饮水添加壳聚糖对鸡白痢沙门氏菌攻毒蛋鸡蛋品质、血清抗氧化指标、肝脏损伤和输卵管炎症的缓解作用

本试验旨在研究饮水添加壳聚糖(CS)对鸡白痢沙门氏菌(SP)攻毒蛋鸡蛋品质、血清抗氧化指标、肝脏损伤和输卵管炎症的缓解作用。选取体重、产蛋率相近的180羽35周龄健康海兰褐蛋鸡,随机分为3组,每组5个重复,每个重复12羽。3组分别为对照组(CON组)、攻毒组(SP组)和壳聚糖组(CS组),均饲喂相同的基础饲粮。试验期7 d。试验第1天,分别于09:00和17:00各进行1次攻毒处理,其中SP组和CS组每只试验鸡均口服1 mL活菌数为1×109 CFU/mL的SP菌液,CON组每只试验鸡口服1 mL生理盐水;第2次攻毒结束后,立即在CS组饮水中添加0.4%CS,且连续7 d服用含CS的水。结果表明:1)与CON组相比,SP组产蛋率显著降低(P<0.05),血清谷草转氨酶(AST)活性以及白蛋白(ALB)和丙二醛(MDA)含量显著提高(P<0.05),血浆白细胞介素-1β(IL-1β)和SP抗体(SP-Ab)含量显著提高(P<0.05),血浆白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量显著降低(P<0.05);SP攻毒后第1天和第3天,SP组蛋壳强度显著降低(P<0.05)。SP组蛋鸡出现典型的白痢、嗜睡及精神不佳等临床症状,组织病理学观察到输卵管膨大部组织绒毛膜碎裂,出现多处炎性浸润灶和脂肪变性以及少量肝细胞坏死崩解和核固缩等明显的病理改变。2)与SP组相比,CS组产蛋率显著增高(P<0.05),血清AST活性以及MDA含量显著降低(P<0.05),肝脏指数、血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)活性以及血浆SP-Ab含量显著提高(P<0.05);饮水中添加CS后第3天和第7天,CS组蛋壳强度显著提高(P<0.05)。SP组蛋鸡临床症状有所缓解,病理学观察到输卵管膨大部和肝脏损伤均有所缓解。3)与CON组相比,CS组产蛋率无显著差异(P>0.05),肝脏指数、血清ALB和总蛋白(TP)含量、血清GSH-Px和SOD活性以及血浆SP-Ab含量显著提高(P<0.05),血浆IL-6含量显著降低(P<0.05)。综上所述,饮水中添加0.4%CS可通过减轻蛋鸡肝脏损伤和输卵管炎症、增强机体抗氧化功能以及调节免疫炎症反应等,从而缓解SP感染以及由此引起的产蛋性能和蛋品质下降。

益生菌-中草药复方制剂对海兰褐蛋鸡输卵管组织、生产性能及蛋品质的影响

试验旨在研究益生菌—中草药复方制剂对蛋鸡输卵管组织、生产性能及蛋品质的影响。选取体质优良的45周龄的海兰褐蛋鸡720只,随机分成4组,每组3个重复,每个重复60只。对照组饲喂不含抗生素的基础日粮,Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组为试验组,分别在基础日粮中添加1.0‰中草药组方一(败酱草、蒲公英、板蓝根、连翘等)、1.0‰中草药组方二(金银花、黄芪、淫羊藿、益母草等)和1.0‰中草药组方三(大青叶、黄柏、黄芩、栀子等),且各试验组均添加1.5‰复合益生菌。预试期7d,正试期28d。结果表明:1益生菌—中草药复方制剂能修复蛋鸡受损的输卵管组织,减少输卵管与周围组织的黏连,使输卵管保持通畅性,降低蛋鸡输卵管组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和表皮生长因子受体(EGFR)含量,尤以Ⅱ组效果最好,分别较对照组降低40.85%和17.79%,差异显著(P<0.05);2与对照组相比,Ⅱ组可显著提高蛋鸡产蛋率(P<0.05),显著降低料蛋比和软破蛋率(P<0.05);3与对照组相比,Ⅱ组可显著提高48和50周龄蛋鸡的蛋形指数和蛋黄比率(P<0.05)。由此可知,日粮中添加益生菌—中草药复方制剂能在一定程度上减轻蛋鸡输卵管炎症反应,提高产蛋率,改善蛋品质,其中以Ⅱ组益生菌和金银花、黄芪、淫羊藿、益母草等中草药联合使用效果最好。

