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过表达PRRX1通过p53介导的线粒体凋亡途径诱导肝癌SMMC7721细胞凋亡 被引量:15
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作者 尹东亮 卢沛林 +2 位作者 尹润龙 黄会杰 林志强 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期662-668,共7页
目的:探讨配对相关同源框1蛋白(PRRX1)过表达对肝癌SMMC7721细胞凋亡的影响及其分子机制。方法:分别用慢病毒介导PRRX1过表达载体(pGMLV-PRRX1)、空载质粒(Vector)感染人肝癌SMMC7721细胞,用qPCR和WB实验检测慢病毒感染后细胞中PRRX1 m... 目的:探讨配对相关同源框1蛋白(PRRX1)过表达对肝癌SMMC7721细胞凋亡的影响及其分子机制。方法:分别用慢病毒介导PRRX1过表达载体(pGMLV-PRRX1)、空载质粒(Vector)感染人肝癌SMMC7721细胞,用qPCR和WB实验检测慢病毒感染后细胞中PRRX1 mRNA和蛋白的表达变化,用CCK-8法、Annexin-V FITC/PI染色流式细胞术分别检测PRRX1过表达对SMMC7721细胞增殖、凋亡的影响,用线粒体膜电位检测试剂盒(JC-10染色法)检测细胞线粒体膜电位变化,用caspase活性检测试剂盒(分光光度法)测定细胞中caspase-8和caspase-9酶活性,用WB实验检测细胞中p53、Bcl-2、Bax、Fas、Cleaved-caspase-3以及线粒体和细胞质中细胞色素C(Cty C)蛋白的表达。结果:成功构建PRRX1过表达的SMMC7721细胞株,感染细胞中PRRX1 mRNA和蛋白的表达水平显著升高(均P<0.01)。与对照组和空载组比较,PRRX1过表达组SMMC7721细胞的增殖能力显著下降、细胞凋亡率显著增高、Cleaved-caspase-3剪切水平显著升高、线粒体膜电位显著下降、线粒体中Cty C蛋白表达下调、胞质中Cty C蛋白表达上调以及caspase-9酶活性升高(P<0.05或P<0.01),同时p53和Bax蛋白表达增加而Bcl-2蛋白表达降低(均P<0.05),但Fas蛋白表达及caspase-8酶活性无显著变化(均P>0.05)。结论:PRRX1过表达可诱导肝癌SMMC7721细胞凋亡,其机制可能与p53介导的线粒体凋亡途径被激活有关。 展开更多
关键词 配对相关同源框1蛋白 肝癌 smmc7721细胞 P53 线粒体 凋亡
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siRNA沉默新趋化因子VCC-1抑制SMMC7721肝癌细胞体外克隆形成能力和体内成瘤性 被引量:4
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作者 牟霞 李明 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期347-349,353,共4页
目的:探讨siRNA靶向抑制VCC-1表达对人肝癌细胞株SMMC27721成瘤性的影响。方法:用软琼脂克隆形成实验、裸鼠成瘤实验等研究siRNA靶向抑制VCC-1表达对SMMC7721细胞克隆形成能力及裸鼠成瘤性的影响。结果:软琼脂克隆形成实验结果显示siRN... 目的:探讨siRNA靶向抑制VCC-1表达对人肝癌细胞株SMMC27721成瘤性的影响。方法:用软琼脂克隆形成实验、裸鼠成瘤实验等研究siRNA靶向抑制VCC-1表达对SMMC7721细胞克隆形成能力及裸鼠成瘤性的影响。结果:软琼脂克隆形成实验结果显示siRNA靶向抑制VCC-1表达可显著降低SMMC7721肝癌细胞的克隆形成能力(P<0.01);裸鼠成瘤实验显示注射shVCC1-1组肝癌细胞的裸鼠,比注射干扰阴性对照shNC组肝癌细胞及未处理对照组肝癌细胞的裸鼠的瘤体生长速度慢,瘤体重量轻、体积小(P<0.01)。结论:siRNA抑制VCC-1在SMMC7721中的表达,在一定程度上可以抑制其体外克隆形成能力及体内成瘤性。 展开更多
关键词 VCC-1 肝癌 smmc7721细胞 SIRNA
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FXYD6过表达对肝细胞癌SMMC7721细胞5-Fu化疗敏感性的影响 被引量:1
