不同分子特性玉米蛋白高F值活性肽的制备及其模拟消化吸收

以玉米黄粉为原料,通过碱性蛋白酶和风味蛋白酶复合酶解制备玉米蛋白高F值活性肽(High Fischer ratio peptide,HFRP),同时根据分子量、电荷性和疏水性差异将HFRP进行分离纯化,并对其吸收特性和耐胃肠消化特性进行探究。结果表明:通过复合酶解法对玉米黄粉进行水解,得到HFRP(F值=26.29)。将HFRP分别按照分子量、电荷性和疏水性进行分离、收集,得到12种组分。通过构建Caco-2细胞体外吸收模型,研究不同分子特性组分的吸收状况,采用质谱扫描鉴定出质荷比(m/z)分别为203.1409、229.2980、226.9517、284.2966的高吸收短肽LA、IP、PL、HQ;通过研究不同分子特性组分的胃肠消化状况,采用质谱扫描鉴定出质荷比(m/z)分别为226.9517、284.2966的耐消化短肽PL和HQ。短肽PL和HQ分子量小,疏水性高,在溶液中带有正电荷,具有优先吸收和耐胃肠消化的特点。本研究为玉米蛋白高F值活性肽的开发提供了理论依据。

高F值活性肽的生物活性、制备技术及吸收评价技术的研究进展

高F值活性肽(HFRP)是指一类由2~9个氨基酸残基所组成的小肽，一般F值大于20。HFRP是一种重要活性肽，具有抗疲劳，补充人体必需氨基酸，促进酒精代谢，保肝护肝，促进氮储留和蛋白质合成，抑制蛋白质分解，改善手术后和卧床病人的蛋白营养状况等多种生理功能，因此具有良好开发应用前景。本文综述了高F值活性肽的生理功能及用途、原料及制备技术、耐消化性及肠吸收评价技术的研究进展，为新型活性肽保健食品的研究开发提供理论依据和技术支持。

活性炭吸附分离芳香族氨基酸的研究

采用动态吸附法,对18种活性炭进行了筛选,并确定吸附条件为pH3,吸附温度25℃,炭-液比1∶12,吸附时间120min。根据活性炭吸附前后的蛋清寡肽混合物溶液的全波长紫外扫面结果,发现活性炭对芳香族氨基酸吸附作用较强。经氨基酸自动分析仪测得蛋清高F值寡肽溶液F值为22,游离氨基酸含量7.8%,凝胶过滤色谱测定其分子质量分布为连续的,绝大部分分布在300～800u。

活性炭色谱法分离芳香族氨基酸制备高F值蛋清低聚肽混合物的研究

研究了18种活性炭的吸附能力,选出对芳香族氨基酸具有较强吸附能力的活性炭品种,研究了其吸附条件和洗脱条件。测定了高F值蛋清低聚肽的氨基酸组成,计算出其F值为20,凝胶过滤层析法测其分子量分布在300～600之间。

酶解魔芋飞粉制备高F值寡肽最佳工艺条件的研究

目的:为了得到高F值寡肽,需要对蛋白质进行水解。方法:采用酶法水解魔芋飞粉制备高F值寡肽。通过对蛋白质水解度的测定,确定了碱性蛋白酶和链霉蛋白酶的最佳酶解条件:碱性蛋白酶加酶量0.1%,底物浓度3.75%,pH9.0,水解温度45℃,时间5h;链霉蛋白酶加酶量0.03%,pH8.0,水解温度50℃,时间7h。酶解液再经过凝胶层析分离纯化后可用于制备高F值寡肽。

魔芋飞粉高F值寡肽的研究

简述了高 F值寡肽的生理功能及研究动向。介绍了根据魔芋飞粉含高蛋白及氨基酸组成为高支低芳的特点,对其进行高F值寡肽的研究开发进展。

魔芋飞粉高F值寡肽的开发利用

高F值寡肽是由3-9个氨基酸残基组成的,其中支链氨基酸含量高于芳香族氨基酸含量的低聚肽。该文阐述了高F值寡肽的生理功能及其研究动向,并根据魔芋飞粉氨基酸组成中支链氨基酸含量高于芳香族氨基酸含量的特性,对其进行了高F值寡肽的研究开发。

