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High Performance Hydrophobic Interaction Chromatography-A New Approach to Separate Intermediates of Protein Folding──Ⅰ.Separation of Intermediates of Urea-unfolded α-Amylase 被引量:1
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作者 Quan BAI Yin Mao WEI +1 位作者 Ming Hui GENG Xin Du GENG(Institute of Modern Separation Science Northwest University Xi’an, 710069) 《Chinese Chemical Letters》 SCIE CAS CSCD 1997年第1期67-70,共4页
Based on the different hydrophobicities of the intermediates of proteins the various conformational intermediates of the refolding of a-amylase originally denatured with 8.0 mol/L urea solution were separated with hi... Based on the different hydrophobicities of the intermediates of proteins the various conformational intermediates of the refolding of a-amylase originally denatured with 8.0 mol/L urea solution were separated with high performance hydrophobic interaction chromatography(HPHIC). Compared to the separation of the same intermediates with weak anion exchange chromatography and size-exclusion chromatography the result obtained with HPHIC is the best It would be expected that HPHIC may be a strongly potential tool to separate intermediates of some proteins which cannot be, or cannot completely be refolded by HPHIC. 展开更多
关键词 Separation of Intermediates of Urea-unfolded OC high performance hydrophobic interaction chromatography-A New Approach to Separate Intermediates of Protein Folding Amylase
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Comparison of the Contributions of Tetrahydrofurfuryl Alcohol and PEG to a-Chymotrypsin Renaturation with High Performance Hydrophobic Interaction Chromatography
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作者 Ye Hua SHEN Hai Bo WANG +1 位作者 Quan BAI Xin Du GENG 《Chinese Chemical Letters》 SCIE CAS CSCD 2003年第3期294-297,共4页
The contributions of tetrahydrofurfuryl alcohol (THFA) and polyethylene glycol (PEG) to the renatured efficiency of a-chymotrypsin were investigated and compared with each other. The maximum increments of bioactivity... The contributions of tetrahydrofurfuryl alcohol (THFA) and polyethylene glycol (PEG) to the renatured efficiency of a-chymotrypsin were investigated and compared with each other. The maximum increments of bioactivity recovery of a-Chy were found to be 25.1% for THFA, 10.4% for PEG, respectively. The experimental results indicated that the denaturant solution containing THFA contributed more to the renaturation of a-Chy in high performance hydrophobic interaction chromatography (HPHIC) than that containing PEG, when the concentration of THFA was 3.2%, the bioactivity recovery of a-Chy is the highest. 展开更多
关键词 high-perforamnce hydrophobic interaction chromatography tetrahydrofurfuryl alcohol (THFA) polyethylene glycol (PEG) protein renaturation a-chymotrypsin.
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Simultaneous Determination of Amlodipine with H<sub>1</sub>-Receptor Antagonists by Reversed Phase High Performance Liquid Chromatography and Application to Interaction Studies
