太子参脱毒苗培养、化学成分及指纹图谱研究进展

太子参是我国的传统中药材,含有多种生物活性成分,如糖类、环肽类、皂苷类、微量元素、挥发油类等。现代药理学研究表明这些化学成分具有增强记忆、免疫调节、抑制食管癌、降血糖、促血管新生等活性。近年来,多地大力推广人工栽培,建设太子参GAP基地。但亦出现了一些问题,如太子参病毒病呈逐年加重、品种混乱、内在质量参差不齐等。针对这些问题学者们开展了诸多研究。本文从太子参脱毒苗研究、化学成分研究及指纹图谱研究等方面进行综述,以期为该资源的种植栽培、药物研发、质量标准建立等提供参考。

不同产地太子参环肽B含量测定

目的测定并比较不同产地中太子参环肽B的含量,为太子参资源合理开发利用提供参考。方法采用高效液相色谱法测定太子参中环肽B的含量。结果不同产地太子参栽培品中环肽B含量以江苏为最高,安徽宣城、贵州施秉次之,福建柘荣最低,但均低于江苏野生太子参;柘参2号引种到江苏栽培,环肽B含量明显提高。结论不同产地太子参中环肽B的含量差异明显,为太子参的育种、生产及资源利用提供了理论依据。

乌当区太子参环肽B含量及其与元素含量的相关性

为了解贵阳乌当区太子参的品质特征及推广种植提供参考,应用高效液相色谱法(HLPC)对乌当区太子参进行环肽B含量测定,并与不同产地土壤地层、太子参和种植土壤中元素含量及p H进行相关性分析。结果表明:1乌当区太子参环肽B含量平均为0.022%,其中以种植在清虚洞组第2段地层上的品质较好,高台组至石冷水组和娄山关群地层上的品质稍次,清虚洞组第1段地层上的稍差。2太子参环肽B含量与种植土壤Ca含量(P<0.01)、p H(P<0.01)、Cd含量(P<0.05)呈显著正相关,与Rb含量(P<0.05)呈显著负相关。3太子参中环肽B含量与Mg含量(P<0.05)呈显著正相关,与Mn含量(P<0.05)呈显著负相关。结论:贵阳乌当区太子参环肽B含量整体上符合《中华人民共和国药典》(2010年版)规定不得低于0.020%的要求,但在规模化种植太子参时,应选取适宜区域种植。

中药太子参中环肽A和B含量测定的HPLC方法研究

目的：以太子参环肽A（HA）和B（HB）为对照品，研究建立中药太子参中环肽类成分的含量测定方法。方法：应厢高效液相色谱（HPLC）通过标准曲线测定、稳定性实验、精密度实验、重现性实验、回收率实验对10批不同市售太子参药材的HA和HB的含量及其HPLC图进行了研究。结果：太子参中HA和HB的含量分别为6．21×10^-5～3．19×10^-4mg／100g和1．89×10-^5～2．09×10^-3mg／100g。其HPLC图可分为3类：第1类以HB为主成分，HB的含量约为HA的10～30倍，江苏和安徽销售的太子参药材大多属于此类；第2类以HA为主成分，HA的含量约为HB的10～20倍，福建和北京销售的太子参药材大多属于此类；第3类以HA和HB含量在同一数量级，南京、杭州和昆明销售的太子参药材大多属于此类。结论：本实验方法重现性较好，不同销售地的太子参药材中HA和HB的含量存在差异，在其HPLC图中HA和HB为共有峰。

二维核磁共振谱测定植物新环肽—太子参环肽A和B中氨基酸序列

在植物新环肽[太子参环肽A(HA)和B(HB)]的结构研究中,应用COLOC谱较成功地解决了其氨基酸序列。结果表明当J值选择在6Hz-15Hz时,COLOC谱能满意地给出氮上含有活泼氢的氨基酸序列。