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作者 陈雄飞 丁立爽 +5 位作者 孔德帅 赵秀雷 廖丽丽 张耀敏 李凤山 刘汝海 《山东医药》 CAS 2021年第11期41-44,共4页
目的观察FXYD离子转运调节因子6(FXYD6)过表达对肝细胞癌SMMC7721细胞5-氟尿嘧啶(5-Fu)化疗敏感性的影响。方法将肝细胞癌SMMC7721细胞分为过表达组和对照组,分别转染pcDNA3.1/FXYD6和pcD-NA3.1/Vector真核质粒,培养48 h筛选SMMC7721抗... 目的观察FXYD离子转运调节因子6(FXYD6)过表达对肝细胞癌SMMC7721细胞5-氟尿嘧啶(5-Fu)化疗敏感性的影响。方法将肝细胞癌SMMC7721细胞分为过表达组和对照组,分别转染pcDNA3.1/FXYD6和pcD-NA3.1/Vector真核质粒,培养48 h筛选SMMC7721抗性克隆。取两组转染后的抗性克隆细胞,分别加入终浓度为0、12.5、25、50、100μg/mL的5-Fu作用24、36、48 h,采用MTT法检测细胞增殖抑制率。取两组转染后的细胞,加入终浓度为25μg/L的5-Fu作用48 h,采用流式细胞术检测细胞凋亡率。结果随着5-Fu浓度增加和作用时间延长,两组细胞增殖抑制率均呈升高趋势。5-Fu浓度为12.5μg/mL时,两组作用24、36、48 h的细胞增殖抑制率比较均无明显差异(P均>0.05);5-Fu浓度为25、50、100μg/mL时,过表达组作用24、36、48 h的细胞增殖抑制率均明显低于对照组同时间点(P均<0.01)。观察组细胞凋亡率为35.62%±3.98%,对照组为46.19%±6.60%,两组比较P<0.01。结论 FXYD6蛋白过表达可降低肝细胞癌SMMC7721细胞对5-Fu的化疗敏感性。 展开更多
关键词 FXYD6蛋白 肝细胞癌 smmc7721细胞 5-氟尿嘧啶 化疗敏感性
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甘氨鹅脱氧胆酸钠对肝癌SMMC7721细胞凋亡诱导的影响 被引量:1
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作者 陈江 谢明均 +3 位作者 逯心敏 代琼 郭渝 李光富 《现代检验医学杂志》 CAS 2009年第3期118-120,共3页
目的探讨甘氨鹅脱氧胆酸(glycochenodeoxycholic cacid,OCDCA)对人肝癌细胞SMMC7721增殖以及细胞凋亡的影响。方法采用96孔细胞培养板体外培养人肝癌细胞株SMMC7721,GCDCA分别处理细胞24,48,72h,进行MTT实验,计算肝癌细胞的生... 目的探讨甘氨鹅脱氧胆酸(glycochenodeoxycholic cacid,OCDCA)对人肝癌细胞SMMC7721增殖以及细胞凋亡的影响。方法采用96孔细胞培养板体外培养人肝癌细胞株SMMC7721,GCDCA分别处理细胞24,48,72h,进行MTT实验,计算肝癌细胞的生长抑制率;采用流式细胞仪检测GCDCA对SMMC7721细胞凋亡的影响。结果不同浓度的GCDCA对肝癌细胞SMMC7721均有一定程度的生长抑制作用,高浓度的GCDCA(300μmol/L)处理组对SMMC7721细胞有较强的毒性损伤。低浓度的GCDCA(200μmol/L)处理组能明显诱导细胞凋亡,凋亡率随处理时问的延长而增加。结论GCDCA对人肝癌细胞有增殖抑制作用并能诱导SMMC7721细胞凋亡。 展开更多
关键词 甘氨鹅脱氧胆酸 肝癌smmc7721细胞 细胞凋亡 增殖抑制
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GCDCA对肝癌SMMC7721细胞诱导分化的影响 被引量:1
5
作者 陈江 逯心敏 +1 位作者 朱文静 郭渝 《现代检验医学杂志》 CAS 2011年第3期89-91,共3页
