尖吻蝮蛇蛇毒出血毒素Ⅲ的荧光光谱

皖南尖吻蝮蛇蛇毒经分离和纯化得到出血毒素Ⅲ（ＡａＨⅢ），质谱测定分子量为２３，２８４．４±０．１。实验表明，Ｔｒｐ残基较大程度位于ＡａＨⅢ分子的疏水区。十二烷基磺酸钠（ＳＤＳ）和盐酸胍的加入使ＡａＨⅢ的分子构象发生变化，导致分子内色氨酸（Ｔｒｐ）残基的荧光淬灭。盐酸胍的加入使Ｔｒｐ残基的荧光发射峰位明显红移，表明位于ＡａＨⅢ分子较疏水环境的Ｔｒｐ残基相对外露。我们还就酸度、ＥＤＴＡ和金属离子对ＡａＨⅢ分子内Ｔｒｐ残基荧光光谱的影响进行了研究和讨论。

皖南尖吻蝮蛇毒出血毒素Ⅳ的纯化与初步鉴定

从皖南尖吻蝮蛇（Ａｇｋｉｓｔｒｏｄｏｎａｃｕｔｕｓ）毒液中经ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ和ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－２００两步凝胶柱层析首次纯化出一种中分子量出血毒素（简称ＡａＨⅣ）．经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和等电聚焦凝胶电泳测定其分子量为４４ｋＤ，等电点为ｐＨ５．０．从５００ｍｇ粗毒中可获得２０ｍｇＡａＨⅣ纯品．ＡａＨⅣ有较强的出血活性，最小出血剂量（ＭＨＤ）为０．４μｇ．

尖吻蝮蛇(Agkistrodon acutus)毒出血毒素I出血机制的研究

用125I标记尖吻蝮蛇毒出血毒素I(AaHI),用125I-AaHI为材料研究它在家兔体内的分布和药物代谢动力学,研究结果表明,有血脑屏障存在,肝脏和肾脏含量较高,125I-AaHI代谢的产物主要通过肾排出,经计机模拟,125 I-AaHI的药物代谢动力学为一室模型,其中生物半衰期T1/2 为53.1min,K值为0.0154min-1.结合动力学研究结果表明,离子强度、温度和离子种类对125I-AaHI与肾匀浆组织结合无影响,pH低于5.8或高于8.0时结合能力下降,结合有时间饱和性,并有明显的竞争抑制现象.上述结果说明125I-AaHI在动物体内均匀分布,可能有AaHI相关的结合位点或受体存在.

在制备尖吻蝮蛇毒出血毒素抗血清中不同凝胶染色方法的比较

目的:寻找在制备出血毒素抗血清中电泳后染色凝胶的好方法。方法:按照前人的方法从皖南产尖吻蝮蛇毒中初步分离3种出血毒素:Aa HⅠ、Aa HⅡ和Aa HⅣ并获得3种粗提取的出血毒素,用制备电泳的方法进一步纯化Aa HⅠ、Aa HⅡ和Aa HⅣ,对每种出血毒素,配制6块制备电泳板并进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,用6种不同的染色方法分别染色,将含出血毒素的凝胶切下,磨细后直接免疫注射小鼠并获得抗血清,用ELISA检测和中和出血毒素出血活性两种方法检测抗血清的质量。结果:不同染色方法制备的抗血清中有效Ig G浓度不同,用无毒型蛋白质快速染色试剂盒染色制备的抗血清有效Ig G浓度最高。结论:用无毒型蛋白质快速染色试剂盒染色是制备抗血清最好的染色方法。

与尖吻蝮蛇出血毒素高亲和力动物血管壁蛋白的提取与检测

为了测定动物血管壁上是否含有对尖吻蝮蛇出血毒素有高亲和力的靶蛋白,从4种蛋白质提取试剂盒种筛选1种试剂盒,提取11种动物的血管壁蛋白质,用血管壁蛋白质作为抗原,采用ELISA检测方法测定提取的血管壁蛋白质是否含有与尖吻蝮蛇出血毒素有高亲和力的靶蛋白。结果表明:三种酸性出血毒素(AaHⅠ、AaHⅡ和AaHⅣ)对11种动物血管壁提取蛋白的检测结果为阳性,碱性出血毒素(AaHⅢ)对11种动物血管壁提取蛋白的检测结果基本上为阴性。因此,动物体内,特别是作为尖吻蝮蛇食物来源的动物体内血管壁上可能含有与尖吻蝮蛇出血毒素有高亲和力的靶蛋白。

