地中海贫血患者珠蛋白基因mRNA和肽链水平的检测及其相关性分析

目的 研究 β地中海贫血 (简称地贫 )患者外周血中α ,β ,γ珠蛋白基因mRNA和肽链的相对含量 ,为进一步研究珠蛋白基因表达的调控提供基础。方法 应用半定量RT -PCR和血红蛋白电泳 ,以α珠蛋白基因mRNA和α珠蛋白链为内对照 ,检测了正常人和 β地贫患者外周血中 β和γ珠蛋白基因和肽链的相对含量。 结果 β地贫患者外周血中 β珠蛋白基因mRNA和 β珠蛋白肽链都有不同程度的减少和γ珠蛋白基因产物代偿性增高 ,同时两者水平呈负相关。 结论 β和γ珠蛋白基因在转录和翻译水平都存在竞争性反馈调节机制 ,随着 β珠蛋白基因产物的减少γ珠蛋白基因产物相应升高。

FQ-RT-PCR法检测脐带血中β与γ珠蛋白mRNA的水平

目的 :探讨新生儿脐带血中 β与 γ珠蛋白 m RNA水平及其意义。方法 :用实时荧光定量逆转录—聚合酶链反应技术检测 2 3例新生儿脐带血和 2 5例正常对照组外周血中 β与 γ珠蛋白 m RNA水平。结果 :脐带血中 γ/ (β+γ) m RNA比值 [(4 4 .0 8±2 2 .4 1 ) % ]明显高于正常对照组 [(1 .5 5± 4 .1 4 ) % ](P <0 .0 0 1 )。脐带血中胎儿血红蛋白 (Hb F)比值 [(5 8.1 1± 7.1 9) % ]也明显高于正常对照组 [(0 .6 3± 0 .32 ) % ](P <0 .0 0 1 )。结论 :脐带血中 γ/ (β+γ) m RNA及 Hb F水平增高 ,可能说明出生时 γ珠蛋白仍未完全关闭 。

泥蚶(Tegillarca granosa)血红蛋白基因(Tg-HbIIA)克隆、分析及免疫表达研究

通过已构建的泥蚶血液cDNA文库,克隆得到泥蚶Tg-HbIIA基因全长cDNA序列,对其进行生物信息学、组织表达及免疫相关分析。结果表明,泥蚶Tg-HbIIA cDNA全长731bp,包含63bp5′非编码区(5′-UTR),246bp3′非编码区(3′-UTR),开放阅读框450bp,编码150个氨基酸;其氨基酸序列与毛蚶(Scapharca kagoshimensis)和不等壳毛蚶(Scapharca inaequivalvis)的序列有较高的同源性,分别达到89%和88%;对其结构预测显示该蛋白具有血红蛋白功能域,含有10个潜在血红素结合位点。qRT-PCR检测结果显示:泥蚶不同组织部位中,Tg-HbIIA mRNA在血液表达量最大,其次为外套膜和鳃,表达量最低的是肝胰脏;在副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticu)、脂多糖、肽聚糖刺激后,泥蚶血液Tg-HbIIA mRNA表达量显著上调,表明Tg-HbIIA在贝类抗菌免疫防御中可能起重要作用,而Tg-HbIIA对不同致病因子免疫反应的灵敏度和表达时序存在一定差异。

仙人掌果多糖降血糖作用及其机制

目的:研究仙人掌果多糖提取物(CFPE)的降血糖作用及其相关分子机制。方法:采用链脲佐菌素(STZ)复制糖尿病大鼠模型。连续给药8周,观察各组大鼠体重和糖化血红蛋白(GHb)的变化。运用RT-PCR技术,检测糖尿病大鼠肝组织和骨骼肌的胰岛素受体(IR)及骨骼肌葡萄糖转运蛋白4(GluT4)mR-NA的表达。结果:与模型组比较,CFPE可明显降低糖尿病大鼠GHb含量,可使糖尿病大鼠体重明显回升;增加肝脏和骨骼肌IR及骨骼肌GluT4 mRNA的表达。结论:CFPE对糖尿病大鼠有明显的降血糖作用,其机制可能与其增加肝脏和骨骼肌IR以及骨骼肌GluT4 mRNA的表达有关。