目的探讨甘氨鹅脱氧胆酸(glycodeoxycholicacid,GCDCA)对人肝癌细胞SMMC7721诱导分化的影响。方法采用96孔细胞培养板体外培养人肝癌细胞株SMMC7721,GCDCA分别处理细胞48,72,96h,采用放射免疫法检测肝癌sMMC7721细胞的甲胎蛋白(... 目的探讨甘氨鹅脱氧胆酸(glycodeoxycholicacid,GCDCA)对人肝癌细胞SMMC7721诱导分化的影响。方法采用96孔细胞培养板体外培养人肝癌细胞株SMMC7721,GCDCA分别处理细胞48,72,96h,采用放射免疫法检测肝癌sMMC7721细胞的甲胎蛋白(AFP)、清蛋白(ALB)分泌量,同时利用免疫组化分析肝癌SMMC7721细胞AFP表达的影响。结果GCDCA能显著抑制肝癌细胞SMMC7721AFP的分泌,降低其表达,且能大大提高ALB的分泌。其效果GCI)-CA200umol/L处理组优于GCDCA100umol/L处理组,均有时效和量效的关系。结论GCDCA能抑制肝癌SMMC7721细胞AFP的表达和分泌,提高ALB的分泌,具有诱导肝癌细胞SMMC7721细胞良性分化的能力。 展开更多
关键词 甘氨鹅脱氧胆酸 肝癌smmc7721细胞 清蛋白 甲胎蛋白 诱导分化
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siRNA介导的新趋化因子VCC-1沉默对人SMMC7721肝癌细胞生长的影响
6
作者 牟霞 陈瑶 +1 位作者 王穗海 李明 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期682-685,共4页
目的探讨siRNA靶向抑制VCC-1表达对人肝癌细胞株SMMC7721生长的影响。方法采用脂质体法将siRNA质粒导入SMMC7721细胞,建立VEGF相关的趋化因子1(VCC-1)基因表达沉默的肝癌细胞系,用Western blot检测细胞中VCC-1的表达水平,用MTT法、软琼... 目的探讨siRNA靶向抑制VCC-1表达对人肝癌细胞株SMMC7721生长的影响。方法采用脂质体法将siRNA质粒导入SMMC7721细胞,建立VEGF相关的趋化因子1(VCC-1)基因表达沉默的肝癌细胞系,用Western blot检测细胞中VCC-1的表达水平,用MTT法、软琼脂克隆形成实验等研究siRNA靶向抑制VCC-1表达对SMMC7721细胞生长的影响。结果Western blot结果显示RNA干扰组(shVCC1-1组)细胞VCC-1蛋白表达水平明显低于对照组(P<0.01),MTT法结果显示shVCC1-1组细胞增殖速度、克隆形成率均低于对照组(P<0.05)。结论 siRNA靶向抑制VCC-1表达可以抑制人SMMC7721肝癌细胞增殖能力及克隆形成能力。 展开更多
关键词 VCC-1 肝癌 smmc7721细胞 SIRNA
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大豆黄酮对人肝癌SMMC7721细胞增殖及肿瘤干细胞CD133表达的影响
7
作者 张敏 孙宏治 +2 位作者 王巍 白光 于晓东 《中国生化药物杂志》 CAS 北大核心 2014年第3期28-30,共3页
目的探讨大豆黄酮对人肝癌SMMC7721细胞增殖及肿瘤干细胞CD133表达的影响。方法将肝癌SMMC7721细胞分成6组:阴性对照组不加药;根据添加大豆黄酮浓度的不同,分成100μg/mL组、200μg/mL组、300μg/mL组、400μg/mL组、500μg/mL组,培养2... 目的探讨大豆黄酮对人肝癌SMMC7721细胞增殖及肿瘤干细胞CD133表达的影响。方法将肝癌SMMC7721细胞分成6组:阴性对照组不加药;根据添加大豆黄酮浓度的不同,分成100μg/mL组、200μg/mL组、300μg/mL组、400μg/mL组、500μg/mL组,培养24 h、48 h、72h后MTT法检测细胞的抑制率、测定每组细胞中己糖激酶和碱性磷酸酶活性和CD133表达水平并进行比较。结果大豆黄酮浓度越高,对肝癌细胞的抑制作用越强;随着处理时间的延长,抑制作用有所下降;尤其在400μg/mL浓度组和500μg/mL浓度组,时间效应更明显。与对照组相比,经不同浓度大豆黄酮处理的肝癌细胞已糖激酶活性和碱性磷酸酶活性均显著降低(P<0.01),肿瘤干细胞CD133表达明显下降(P<0.01),并且浓度越高下降幅度越大。结论大豆黄酮能够抑制肝癌SMMC7721细胞的增殖,并降低肿瘤干细胞CD133的表达。 展开更多
关键词 大豆黄酮 肝癌smmc7721细胞 CD133
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Inhibitory activity of polysaccharide extracts from three kinds of edible fungi on proliferation of human hepatoma SMMC-7721 cell and mouse implanted S180 tumor 被引量:5
