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GST-HAI-1融合蛋白的表达及抗人HAI-1单克隆抗体的制备 被引量：4
1
作者 程海霞 曹江 +1 位作者 沈建根 郑树 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期496-500,共5页
制备抗人肝细胞生长因子激活物抑制因子 (HAI 1 )单克隆抗体 ,为对HAI 1进行进一步的研究打下基础。将人HAI 1cDNA分段克隆 ,构建GST HAI 1融合蛋白原核表达载体 ,转化大肠杆菌后加IPTG诱导融合蛋白表达 ,经制备型SDS PAGE法分离表达的G... 制备抗人肝细胞生长因子激活物抑制因子 (HAI 1 )单克隆抗体 ,为对HAI 1进行进一步的研究打下基础。将人HAI 1cDNA分段克隆 ,构建GST HAI 1融合蛋白原核表达载体 ,转化大肠杆菌后加IPTG诱导融合蛋白表达 ,经制备型SDS PAGE法分离表达的GST HAI 1融合蛋白 ,通过割胶、电洗脱回收融合蛋白 ,并以此为抗原免疫BALB c小鼠 ,应用细胞融合技术制备产生抗人HAI 1单克隆抗体的杂交瘤 ,以ELISA、Westernblot和免疫组织化学染色进行鉴定。最终获得抗人HAI 1单克隆抗体杂交瘤细胞株ZMC6 ,产生的单克隆抗体可特异性地与表达的GST HAI 1融合蛋白反应 ,并可识别大肠组织中的膜型及脱落型HAI 1蛋白。该单克隆抗体的制备成功 ,为深入研究HAI 展开更多
关键词 肝细胞生长因子激活物抑制因子(hai-I) 融合蛋白 单克隆抗体
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