太子参改善斑马鱼和APP/PS 1小鼠学习记忆

太子参是一种可用于保健食品的传统中药,具有抗疲劳和调节免疫等作用,但神经保护和改善记忆作用报道较少。为探究太子参改善记忆和认知障碍的有效成分及作用机制,利用Aβ1-42脑室显微注射斑马鱼模型初步探究太子参醇提物对记忆的改善作用;CCK8试剂盒测定太子参水提物、醇提物、多糖、皂苷、环肽对Aβ25-35诱导皮层神经元存活率的影响;荧光定量PCR测定太子参环肽B(heterophyllin B,HB)对神经元中凋亡相关基因的表达,免疫细胞化学染色探究HB对神经元的保护作用;利用APP/PS 1转基因小鼠探究HB对痴呆样行为和记忆的改善作用。太子参醇提物给药后,斑马鱼新臂和奖励臂探寻的潜伏期显著降低,在新臂和奖励臂游动时间和总路程增加。HB显著增加神经元存活率及β3-tubulin、MAP2阳性突起的表达,并改善APP/PS 1转基因小鼠记忆障碍。综上,太子参的神经保护作用可能通过HB减少突起萎缩,从而改善认知功能障碍和记忆缺陷。

超微粉碎对太子参粉理化性质和有效成分含量的影响

目的研究超微粉碎对太子参粉的理化性质及太子参环肽B含量的影响。方法以太子参为原料,采用超微粉碎技术制备粉体,使用激光粒度仪、扫描电镜、粉体综合测定仪和质构仪进行理化性质研究,使用HPLC法测定太子参粉中环肽B的含量。结果与细粉相比,超微粉碎后的太子参粉粒径减小,粉体流动性变差,填充性变大,水合性能增大,HPLC法测得超微粉碎粉体中太子参环肽B含量比细粉大。结论超微粉碎技术可以影响太子参的理化性质,促进太子参环肽B的溶出。

硝态氮对太子参生长与环肽B含量的影响

以太子参“施太1号”为试材,采用植物组织培养的方法,研究了硝态氮用量对太子参生长发育与环肽B含量的影响,以期为太子参组培苗培育氮素用量提供参考依据。结果表明:不加氮时,太子参植株矮小、叶片黄化、根系形成较少;添加硝态氮后太子参长势变好,株高和叶片数增加、叶片颜色转为深绿色、根系形成增多;与不加氮相比,添加硝态氮显著提升了抗氧化酶活性、增加了氮素同化酶活性及养分吸收量,当硝态氮用量为20 mmol·L^(-1)时其生长发育最佳,当硝态氮用量为10 mmol·L^(-1)时太子参环肽B含量及前体基因prePhHB表达均达到最高。相关性分析结果表明,太子参环肽B含量及prePhHB表达均与其氮素含量呈显著正相关,说明提高太子参氮素含量可以促进环肽B合成。综上,以10~20 mmol·L^(-1)硝态氮作为氮源,可以促进组培太子参生长发育及环肽B积累。

HPLC同时测定绛糖宁胶囊中5种活性成分的含量及聚类分析

目的:建立HPLC法同时测定绛糖宁胶囊中太子参环肽B、葫芦素B、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷和毛蕊异黄酮的含量。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为Diamasil C18(200 mm×4.6 mm,5μm),柱温30℃;乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速:0.9 mL/min;检测波长:203 nm(太子参环肽B)、227 nm(葫芦素B)和254 nm(毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷和毛蕊异黄酮);采用SPSS 26.0统计软件对绛糖宁胶囊中5种成分含量进行聚类分析。结果:太子参环肽B、葫芦素B、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷和毛蕊异黄酮分别在1.16~23.20μg/mL、0.64~12.80μg/mL、8.78~175.60μg/mL、5.27~105.40μg/mL、3.59~71.80μg/mL范围内线性关系良好(r≥0.9991);平均加样回收率分别为98.52%、96.97%、100.15%、98.74%和99.34%,RSD分别为1.61%、1.26%、0.73%、1.12%和0.58%;10批样品聚类分析为2类。结论:该方法操作简便、重复性好,可用于绛糖宁胶囊中太子参环肽B、葫芦素B、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷和毛蕊异黄酮的含量测定。

HPLC法鉴别复方太子参口服液的研究

本试验采用高效液相色谱法(HPLC法)对复方太子参口服液中的太子参环肽B图谱进行分析,并探讨了其他可能作为复方太子参口服液定性定量的特征性成分。此法采用Welchrom C18(4.6×250mm,5μm)柱,柱温为室温、检测波长为203nm、流动相为乙腈-水(30∶70)、流速1.0mL/min、进样量20μL。结果表明复方太子参口服液中的太子参环肽B峰形、分离度均符合要求,此法可用于复方太子参口服液中太子参环肽B鉴别。复方太子参口服液中检测有其他太子参特征峰,也可用于复方太子参口服液鉴别。本研究将为高效液相色谱法鉴别复方太子参口服液提供宝贵的理论依据。