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作者 Jiang SM Xiao ZM Xu ZH 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 1999年第5期404-407,共4页
AIM To determine the activities ofpolysaccharide extracts from Flammulina velutipes (Curt. ex Fr. ) Sing (FV), Lentinusedodes (LE) and Agaricus bisporus Sing (AB)on the proliferation of human hepatoma SMMC-7721 cells ... AIM To determine the activities ofpolysaccharide extracts from Flammulina velutipes (Curt. ex Fr. ) Sing (FV), Lentinusedodes (LE) and Agaricus bisporus Sing (AB)on the proliferation of human hepatoma SMMC-7721 cells in vitro and on mouse implanted S-180tumors in vivo.METHODS The polysaccharide extracts were isolated from the fruit bodies of FV, LE and AB by the methods of hot-water extraction, Sevag’sremoval of proteins, ethanol precipitation,trypsin digestion and ethanol fractionalprecipitation. Human hepatoma SMMC-7721 cells were treated with 50 mg/L Polysaccharide extracts, and the mitosis index, mitochondria activity and cell proliferation were detected at different times in both control and experimental groups. The mice with S-180 implanted tumors were injected with the polysaccharide extracts at 24 mg/ kg body weight for 9 d and the tumorweight was measured on the 15th day.RESULTS The mitosis index of hepatoma cells in vitro could be significantly decreased by treatment with the polysaccharide extracts fromthe three kinds of edible fungi (P < 0 .005 ). Thecell numbers and mitochondria activity of SMMC7721 cells treated with polysaccharide extracts were lower than those in control groups (P <0.005). The inhibition rates of polysaccharide extracts against implanted S-180 tumors in mice were 52.8%, 56.6% and 51 .9% respectivelycompared with that in c0ntrol gr0ups.CONCLUSI0N The POIysaccharide extractsfrom the three kinds of edible fungi could inhibitnot only the Cultured malignant cells in vitfO butalso impIanted Sl80 tum0r i0 vivo. 展开更多