肝性脑病防治肽──高F值低聚肽的研究

支链氨基酸与芳香族氨基酸摩尔数之比称为Ｆ值（Ｆｉｓｃｈｅｒ ｒａｔｉｏ）．本文叙述了已报道的高Ｆ值制品经注射或口服均可改善肝性脑病病人血液氨基酸的功效，并对其药理及临床实效进行了简介． 本研究以玉米黄粉为原料，经过二次选择性酶解．制成低聚肽混合物，并以活性炭选择性地分除芳香族氨基酸或肽，从而制得Ｆ值＞２０的高Ｆ值功能低聚肽混合物，其得率（产品含氟量：黄粉含氮量）为１５％左右，无苦味． 本研究以大鼠进行的动物试验证实了所得产品具有防治肝性脑病的功效，其效果等于（或微优于）市售相应的晶体氨基酸的配制品．预计本研究所得产品的成本将远低于市售者。

林蛙卵提取高F值低聚肽混合物的酶解方法

以林蛙卵渣作为原料,通过酶解的方法来制备高F值低聚肽,探讨短肽复合酶对林蛙卵渣中的蛋白质水解进程曲线。结果表明其最适条件为,底物浓度为3%(g/100 mL)、温度为50℃、pH8.0、酶添加浓度为2%(质量分数)、时间240 min。然后水解液经冷冻干燥得到F值20.18的低聚肽。

玉米高F值寡肽的制备研究

以玉米蛋白粉为原料采用酶法水解制备玉米高F值寡肽。研究表明,木瓜蛋白酶的最佳水解条件:温度为55℃,时间3.5h,酶添加量为4.0g/100g,pH7.0,此条件下消耗的NaOH溶液的体积为2.72mL。通过高效液相色谱和氨基酸成份分析,所得寡肽的分子质量主要分布区域为200Da^1000Da,所制取的玉米肽F值>20。

茶蛋白制备高F值低聚肽的定向酶切工艺研究

研究了以茶蛋白为原料制备高F值低聚肽过程中的酶解工艺,采用两步定向酶切的方式,探讨合适的蛋白酶种类,并通过单因素试验考察相关工艺条件对酶切效果的影响。结果表明:碱性蛋白酶和复合风味蛋白酶联用对茶蛋白的水解效果较好;一级定向酶切的最适工艺条件为:底物浓度5%、加酶量(E/S)4%、反应液pH 9.0、反应温度50℃、反应时间3h,此条件下茶蛋白的水解度达到36.02%;二级定向酶切的最适工艺条件为:加酶量(w/v)0.2%、反应液pH值6.5、反应温度55℃、反应时间2h,此条件下水解液的OD220/OD260值达到2.53。该试验为后续水解液分离纯化制备高F值低聚肽产品奠定了基础。

高F值低聚肽研究进展

高F值低聚肽是指一类由3～7个氨基酸残基组成的,其中支链氨基酸含量高于芳香族氨基酸含量的低聚肽。该文介绍高F值低聚肽基本情况,着重介绍高F值低聚肽生理功能及生产制备研究进展。