不同生长期太子参药效成分HPLC分析

目的考察不同生长期太子参药效成分环肽B动态变化规律,确立太子参的最佳采收期,为太子参GAP生产提供依据。方法采用HPLC法,色谱柱为Hedera ODS-2C18(4.6mm×250mm,5μm),以水-乙腈为流动相,流速为1.0mL/min,柱温30℃,检测波长203nm。结果不同生长时期太子参环肽B含量差异较大,在5月和7月含量较高。结论综合考虑药效成分含量与产量,太子参合理采收期应为7月,试验结果为太子参资源的开发利用提供了参考依据。

HPLC-DAD法同时测定肾衰宁胶囊中9种成分的含量

目的建立HPLC-DAD法同时测定肾衰宁胶囊中9种成分（太子参环肽B、盐酸小檗碱、橙皮苷、大黄素、大黄酚、丹参酮ⅡA、β-蜕皮甾酮、羟基红花黄色素A、甘草苷）的含量。方法采用Venusil ASB C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为甲醇-乙腈（50∶50,A）-0.1%甲酸水溶液（B）,梯度洗脱,洗脱程序如下：0~15 min（10%B）,15~45 min（10%~50%B）,45~60 min（50%~60%B）,60~85 min（60%~80%B）,85~100 min（10%B）;流速为0.9 m L·min-1,柱温35℃。结果 85 min内9个成分分离度良好,在各自的检测范围内浓度与峰面积呈良好的线性关系,r均〉0.9980,加样回收率为98.4%~102.2%,RSD均〈1.5%。结论该法简便可行,结果可靠,可为本制剂多指标成分的质量控制提供参考。

乐儿康糖浆的质量控制

目的建立高效液相色谱(HPLC)多指标成分定量测定与化学计量学相结合的乐儿康糖浆质量评价方法。方法采用Agilent TC-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温25℃;流动相乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱,流速0.8 mL·min^(-1);检测波长203 nm(检测太子参环肽B)、305 nm(检测桑皮苷A、桑辛素M和二氢桑色素)和254 nm(检测毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、芒柄花素和桑辛素);基于多指标成分含量测定结果,采用聚类分析、主成分分析等化学计量学方法对不同企业生产的乐儿康糖浆进行质量评价。结果太子参环肽B、桑皮苷A、桑辛素M、二氢桑色素、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、芒柄花素和桑辛素分别在0.86~17.20,2.19~43.80,1.87~37.40,0.76~15.20,2.64~52.80,1.71~34.20,4.97~99.40,1.18~23.60μg·mL^(-1)范围内线性关系良好(r≥0.9991);平均加样回收率分别为98.51%,99.38%,97.72%,96.96%,98.70%,97.91%,100.08%和99.03%,RSD分别为1.15%,0.92%,1.36%,1.25%,1.47%,1.12%,0.76%和0.83%;10批乐儿康糖浆供试品聚为2类,主成分分析结果表明主成分1—2是影响乐儿康糖浆质量评价的主要因子。结论该方法操作简便、重复性好,可用于乐儿康糖浆的质量控制。

基于HPLC多指标成分含量测定结合化学计量学的小儿康颗粒质量评价

目的建立HPLC多指标成分定量测定与化学计量学相结合的小儿康颗粒质量评价方法。方法以Waters SunFire C 18(250 mm×4.6 mm,5μm)为液相色谱柱,柱温30℃;流动相:乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱,体积流量:1.0 ml/min;检测波长分别为340 nm(牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷和金丝桃苷)、230 nm(氧化芍药苷、芍药苷和苯甲酰芍药苷)和203 nm(太子参环肽B);采用SPSS 26.0统计软件聚类分析、主成分分析等对不同厂家生产的小儿康颗粒进行质量评价。结果牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、金丝桃苷、氧化芍药苷、芍药苷、苯甲酰芍药苷、太子参环肽B分别在2.18~54.50、15.89~397.25、2.72~68.00、1.39~34.75、12.68~317.00、0.96~24.00、0.79~19.75μg/ml范围内线性关系良好(r≥0.9992);平均加样回收率分别为98.67%、100.11%、97.96%、97.68%、99.64%、96.86%、96.92%,RSD分别为1.48%、0.64%、1.27%、1.32%、0.91%、1.13%和0.87%;12批小儿康颗粒样品聚为3类,主成分分析结果显示,主成分1~3是影响小儿康颗粒质量评价的主要因子。结论该方法操作简便、重复性好,可用于小儿康颗粒的质量控制和综合评价。