关键词 polysaccharide edible fungi liver neoplasm carcinoma hepatocellular smmc7721 TUMOR cell cultured IMPLANTED tumor S-180 cell PROLIFERATION
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IGF-1R基因通过调控BMP2表达影响SMMC7721细胞的增殖和凋亡 被引量:1
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作者 傅敬忠 黄龙璋 +3 位作者 于强 储节胜 匡美波 徐冠军 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期297-302,共6页
背景与目的:胰岛素生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)是一种重要的肽类激素,通过与其受体(IGF-1 receptor,IGF-1R)和胰岛素受体(insulin receptor,IR)结合并激活下游信号通路发挥生物学作用,骨形态发生蛋白(bone morphoge... 背景与目的:胰岛素生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)是一种重要的肽类激素,通过与其受体(IGF-1 receptor,IGF-1R)和胰岛素受体(insulin receptor,IR)结合并激活下游信号通路发挥生物学作用,骨形态发生蛋白(bone morphogenetic proteins,BMPs)因可促进多种肿瘤细胞的增殖和侵袭而日益成为肿瘤分子研究领域的热点。该研究通过RNA干扰(RNAi)技术沉默IGF-1R基因,探讨其对肝癌SMMC7721细胞中BMP2表达的影响以及对细胞增殖和凋亡的影响。方法:构建靶向IGF-1R基因的RNAi真核表达质粒,转染至肝癌SMMC7721细胞,用反转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)和蛋白[质]印迹法(Western blot)检测IGF-1R和BMP2基因表达抑制效应,MTT实验检测IGF-1R基因沉默后细胞生长曲线,流式细胞术检测IGF-1R基因沉默后细胞凋亡情况。结果:成功构建靶向IGF-1R基因的真核表达质粒,IGF-1R-si RNA-1和IGF-1R-si RNA-2转染至肝癌SMMC7721细胞后,对IGF-1R基因的m RNA抑制效率分别达到68.9%和80.7%(P<0.05),对BMP2基因的m RNA抑制效率分别达到79.5%和83.3%(P<0.05),对IGF-1R蛋白表达抑制率分别为46.1%和62.1%,对BMP2蛋白表达抑制率分别为42.5%和60.9%(P<0.05)。根据MTT实验结果,绘制的生长曲线显示,IGF-1R基因沉默后SMMC7721细胞增殖速率明显低于对照组(P<0.05),细胞凋亡比例高于对照组(P<0.05)。结论:IGF-1R基因沉默表达能介导BMP2基因不同水平下调表达,抑制SMMC7721细胞增殖,并促进细胞发生凋亡。 展开更多
关键词 IGF-1R基因 BMP2基因 肝癌smmc7721细胞 细胞增殖 细胞凋亡
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不同成熟度预知子种子对人肝癌细胞恶性增殖的影响实验 被引量:7
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作者 卢涛 许群瑶 +3 位作者 郝尧 宋艳荣 任红艳 方肇勤 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2018年第1期193-196,I0023,I0024,共6页
目的:观察不同成熟度预知子种子对肝癌SMMC7721细胞恶性增殖的抑制作用与差异。方法:采用乙醇回流提取法提取不同成熟度预知子种子药用成分,MTT检测其对SMMC7721肝癌细胞恶性增殖及观察形态学的影响。结果:不同成熟度预知子种子提取... 目的:观察不同成熟度预知子种子对肝癌SMMC7721细胞恶性增殖的抑制作用与差异。方法:采用乙醇回流提取法提取不同成熟度预知子种子药用成分,MTT检测其对SMMC7721肝癌细胞恶性增殖及观察形态学的影响。结果:不同成熟度预知子种子提取物对人肝癌细胞恶性增殖均存在抑制作用且存在差异,成熟者强于未成熟者;且成熟者诱导细胞内空泡发生的作用强,提示其诱导内质网应激成分得到富集。结论:随着预知子成熟,其种子中抑制肝癌细胞增殖和诱导其内质网应激的成分均得到富集,提示应收获成熟的预知子,提高其药用价值。 展开更多