尖吻蝮蛇出血毒素Ⅲ三维荧光光谱研究

蛇毒中含有多种金属蛋白质，它们具有不同的生物学活性，如抗凝血因子（ＡＣＦ）、糖苷水解酶（ＮＡＤａｓｅ）、纤溶组分（ＦＰ）及出血毒素等，它们的许多生物活性、荧光光谱和结构的性质等方面的研究已见报道［１］．徐洵等［２］从皖南尖吻蝮蛇蛇毒中分离出３种出血毒...

尖吻蝮蛇蛇毒出血毒素的荧光光谱研究

皖南尖吻蝮蛇蛇毒经分离和纯化得到出血毒素 (Aa H ) ,质谱测定分子量为 2 32 84.4± 0 .1。实验表明 ,色氨酸 (Trp)残基位于 Aa H 分子的疏水区。十二烷基磺酸钠 (SDS)和盐酸胍的加入使 Aa H 的分子构象发生变化 ,导致分子内 Trp残基的荧光淬灭。盐酸胍的加入使 Trp残基的荧光发射峰位明显红移 ,表明位于 Aa H 分子较疏水环境的 Trp残基相对外露。本文还就酸度、EDTA和金属离子对 Aa H 分子内

皖南尖吻蝮蛇(Agkistrodonacutus)蛇毒出血毒素Ⅲ(AaHⅢ)的荧光淬灭研究

研究了几种淬灭剂对皖南尖吻蝮蛇蛇毒出血毒素 (Aa H )内源荧光的影响。溴代琥珀酰亚胺 (NBS)法测得每个 Aa H 分子中含有 3个 Trp残基。实验得到丙烯酰胺 (Acr)和 I-的碰撞淬灭常数 KSV分别为 38.3M-1和 4.2 7M-1,fa 分别为 0 .97和 0 .99,Acr和 I-均可以淬灭 Aa H 分子中几乎全部 Trp残基的荧光 ,初步验证 Acr与 Aa H 分子间无明显的相互作用。结合 Aa H 的荧光发射光谱可以推断 ,Aa H 中的 3个

白眉蝮蛇毒中出血毒素种类鉴定的简便方法

用DEAE-纤维素离子交换层析、分段洗脱的方法将白眉蝮蛇毒成分了若干个组分,收集、浓缩、透析并确定出血毒素所在的组分。分段洗脱液含NaCl的Tris-HCl缓冲液(0.05M、0.10M、0.15M、0.2M、0.5M,pH7.4)。然后用12%PAGE制备电泳方法进一步分离出血毒素,用生工生物工程(上海)股份有限公司生产的高灵敏快速考马斯亮蓝染色试剂盒(产品编号:C510041)染色。对染色和脱色方法进行改进,将含蛋白质的凝胶切下,磨细后注射到小鼠腹部皮下,观察小鼠腹部皮上的出血点,每一个出血点代表1种出血毒素。结果表明,浓度为0.10M NaCL洗脱的组份含出血活性,对该部分电泳检测发现总共有2种出血毒素。

皖南尖吻蝮蛇毒出血毒素Ⅰ氨基酸序列初步研究

中国皖南尖吻蝮蛇（Ａｇｋｉｓｔｒｏｄｏｎａｃｕｔｕｓ）毒出血毒素Ｉ（ＡａＨＩ）氨基酸序列得到初步测定．ＡａＨＩ的Ｎ端１３个残基序列为ＳＴＥＦＱＲＹＭＥＩＶＩＶ．序列比较表明ＡａＨＩ与其它种属来源的低分子量（２０～２４ｋＤ）蛇毒出血毒素和金属蛋白酶有较高的同源性．