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作者 Muhammad Saeed Arayne Najma Sultana +1 位作者 Saima Sher Bahadur Muhammad Nawaz 《American Journal of Analytical Chemistry》 2012年第9期632-637,共6页
A rapid, fast and precise method has been developed and validated for the simultaneous determination of amlodipine with H1-receptor antagonists (cetirizine, fexofenadine, and buclizine) from dosage forms. The chromato... A rapid, fast and precise method has been developed and validated for the simultaneous determination of amlodipine with H1-receptor antagonists (cetirizine, fexofenadine, and buclizine) from dosage forms. The chromatography was performed on a Purospher? Star, C18 (5 mm, 250 × 4.6 mm) column using acetonitrile: buffer (0.01 mM) (40:60, v/v, pH adjusted to 3.0), as a mobile phase. The mobile phase was pumped at a flow rate of 1.0 mL·min-1 and UV detection was performed at 240 nm. The method was validated for linearity, accuracy, precision and specificity. The method was applied to study the interaction between amlodipine and H1-receptor antagonists. These interactions were carried out in simulated gastric juice (pH 1), simulated full stomach (pH 4), blood pH (pH 7.4) and simulating GI (pH 9). The interacting drugs were heated at 37℃ with intermit-tent shaking and the samples were withdrawn every thirty minutes for three hours and drug contents were analyzed by RP-HPLC techniques. In most cases the in vitro availability of amlodipine was decreased. It was observed that the change in in vitro availability was pH dependent. 展开更多
关键词 AMLODIPINE CETIRIZINE FEXOFENADINE Buclizine interactionS Reversed Phase high performance Liquid chromatography
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Effect of ligand structure of stationary phase of high performance hydrophobic interaction chromatography on renaturation efficiency of GuHCl-denaturedα-chymotrypsin
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作者 SHEN Yehua WANG Haibo +1 位作者 BAI Quan GENG Xindu 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS 2005年第z1期33-36,共4页
The renaturation of the denaturedα-chymotrypsin(α-Chy)with 1.7 mol·L^(-1)guanidine hydrochloride(GuHCI)by three kinds of stationary phase of high performance hydrophobic interaction chromatography(STHIC)with a ... The renaturation of the denaturedα-chymotrypsin(α-Chy)with 1.7 mol·L^(-1)guanidine hydrochloride(GuHCI)by three kinds of stationary phase of high performance hydrophobic interaction chromatography(STHIC)with a comparable hydrophobicity but different ligand structures was investigated.The obtained result indicates that the ligand structures of the three STHIC contribute to the renaturation efficiency ofα-Chy in the order of the end ligands PEG-600<phenyl group<tetrahydrofurfuryl alcohol(THFA). 展开更多
关键词 protein refolding RENATURATION Α-CHYMOTRYPSIN high performance hydrophobic interaction chromatography stationary phase
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PEAK IDENTIFICATION FROM INTERACTION INDEX IN REVERSED-PHASE HIGH-PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY
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作者 陈农 张玉奎 卢佩章 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS 1992年第12期1425-1433,共9页