HPLC梯度洗脱法同时测定通脉降糖胶囊中7种成分含量

目的:建立HPLC梯度洗脱法同时测定通脉降糖胶囊中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、芒柄花素、太子参环肽B、绞股蓝皂苷XLIX、绞股蓝皂苷A和绞股蓝皂苷ⅩⅦ含量的含量。方法:采用Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C 18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温25℃;流动相:乙腈-0.3%甲酸水溶液,梯度洗脱,体积流量1.0 mL·min^-1;检测波长分别为260 nm(检测毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷和芒柄花素)和203 nm(检测太子参环肽B、绞股蓝皂苷XLIX、绞股蓝皂苷A和绞股蓝皂苷ⅩⅦ)。结果:毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、芒柄花素、太子参环肽B、绞股蓝皂苷XLIX、绞股蓝皂苷A和绞股蓝皂苷ⅩⅦ分别在3.76~94.00、2.19~54.75、5.12~128.00、0.86~21.50、7.98~199.50、8.59~214.75、11.96~299.00μg·mL-1线性关系良好(r≥0.9992),平均加样回收率分别为99.50%、97.97%、98.87%、96.93%、100.00%、99.03%和98.94%,RSD分别为0.87%、1.55%、1.04%、1.18%、0.73%、1.49%和0.90%。结论:该方法操作便捷、重复性好,可用于通脉降糖胶囊中多指标性成分的质量控制。

HPLC法测定太子参黄芪口服液中太子参环肽B的含量

目的：建立太子参黄芪口服液中太子参环肽B含量测定的HPLC方法。方法采用Phenomenex Luna-C18柱（4.6 mm×250 mm，5μm），以乙腈-0.1%醋酸溶液为流动相，梯度洗脱，流速1.0 ml/min，柱温30℃，检测波长203 nm。结果太子参环肽B在0.016～0.320 mg/ml浓度范围内有良好线性关系（r＝0.9998），平均加样回收率为98.92%，RSD为0.80%。检测5批太子参黄芪口服液中太子参环肽B的平均含量为1.63 mg/ml。结论本方法灵敏度高、准确、重复性好、专属性强，可用于太子参黄芪口服液的质量控制。

太子参化学成分、药理作用和应用的研究进展

太子参Pseudostellariae Radix是中国传统补益中药材之一,兼具药用和食疗功效,主要含有挥发油、多糖、环肽、生物碱、皂苷、酚类等成分,具有降血糖、抗炎、抗癌、保护细胞、抑制酪氨酸酶、免疫调节等药理作用。对太子参的化学成分及其药理作用,以及太子参在临床、食疗、保健食品、化妆品、兽药制剂和功能性饲料添加剂等方面应用进行总结,为太子参进一步开发利用提供依据。

基于HPLC 多成分定量分析不同产地太子参药材的质量

目的建立太子参Pseudostellaria heterophylla HPLC多成分定量检测方法,结合化学计量学和加权逼近理想解排序(TOPSIS)法对不同产地太子参药材质量进行评价。方法以Agilent Zorbax ODS C18柱为色谱柱,乙腈-0.2%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长分别为254、285、203 nm,采用HPLC法同时检测尿苷、肌苷、鸟苷、川陈皮素、染料木苷、木犀草素、金合欢素、白杨素、水杨酸、阿魏酸、肉桂酸、太子参环肽B、太子参环肽A、乌苏酸和β-谷甾醇的含量。利用SIMCA 14.1和SPSS 26.0软件对上述15种成分含量检测结果进行主成分分析(principal component analysis,PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA),挖掘影响太子参产品质量的差异性标志物。运用加权TOPSIS法进行7省17批次太子参药材综合质量评价。结果HPLC多成分定量分析方法学考察符合《中国药典》规定要求。PCA结果显示前2个主成分特征值均大于1,累积方差贡献率为87.843%,17批次太子参样品分为3类。OPLS-DA筛选出尿苷、金合欢素、肌苷、太子参环肽A、太子参环肽B、β-谷甾醇和阿魏酸为影响太子参产品质量的差异标志物。EW-TOPSIS欧氏贴近度在0.2585~0.6425,表明不同产地太子参质量差异较大,其中江苏、安徽地区太子参排名靠前,其次为福建、江西和湖南地区,云南、四川地区太子参排名靠后。结论建立的太子参HPLC多成分定量检测方法操作便捷、结果准确可靠,PCA、OPLS-DA联合加权TOPSIS法可用于不同产地太子参药材的质量评价。