单色光对蛋鸡产蛋高峰期的影响

研究单色光对产蛋高峰期、产蛋高峰期排卵素（LH）和促卵泡激素（FSH）在外周血中的含量及输卵管膨大部形态结构的影响。采用红、绿、蓝3种发光二极管（LED，处理组）和白炽灯（对照组），对蛋鸡进行人工光照。白光组产蛋高峰期最短（23～29周龄），蓝光组最长（23～35周龄）；蓝光组血清LH和FSH的上升维持时间最长（25～34周龄）；34周龄时，与其他组相比蓝光组输卵管膨大部管状腺排列紧密，腺体管腔内容物充盈。蓝光促进了LH和FSH的分泌，使输卵管的分泌功能在较长时间内保持良好状态，进而延长了产蛋高峰期。蓝光组高峰期产蛋率为94％，料蛋比最低（2．10），与白光组相比蓝光组产蛋高峰期延长6周，提高了其产蛋性能。

TRPV6在蛋鸡不同生殖器官组织的表达

【目的】研究瞬时性受体电位通道香草酸受体6(transient receptor potential vanilloid receptor6,TRPV6)在蛋鸡卵巢、输卵管的膨大部、峡部以及子宫部的表达分布。【方法】本试验采用RT-PCR和免疫组化技术研究TRPV6在蛋鸡不同生殖器官的定性表达,同时采用Real-time PCR和Western blotting方法观察其表达量的变化。【结果】在卵巢,TRPV6蛋白主要分布在初级卵泡和次级卵泡。在输卵管的膨大部、峡部以及子宫部,TRPV6主要分布在黏膜上皮的纤毛上皮细胞游离端(面向管腔),其中子宫部黏膜上皮的基底层也有少量分布。另外,与卵巢组织相比,膨大部和峡部TRPV6 mRNA表达量显著降低(P<0.05)。同时,膨大部TRPV6蛋白含量也显著降低(P<0.05),子宫部组织TRPV6 mRNA水平低于卵巢,蛋白水平则相反,但均无统计学差异(P>0.05)。【结论】TRPV6在卵巢、输卵管的膨大部、峡部以及子宫部均有表达,且卵巢和输卵管的子宫部表达量较高,提示TRPV6可能参与卵泡的发育成熟,对蛋鸡输卵管的子宫部Ca2+转运也具有重要意义。

蛋鸡感染H9N2 AIV后输卵管不同部位病毒的分布及病理组织学观察

为探索H9N2AIV感染蛋鸡致输卵管功能异常的机理,对蛋鸡感染H9N2亚型AIV后输卵管不同部位病毒载量与病理变化进行检测与观察。以H9N2亚型AIV人工感染非免疫蛋鸡,在感染后3、5、7d分别采取鸡输卵管组织,real-time PCR检测感染鸡输卵管组织中AIV病毒载量,同时HE染色后观察病理组织学变化。结果表明,real-time PCR从鸡输卵管膨大部、峡部、子宫部和阴道部均检出了禽流感病毒,其中以膨大部和子宫部病毒载量最高,分别达5.27×104拷贝/μL±3.55×103拷贝/μL和5.52×104拷贝/μL±3.14×103拷贝/μL。组织病理学观察发现蛋鸡感染H9N2亚型AIV后输卵管膨大部、峡部和子宫部病变明显。观察到上皮细胞脱落坏死,炎性细胞浸润腺体,腺体间隙变大甚至溶解,腺体组织充血出血。本研究证实蛋鸡感染H9N2亚型AIV后输卵管组织中AIV病毒载量与其病理变化存在明显的正相关。

母鸡输卵管子宫部副交感节后神经元支配的逆行追踪研究

将CB HRP溶液注入鸡输卵管子宫部浆膜下 ,取泄殖腔神经节和双侧阴部内神经以及肠神经直肠段 ,制成5 0 μm厚度的连续冰冻切片 ,TMB反应 ,明视野观察。结果发现 :鸡输卵管子宫部受泄殖腔神经节和双侧阴部内神经节的副交感节后神经元支配 ;双侧阴部内神经节的标记细胞无显著差异 ;说明尽管母鸡输卵管子宫部是单侧发育器官 ,但其受双侧阴部内神经的副交感节后神经元的支配。鸡输卵管子宫部还受肠神经的节后神经元的支配。另外本实验对泄殖腔神经节。