关键词 肝癌 smmc7721细胞 预知子 成熟度 内质网应激
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大黄素对人肝癌SMMC7721细胞增殖的抑制作用 被引量:6
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作者 王昕雯 朱国光 《中国药房》 CAS 北大核心 2016年第1期58-60,共3页
目的:研究大黄素对人肝癌SMMC7721细胞增殖的抑制作用。方法:以0(阴性对照)、25、37.5、50、62.5、75、87.5、100μmol/L大黄素溶液和100μmol/L 5-氟尿嘧啶(5-FU)培养SMMC7721细胞24、48、72 h,检测细胞光密度,计算增殖抑制率。以0(阴... 目的:研究大黄素对人肝癌SMMC7721细胞增殖的抑制作用。方法:以0(阴性对照)、25、37.5、50、62.5、75、87.5、100μmol/L大黄素溶液和100μmol/L 5-氟尿嘧啶(5-FU)培养SMMC7721细胞24、48、72 h,检测细胞光密度,计算增殖抑制率。以0(阴性对照)、25、50、75μmol/L大黄素溶液和100μmol/L 5-FU培养SMMC7721细胞48 h,检测细胞凋亡率、周期分布和细胞Bax、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)基因表达。结果:与阴性对照比较,25、37.5、50、62.5、75、87.5、100μmol/L大黄素溶液和100μmol/L 5-FU作用后细胞增殖抑制率升高,且与大黄素的浓度和作用时间呈正相关。与阴性对照比较,25、50、75μmol/L大黄素和100μmol/L 5-FU作用后细胞凋亡率升高、Bax基因表达增强、Bcl-2基因表达减弱,其中50、75μmol/L大黄素溶液和100μmol/L 5-FU能明显滞留细胞于G0/G1期(P<0.05或P<0.01)。结论:大黄素能抑制SMMC7721细胞增殖,促进其凋亡,阻止其生长。 展开更多
关键词 大黄素 人肝癌smmc7721细胞 BAX B淋巴细胞瘤-2 细胞周期 凋亡
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奥沙利铂对人肝癌细胞株SMMC7721的体外抗肿瘤作用 被引量:1
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作者 江敏华 童福易 甘建和 《苏州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2009年第5期871-873,910,I0001,共5页
目的研究奥沙利铂对人肝癌细胞株SMMC7721生长抑制及诱导凋亡的作用并探讨其机制。方法以不同浓度的奥沙利铂作用于SMMC7721细胞,应用MTT法检测奥沙利铂对SMMC7721细胞生长的抑制作用;流式细胞术检测细胞周期和凋亡;Hoechst33258荧光染... 目的研究奥沙利铂对人肝癌细胞株SMMC7721生长抑制及诱导凋亡的作用并探讨其机制。方法以不同浓度的奥沙利铂作用于SMMC7721细胞,应用MTT法检测奥沙利铂对SMMC7721细胞生长的抑制作用;流式细胞术检测细胞周期和凋亡;Hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡形态学变化;采用分光光度法检测caspase-3、cas-pase-8、caspase-9的活性。结果奥沙利铂可抑制SMMC7721细胞的生长并具有时间和剂量依赖性,Hoechst33258荧光染色可见典型的细胞凋亡特征,流式细胞仪检测到细胞阻滞于S期和SubG1峰。经过奥沙利铂诱导,caspase-3、caspase-9活性被上调,较对照组明显升高(P<0.05),caspase-8活性未见明显改变(P>0.05)。结论奥沙利铂具有抑制肝癌细胞株SMMC7721增殖及诱导凋亡作用,此作用可能通过激活内源性凋亡途径实现。 展开更多
关键词 奥沙利铂 肝癌 smmc7721细胞 凋亡 细胞周期
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