肝细胞癌中APC基因启动子甲基化及蛋白表达的研究

目的:探讨肝细胞癌中APC基因启动子甲基化状态及蛋白表达的临床意义。方法:应用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)和免疫组织化学方法检测61例HCC及相应的癌旁肝组织中APC基因启动子甲基化状态和蛋白表达水平,分析甲基化与临床资料及蛋白表达的关系。结果:癌组织及癌旁组织中APC基因启动子甲基化阳性率分别为26.23%和11.47%(P<0.05)。癌与癌旁组织APC蛋白表达无统计学差异(P>0.05)。APC基因启动子甲基化与临床分期、门脉癌栓、术后复发、肝外转移、肿瘤大小、肿瘤分化、肿瘤个数及血清AFP值无关。APC基因启动子甲基化与蛋白表达无相关性。结论:APC启动子区甲基化可能参与了肝癌的发生,但在HCC的发展中的作用仍需进一步研究。

乙型肝炎肝硬化患者不同肝癌筛查方案的比较及对预后影响

目的:比较不同筛查方案对乙型肝炎肝硬化患者肝癌检出情况及预后的影响,探索针对这一人群的更佳筛查方案.方法:收集2007-01/2008-01北京佑安医院消化中心诊治的乙型肝炎肝硬化患者255例,按其筛查不同间隔时间分为间隔3 mo筛查组(A组)82例、间隔6 mo筛查组(B组)173例.筛查指标为血清甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)及B超,随访4年.结果:255例患者,至随访结束累计检出肝癌33例(A组:16例;B组:17例),对检出的肝癌患者继续随访2年,随访结束时累计生存率,A组81.3%(13/16)高于B组47.1%(8/17)(P=0.071).A组中巴塞罗那肝癌分期中属于早期(A期)者占68.8%(11/16),显著高于B组的5.9%(1/17)(P=0.000).结论:针对乙型肝炎肝硬化患者,间隔3 mo进行筛查可提高早期肝癌检出率、使其获得更多可根治性治疗的机会,有望延长生存期.

荧光定量RT-PCR检测AFP mRNA基因表达方法的建立

目的 建立荧光定量RT PCR检测检测AFPmRNA基因表达的方法。方法 提取肝癌细胞株HepG2 的总RNA ,进行RT PCR扩增AFPmRNA特异性片段 ,纯化PCR产物并与pMD 18 T载体连接 ,构建重组质粒。结果 重组的质粒经酶切和测序鉴定 ,目的片段已插入 pMD 18 T载体内。 结论 成功建立荧光定量RT PCR检测AFPmRNA基因表达的方法。

Survivin基因与Bcl-2/bax在不同肝癌细胞中的表达研究

目的:探讨Survivin基因在肝癌细胞中的表达及与Bcl-2/bax的关系。方法:体外培养的人肝癌细胞SMMC-7721、Hep-G2及正常肝细胞,采用RT-PCR法,免疫组织化学检测Survivin及Bcl-2/bax基因的表达情况。结果:免疫组织化学法显示肝癌细胞中有Survivin基因表达,且在SMMC-7721比在Hep-G2表达更明显,而在正常肝细胞中Survivin基因表达不明显;Survivin高表达的细胞,Bcl-2也增高。RT-PCR法显示Survivin基因的表达在肝癌细胞中增加。结论:Survivin基因与人肝癌细胞SMMC-7721及Hep-G2有关,与肝癌细胞的分型相关,由此推断,Survivin基因与肝癌的发生、发展及预后有关。