The interaction index c which was derived from the fundamental retention equationlogk’ =a + cC_B in reversed--phase high--performancc liquid chromatography (RP-HPLC) quan-titatively describes the difference in the in... The interaction index c which was derived from the fundamental retention equationlogk’ =a + cC_B in reversed--phase high--performancc liquid chromatography (RP-HPLC) quan-titatively describes the difference in the interaction between solute--strong. solvent andsolute--weak solvent; it has shown to be a constant for a specific solute even when columnsystems with different C18 packings are used. The theoretical basis for peak identificationby using interaction index has been proposed, which was based on the a,c values on stan-dard C18 column by utilizing linear a-a plots on column pairs and the linear relationship be-tween parameters a and c for the structural related compounds. Through the establishmentof parameters a,c data based on the standard C18 column for a certain type of compounds,the retention of thesc compounds on various C18 columns can be predicted. Typical exam-ples have been given to verify the correctness of this method. 展开更多
关键词 peak identification REVERSED-PHASE high-performance liquid chromatography interaction INDEX c hydrophobic INDEX α LINEAR α-α PLOTS on column PAIRS LINEAR α-c relationship structural related compounds
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高效液相色谱-质谱技术在蛋白质组学中的应用 被引量:1
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作者 刘威 翁凌霄 +1 位作者 高明霞 张祥民 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期601-612,共12页
蛋白质组学研究在生物医学领域发挥了重要作用,然而研究面临的主要难点在于其研究对象的复杂性和多样性。随着质谱技术的快速发展,高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)分离分析复杂生物样品已经成为蛋白质组学研究的基础工具。蛋白质组学的研究... 蛋白质组学研究在生物医学领域发挥了重要作用,然而研究面临的主要难点在于其研究对象的复杂性和多样性。随着质谱技术的快速发展,高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)分离分析复杂生物样品已经成为蛋白质组学研究的基础工具。蛋白质组学的研究从肽段分离,延伸到蛋白质和蛋白质复合物的分离,随着分析物的分子质量不断增大,其结构和组成复杂性也持续增加,分子特性也发生改变。面对不同的蛋白质组学研究对象,选择不同的分离模式、分离条件以及固定相参数是进行深度蛋白质组学研究的关键。本文综述了实验室常用的液相色谱分离模式,包括反相色谱(RPLC)、亲水相互作用色谱(HILIC)、疏水相互作用色谱(HIC)、离子交换色谱(IEC)和体积排阻色谱(SEC),以及其不同的组合模式与质谱联用在自下而上(bottom-up)分析、自上而下(top-down)分析、蛋白-蛋白相互作用分析中应用的研究。具体分析了色谱流动相与被分析对象之间的兼容性问题、色谱流动相与质谱兼容性问题,以及多维色谱中不同色谱模式之间流动相的兼容性问题。重点关注存在不兼容问题时研究者所提出的解决方案。此外,本文还评述了HPLC-MS结合样本前处理的方法在外泌体和单细胞蛋白质组学中的应用研究。总之,文章聚焦于近年来HPLC-MS技术在蛋白质组学中的研究进展,旨在为未来蛋白质组学领域的研究提供参考。 展开更多
关键词 高效液相色谱 反相液相色谱 亲水相互作用色谱 疏水作用色谱 离子交换色谱 体积排阻色谱 蛋白质组学
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基于TiO_(2)/KCC-1固相萃取的亲水作用超高效液相色谱-串联质谱法测定南极磷虾磷脂
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作者 张欣彤 唐光治 +7 位作者 沈清 雷敏 谭舒萍 林碧玲 周瑞淇 梁秀碧 郭莲仙 李林秋 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第15期168-177,共10页
