=2.283,F=0.488,P>0.05),热休克蛋白90α(HSP90α)差异具有统计学意义(F=2.086,P<0.05)。结论长期饮水砷暴露可导致肝损伤,热休克蛋白90α在慢性砷中毒中的上调表达提示需要进一步验证热休克蛋白90α是否可以作为早期预警砷中毒的效应指标。