高F值南极磷虾小分子肽的制备优化及其对HepG2细胞影响研究

该实验以脱脂南极磷虾粉为原料,首先通过单因素(料液比、加酶量、温度、时间)和正交试验优化双酶酶解工艺条件,并采用超滤、活性炭脱芳手段制备南极磷虾高F值小分子肽(Antarctic krill peptides with high-Fischer ratio,HF-AKP),然后采用CCK-8法观察HF-AKP对人肝癌细胞株HepG2生长情况的影响,最后,通过流式细胞计数和ELISA方法分别检测HepG2细胞周期分布和细胞凋亡相关蛋白表达情况。结果显示,碱性蛋白酶的最佳酶解条件为料液比1∶17.5(g∶mL),加酶量5.0%(质量分数),温度55℃,酶解6 h;复合风味蛋白酶的最佳酶解条件为加酶量4.0%,酶解3 h。经双酶酶解的脱脂南极磷虾酶解液的水解度为(17.4±0.2)%,得到F值为2.4±0.2的小分子肽(Antarctic krill peptides,AKP,<5 kDa),再经活性炭脱芳处理得到F值为87.2±0.7的HF-AKP。HF-AKP对体外培养的人肝癌细胞株HepG2的细胞生长具有抑制作用,且呈剂量、时间正向依赖性;此外,HF-AKP可使HepG2细胞生长阻滞于G0/G1期;其凋亡机制可能与Bax/Bcl-2蛋白表达比值增加,以及人核因子κB(nuclear factorκB,NF-κB)蛋白表达减少有关,推测HF-AKP可能有一定抗肿瘤功效。

羊乳高F值肽酶解工艺优化

目的 探究通过生物酶解技术有效得到羊乳高F值肽的关键工艺。方法 以新鲜山羊乳为原料,采用两种酶分步水解法制备高F值肽,以蛋白质水解度和F值为指标,通过单因素试验和响应面分析法分别确定两步酶解的最佳条件,酶解液经活性炭静态吸附去除游离芳香族氨基酸,对脱去芳香族氨基酸后的酶解液进行氨基酸组成分析并测定F值。结果 水解羊乳蛋白最佳内肽酶为碱性蛋白酶,最优工艺为:加酶量4000U/g、底物浓度6%、酶解pH 9.0、温度45℃、时间3 h;最佳外肽酶为风味蛋白酶,最优工艺为:加酶量6200 U/g、酶解pH 6.5、温度49℃、时间2 h。羊乳经两步酶解及活性炭吸附后, F值可达21.82,符合高F值肽的产品要求。结论 羊乳高F值肽的酶解工艺研究可为功能性营养食品的开发及陕西羊乳的高值化利用提供技术支撑。

带鱼高F值寡肽的制备工艺及活性

以带鱼为原料,通过双酶分步水解制备蛋白酶解液,利用活性炭吸附脱除芳香族氨基酸,紫外和氨基酸组成分析测定高F值寡肽(HFP)的F值,并对昆明小鼠体内的活性进行了系统评价。酶解实验结果显示,带鱼蛋白采用胃蛋白酶和风味蛋白酶进行双酶分步水解,胃蛋白酶的最优酶解工艺参数为酶用量3%,料液比1∶5(g/m L),温度35°C,p H 2.0,酶解时间3 h;风味蛋白酶的最优酶解工艺参数为酶用量3%,p H 7.0,温度50°C,酶解时间3 h。活性炭型号筛选和脱芳工艺研究表明,4号粉末活性炭(200目)优于其他4种活性炭,在料液比1∶20(g/m L)、p H 6.0、常温下处理4 h,蛋液的脱芳率最高,F值(OD220/OD280)由脱芳前的5.75增加到脱芳后的30.72。制备的带鱼高F值寡肽经氨基酸组成分析验证,F值(支链氨基酸/芳香族氨基酸)为28.06。活性实验结果显示,与对照组相比,高F值寡肽剂量组昆明小鼠的醉酒时间明显延长,醒酒时间显著缩短,力竭游泳时间明显延长,游泳后的剂量组肝糖原和肌糖原含量增加,血清尿素氮和乳酸含量下降,而乳酸脱氢酶活性则明显提高。另外,剂量组小鼠体内的抗氧化酶SOD、GSH-Px和CAT的活性均显著提高,而丙二醛含量则显著减少。本实验为带鱼高F值寡肽的制备提供技术支持,所制备的高F值寡肽对小鼠具有较好的抗醉酒、醒酒、抗疲劳作用和抗氧化活性。