母鸡输卵管畸形发生原因的分析

某种鸡场一群艾维茵父母代种鸡中出现“假性母鸡”,剖检发现输卵管畸形。这批种鸡在17日龄时发生过某传染病。进行发病情况调查、对病死雏鸡的剖检和开产期病死母鸡的剖检、病料鸡胚感染和传代试验及新城疫病毒干扰试验。结果,鸡胚感染中第3代出现侏儒胚,干扰组的新城疫血凝价均低于20,对照组新城疫血凝价高于40。综合分析,可以判定该雏鸡在3周龄发生的疾病是鸡传染性支气管炎,以及可以确定该鸡群中不少鸡只出现输卵管畸形是由鸡传染性支气管炎病毒早期感染而引起的。

淫羊藿苷对蛋鸡生产性能、蛋品质、输卵管氧化还原状态和炎性细胞因子基因表达的影响

本试验旨在研究饲粮中添加淫羊藿苷对蛋鸡生产性能、蛋品质、输卵管氧化还原状态和炎性细胞因子基因表达的影响。选取54周龄、生产性能相近的健康罗曼粉蛋鸡216只,随机分为3组,每组6个重复,每个重复12只鸡。对照组饲喂基础饲粮,试验Ⅰ组和试验Ⅱ组分别饲喂在基础饲粮中添加0.05%和0.20%淫羊藿苷(以鲜重为基础)的试验饲粮。预试期1周,正试期12周。结果表明:与对照组相比,1)试验Ⅱ组蛋鸡的平均蛋重显著提高(P<0.05)。2)试验Ⅱ组在蛋鸡66周龄时的蛋白高度显著提高(P<0.05)。3)试验Ⅱ组蛋鸡输卵管组织中的丙二醛含量显著降低(P<0.05)。4)试验Ⅰ组和试验Ⅱ组蛋鸡输卵管组织中干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)和白细胞介素-6(IL-6)的mRNA相对表达量显著降低(P<0.05);试验Ⅰ组输卵管组织中白细胞介素-10(IL-10)的mRNA相对表达量显著降低(P<0.05);试验Ⅱ组输卵管组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的mRNA相对表达量显著降低(P<0.05)。由此可见,蛋鸡饲粮中添加0.20%淫羊藿苷可提高平均蛋重和蛋白高度,减少蛋鸡输卵管氧化应激,并改善输卵管的免疫功能。

产蛋鸡与休产鸡肝脏、输卵管雌激素受体含量的比较

本试验选用正在产蛋和休产的来航鸡,用放射配体结合分析法,分别测定两组鸡的肝脏和输卵管胞浆和胞核受体含量。胞浆液的蛋白含量用考马斯亮蓝G250法测定;胞核DNA含量用紫外吸收法测定。试验结果表明:两组鸡的肝脏和输卵管的胞浆雌激素受体含量均无明显差异;两组鸡的肝脏和输卵管的胞核雌激素受体含量,产蛋鸡肝脏的胞核雌激素受体是休产鸡的15倍,差异显著(P<0.05),而输卵管的胞核雌激素受体差异不明显。

饮水型酸化剂对蛋鸡生产性能·蛋品质及输卵管健康的影响

[目的]探究饮水型酸化剂对蛋鸡生产性能、蛋品质和蛋鸡输卵管健康的影响。[方法]试验将1500只18周龄的蛋鸡随机分为3组,对照组饮用自来水,试验组A每天自由饮用酸化剂预调水8 h,试验组B隔天自由饮用酸化剂预调水8 h。23周龄、32周龄和43周龄统计各组蛋鸡耗料量、平均产蛋率和平均蛋重,检测蛋品质,组织切片观察各组输卵管形态,并用ELISA试剂盒检测输卵管组织中炎症因子水平。[结果]与对照组相比,32周龄和43周龄试验组A和试验组B平均蛋重显著升高(P<0.05),产蛋率上升,料蛋比下降,但差异不显著(P>0.05)。32周龄时,试验组B蛋壳相对重和试验组A蛋壳厚度显著升高(P<0.05)。23周龄时,试验组A与试验组B输卵管TNF-α和IL-2水平均显著下降(P<0.05)。43周龄时,对照组中观察到输卵管组织出现局部炎症浸润,其他各时期各组输卵管组织均无明显病变。[结论]在饮水中添加饮水型酸化剂能够提高蛋重、蛋壳厚度和蛋壳强度,且有利于蛋鸡输卵管健康的维持。