基于HPLC多指标成分定量测定联合化学计量学、熵权优劣解距离法的降糖通脉片质量评价研究

目的 采用HPLC法多指标成分定量测定联合正交偏最小二乘-判别分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA)及熵权优劣解距离法(entropy weight technique for order preference by similarity to ideal solution,EWTOPSIS)对不同厂家降糖通脉片(Jiangtang Tongmai Tablets,JTT)质量进行综合评价,为科学评价JTT质量提供参考。方法 收集3个厂家15批JTT样品,采用HPLC法同时测定JTT中3’-羟基葛根素、葛根素、3’-甲氧基葛根素、太子参环肽B、哈巴苷、哈巴俄苷、二氢丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮Ⅱ_(A)的含量,运用SPSS26.0和SIMCA14.1统计软件进行层次聚类分析(hierarchical cluster analysis,HCA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)和OPLS-DA,建立JTT HCA、PCA和OPLS-DA模型,获取得分图和载荷图及变量重要性投影(variable importance in projection,VIP)值,筛选并分析影响JTT质量差异的主要物质基础,并运用EW-TOPSIS法对不同厂家JTT进行质量优劣性评价。结果 3’-羟基葛根素、葛根素、3’-甲氧基葛根素、太子参环肽B、哈巴苷、哈巴俄苷、二氢丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮Ⅱ_(A)分别在5.97~298.50、14.45~722.50、4.89~244.50、0.58~29.00、6.55~327.50、2.46~123.00、1.39~69.50、3.56~178.00、4.25~212.50和7.97~398.50μg/mL(r≥0.999 1)线性关系良好,平均加样回收率(n=9)分别为99.53%、100.10%、98.95%、96.97%、100.03%、98.84%、97.06%、98.37%、99.31%、99.18%,RSD分别为0.71%、0.63%、0.98%、1.47%、0.79%、1.30%、1.26%、1.18%、1.39%、1.55%。化学计量学分析结果显示15批JTT样品聚为3类,同一厂家JTT样品聚为一类,不同生产厂家样品质量存在一定差异;葛根素、丹参酮Ⅰ、哈巴苷和丹参酮Ⅱ_(A)是影响JTT样品质量的主要潜在标志物;EW-TOPSIS法可用于不同厂家JTT质量优劣的评价。结论 建立的HPLC多指标成分定量测定方法操作便捷、结果准确,结合HCA、PCA、OPLS-DA及EW-TOPSIS法可用于JTT质量的综合评价。

“宣参1号”及其脱毒组培株的质量评价研究

目的评价"宣参1号"及"宣参1号"脱毒株的质量。方法用高效液相色谱法和用分光光度法分别测定"宣参1号"及"宣参1号"脱毒株太子参样品中太子参环肽B及多糖、皂苷的含量;并与不同产地太子参样品进行比较。结果 "宣参1号"及"宣参1号"脱毒株环肽B含量为0.021%、0.030%;皂苷含量分别为0.735%、1.231%;多糖含量分别为8.31%、9.30%。不同产地太子参样品中太子参环肽B及多糖、皂苷的含量存在差异。结论通过分析"宣参1号"及其脱毒株的多糖类、皂苷类、环肽类活性成分并与其他产地太子参样品比较;"宣参1号"脱毒株经过脱毒后改良了品种,其品质特性比"宣参1号"优良。实验结果为宣州太子参药材质量的综合评价和道地药材GAP实施提供依据。