高F值寡肽液中芳香族氨基酸的脱除工艺优化

为了脱除酶解鱿鱼碎肉制备的寡肽液中芳香族氨基酸以提高寡肽的F值,研究了活性炭串联静态吸附法的脱除效果。在对活性炭型号进行筛选的基础上,探讨了温度、pH、固液比、吸附时间对芳香族氨基酸吸附效果的影响,通过正交试验优化了吸附工艺。结果表明,325目粉末活性炭吸附效果最好,最佳吸附条件为温度25℃、pH为2、固液比1:25,第一次吸附时间180 min,第二次吸附时间30 min,吸附后寡肽液F值达到25.209。

高F值寡肽对小鼠肠道菌群影响探究

为探究高F值寡肽对改善肠道吸收状况的影响。选用昆明种小鼠为实验对象,将其分为高F值寡肽酶解液组、超滤组和对照组,分别每天灌胃,10 d后收集小鼠肠道内容物,通过试剂盒提取DNA并利用16S rRNA技术获得各组小鼠肠道的优势菌群并采用Anosim、OTU Venn、OTU PCA、PCoA和LDA EffectSize (LEfSe)等进行分析。结果表明,酶解液组优势菌群为蛭弧菌科与毛螺菌科,超滤组为肠球菌科与嗜冷杆菌属,而对照组为拟杆菌门的黄杆菌目和拟杆菌科、β-变形菌纲的黄杆菌科与产碱杆菌科。高F值寡肽酶解液可以改变肠道菌群的整体结构,并能增加肠道内的有益菌种,从而维持肠道菌群的结构和稳定。

高F值寡肽研究进展

高F值寡肽是一个由2-9个氨基酸残基所组成的混合小肽(或称寡肽)体系,在该混合物中,支链氨基酸(BCAA:Val,Ile,Leu)与芳香族氨基酸(AAA:Trp,Tyr,Phe)含量的摩尔数比值称为F值,因其具有独特的氨基酸组成和生理功能而受到食品和医药界的高度关注。该文综述了高F值寡肽的生理功能及最新的制备技术,着重介绍了利用猪血制备高F值寡肽的前景。

水解金枪鱼碎肉制备高F值寡肽

以金枪鱼碎肉为原料,采用双酶分步水解法制备高F值寡肽。通过Box-Behnken设计,确定最佳酶解条件。酶解液经活性炭静态吸附去除芳香族氨基酸,用Sephadex G-25葡聚糖凝胶层析测定高F值寡肽的分子质量分布。试验结果表明：胃蛋白酶为第1步水解用酶,酶解的最优工艺条件为酶用量650 U/g,料水比1∶7（g/m L）,温度35.9℃;风味酶为第2步水解用酶,酶解的最优工艺条件为酶用量50 700 U/g,p H 6.51,温度51℃。酶解液吸附脱芳的最优条件为p H 3.0,活性炭用量1∶20（g/m L）,温度35℃,时间3 h。脱芳后的酶解液经层析得到2个高F值寡肽组分,分子质量分布在600~1 300 u,F值分别为37.52,32.08。

固定化酶水解鱿鱼碎肉制备高F值寡肽的工艺优化

为了研究鱿鱼碎肉通过固定化双酶水解法制备高F值寡肽的工艺,以蛋白质水解度为指标,通过单因素和正交试验确定固定化胃蛋白酶和固定化风味酶的最佳酶解条件。第1步采用固定化胃蛋白酶,其最佳酶解条件是:料水比1∶5、加酶量26.83 U/g鱿鱼碎肉、水解时间5 h、水解温度55℃;第2步采用固定化风味酶,其最佳酶解条件是:加酶量1 692 U/g鱿鱼碎肉、pH 7.0、水解温度55℃、水解时间3 h;两步酶解后的总水解度为(32.09±0.58)%,OD_(280)为0.238±0.001。酶解液经多级活性炭串联吸附脱除芳香族氨基酸后,支链氨基酸和芳香族氨基酸的比值(F值)大于20。鱿鱼碎肉经固定化胃蛋白酶和固定化风味蛋白酶分步水解后,活性炭串联吸附脱芳后可制备高F值寡肽。