H9N2亚型禽流感病毒对鸡输卵管致病性的研究

为了研究H9N2亚型禽流感病毒(H9N2AIV)对鸡输卵管的致病性,本研究首先采用凝集素亲和组化染色法检验了流感病毒受体SAα-2,3Gal在鸡输卵管上的分布;然后用H9N2AIV人工感染产蛋母鸡,制作输卵管的病理组织切片观察其病理变化;最后,采用胶原酶I灌注消化法培养鸡输卵管膨大部的原代上皮细胞,接毒H9N2AIV后观察细胞病变。试验结果表明,鸡输卵管除漏斗部没发现SAα-2,3Gal受体,其余部分均呈强阳性分布;攻毒后病理组织切片观察,输卵管膨大部上皮细胞绒毛脱落,部分细胞坏死、脱落,组织间隙变大,子宫内部组织内部充血出血,其他部分变化不明显;原代细胞接毒72h后,细胞病变不明显,但是上清中HA滴度可以达到3log2。从以上三方面可以看出,鸡输卵管上皮细胞膜上存在禽流感病毒受体,H9N2AIV可以引起侵害鸡输卵管,并引起部分输卵管病变,而且H9N2AIV可以感染鸡输卵管膨大部原代上皮细胞,H9N2AIV有可能通过输卵管感染母鸡。

产蛋母鸡输卵管精子储存情况及相关结构的研究

应用光镜和电镜技术,系统地观察产蛋母鸡输卵管各段组织结构,观察输卵管各段精子储存的情况,研究和精子储存相关的组织结构及微环境。结果表明,产蛋母鸡输卵管各段形态结构存在一定差距,主要体现在黏膜层。产蛋母鸡输卵管存在精子储存现象,精子主要储存在产蛋母鸡输卵管子宫与阴道交界处的精子腺,少量储存在接近子宫的峡部固有层的腺体。腺体开口于黏膜上皮与输卵管腔相通,黏膜上皮细胞旺盛的分泌活动以及丰富的血管分布可能为精子储存提供有利的条件。

蛋鸡输卵管碱性磷酸酶的提纯和性质

用硫酸铵沉淀、离子交换层析、亲和层析等方法将蛋鸡输卵管碱性磷酸酶提纯了113倍。等电聚焦电泳该酶出现1条带,PI为4.3,聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳测得其分子量为127000,以磷酸苯二钠为底物,其Km值为4.76mmol/L,该酶对热稳定,对尿素敏感,对左旋咪唑不敏感,L-苯丙氨酸和L-色氨酸对该酶有较强的抑制作用,EDTA对该酶有一定程度的抑制作用,一定浓度的Mg2+、Mn2+、Zn2+、Ca2+、Cu2+、Co2+、Fe3+、Cd2+、Se4+对该酶均有不同程度的激活作用,除Mg2+和Mn+2外,高浓度的上述阳离子对该酶均有抑制作用。

蛋鸡输卵管碳酸酐酶的提纯和性质

通过电动匀浆、硫酸铵沉淀、Sephadex G-75凝胶过滤、DE-23离子交换层析和Sulfamylon-Sepharose 4 B亲和层析等方法,从蛋鸡输卵管中提纯了碳酸酐酶(CA)。提纯倍数为171倍。提纯后经聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳鉴定其纯度,结果为1条蛋白带。测定CA分子量为29 800。该酶对热较敏感,于56℃下作用10min,其活性丧失65.5%;氨苯磺胺对CA有较强抑制作用,100μmol/L时使其活性几乎完全丧失;谷胱甘肽在0.5mmol/L时对CA有较微弱的激活作用,以后随着浓度升高则呈抑制效应;半胱氨酸对CA抑制作用较弱,50mmol/L时使其活性丧失10.14%;除Ca2+外,多种金属离子对CA均有不同程度的抑制作用,其中Cu2+、Zn2+、Ca2+、Se4+对CA抑制作用较强,Mn2+、Mg2+、Co2+、Fe3+对CA抑制作用较弱。Ca2+在10-5mol/L时可最大程度地激活CA使其IAR提高到117.7%,以后随浓度升高,激活作用逐渐减弱甚至呈抑制作用。