以自制钛基树枝状纤维形SiO_(2)(TiO_(2)/KCC-1)纳米材料作为固相萃取(solid phase extraction,SPE)填料对南极磷虾中的磷脂进行纯化,采用亲水色谱柱结合超高效液相色谱串联质谱法进行磷脂组学分析。选取南极磷虾中最主要的4类磷脂(磷... 以自制钛基树枝状纤维形SiO_(2)(TiO_(2)/KCC-1)纳米材料作为固相萃取(solid phase extraction,SPE)填料对南极磷虾中的磷脂进行纯化,采用亲水色谱柱结合超高效液相色谱串联质谱法进行磷脂组学分析。选取南极磷虾中最主要的4类磷脂(磷脂酰胆碱(phosphatidylcholines,PC)、磷脂酰乙醇胺(phosphatidyl ethanolamine,PE)、磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine,PS)、磷脂酰肌醇(phosphatidylinositol,PI))作为研究对象。结果显示,在最优条件下共检测到291种磷脂,比已报道的方法多近1倍。在这些磷脂中,含有单不饱和脂肪酸链的磷脂占总磷脂含量的54.73%,含有多不饱和脂肪酸链的磷脂占总磷脂含量的26.17%。南极磷虾中共检出PC 75种、PE 120种、PI 54种、PS 42种。其中PC(40:6)(41.63%)、PE(36:0)(39.77%)、PI(38:3)(80.05%)、PS(36:1)(81.62%)在4类磷脂中的含量最高。多元统计分析结果显示,SPE处理前后磷脂种类有明显差异,Ti O_(2)/KCC-1材料对磷脂的富集效果显著,特别是对PC(18:0/18:0)、PE(16:0/18:1)、PI(16:0/18:2)等富集作用明显。PC、PE和PS的检出限均为0.05μg/g,PI的检出限为0.01μg/g,4种磷脂的相对标准偏差在0.89%~5.05%之间,回收率在87%~112%之间。该方法专一性强、提取效率高、灵敏度和精密度高、准确度好,在生物样本中磷脂的提取、纯化及其检测方面具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 钛基树枝状纤维形SiO_(2) 固相萃取 亲水作用超高效液相色谱-串联质谱法 南极磷虾 磷脂
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高效液相色谱-串联质谱法检测动物源性食品中9种抗病毒药物残留 被引量:2
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作者 宫艳超 赵靖 +1 位作者 崔迎 吴国旭 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2023年第1期332-337,共6页
本研究建立了一种高效液相色谱-串联质谱测定肉、蛋、奶等动物源性食品中奈韦拉平、泛昔洛韦、阿比多、阿昔洛韦、咪喹莫德、美金刚、金刚烷胺、奥司他韦和吗啉胍9种抗病毒药物残留的方法。样品前处理采用1%乙酸-乙腈提取,经PRiME HLB... 本研究建立了一种高效液相色谱-串联质谱测定肉、蛋、奶等动物源性食品中奈韦拉平、泛昔洛韦、阿比多、阿昔洛韦、咪喹莫德、美金刚、金刚烷胺、奥司他韦和吗啉胍9种抗病毒药物残留的方法。样品前处理采用1%乙酸-乙腈提取,经PRiME HLB小柱净化后检测。采用乙腈-10 mmol/L乙酸铵溶液(含0.1%甲酸)流动相体系,在梯度洗脱的模式下,经Sielc Obelisc R柱分离,电喷雾离子源模式电离、多反应监测(MRM)模式进行检测,可以实现9种目标物的分离。结果表明9种抗病毒药物组分在一定浓度范围内线性关系良好,决定系数R 2为0.9991~0.9998,检出限范围为0.1~0.5μg/kg,定量限范围为0.3~1.5μg/kg,加标回收率达到82.3%~95.7%,相对标准偏差为3.2%~5.9%(n=5)。利用本方法对10份样品进行检测,并与标准方法进行对比。本方法准确度和灵敏度均较高,可以满足动物源性食品中9种抗病毒药物残留的检测需求。 展开更多
关键词 固相萃取 亲水色谱 高效液相色谱-串联质谱 动物源性食品 抗病毒药物
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基于高密度低共熔溶剂的分散液液微萃取 被引量:1
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作者 于洋 陈小雅 +2 位作者 丁夕格 葛丹丹 王颖臻 《化学试剂》 CAS 北大核心 2023年第11期111-116,共6页
以六氟异丙醇为氢键供体,分别以辛胺、壬胺和癸胺为氢键受体合成出一类新型高密度疏水性低共熔溶剂(DES)并作为萃取溶剂,用于涡旋辅助-分散液液微萃取-高效液相色谱法检测专利蓝V和固绿FCF。对影响萃取效率的因素进行优化,结果表明,n(辛... 以六氟异丙醇为氢键供体,分别以辛胺、壬胺和癸胺为氢键受体合成出一类新型高密度疏水性低共熔溶剂(DES)并作为萃取溶剂,用于涡旋辅助-分散液液微萃取-高效液相色谱法检测专利蓝V和固绿FCF。对影响萃取效率的因素进行优化,结果表明,n(辛胺)∶n(六氟异丙醇)=1∶2制备出的DES为萃取溶剂,萃取剂使用量为50μL,盐浓度为1%,pH 10,旋涡萃取时间是2 min。在最优化条件下,专利蓝V和固绿FCF在浓度6~1000 ng/mL之间有良好的线性关系;方法检出限为2.0~2.6 ng/mL,定量限为6.0~8.0 ng/mL,相对标准偏差为1.0%~10.0%。该方法简便、快速并且绿色环保,可用于水样和饮料样中的专利蓝V和固绿FCF分析。 展开更多
关键词 分散液液微萃取 高密度疏水性低共熔溶剂 高效液相色谱 色素 六氟异丙醇
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高效液相色谱法测定咪唑立宾片的含量及有关物质 被引量:1
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作者 盖成 韩彬 +2 位作者 王春霞 徐艳梅 高燕霞 《化学分析计量》 CAS 2023年第4期59-62,82,共5页
建立高效液相色谱法测定咪唑立宾片的含量及有关物质。采用Venusil HILIC色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以0.03%磷酸溶液-乙腈(体积比为10∶90)为流动相,流量为1.0 mL/min,有关物质检测波长为220 nm,含量测定波长为279 nm,柱温为25... 建立高效液相色谱法测定咪唑立宾片的含量及有关物质。采用Venusil HILIC色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以0.03%磷酸溶液-乙腈(体积比为10∶90)为流动相,流量为1.0 mL/min,有关物质检测波长为220 nm,含量测定波长为279 nm,柱温为25℃。结果表明,咪唑立宾质量浓度和色谱峰面积在1.5~500μg/mL范围内线性良好,相关系数为0.999 9,平均回收率为99.9%,检出限为0.6μg/mL,定量限为1.5μg/mL。咪唑立宾与辅料和破坏实验产生的杂质峰均能达到良好的分离。所建立的方法专属性强、快速、灵敏,适用于测定咪唑立宾片的含量及有关物质。 展开更多
关键词 咪唑立宾片 含量测定 有关物质 高效液相色谱法 亲水作用色谱法
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甲哌鎓原药及其制剂的高效液相亲水色谱分析
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作者 王东连 张杰 +1 位作者 严艳伦 姜治国 《农药科学与管理》 CAS 2023年第6期16-21,共6页
采用默克ZIC-HILIC亲水色谱柱进行分离,DAD或VWD检测器进行检测,利用外标法定量。流动相为80%的乙腈+20%的25 mM乙酸铵,柱温30℃,检测波长210 nm。制剂回收率98.87%~101.14%,满足《NY/T 2887-2016农药产品质量分析方法确认指南》相关要... 采用默克ZIC-HILIC亲水色谱柱进行分离,DAD或VWD检测器进行检测,利用外标法定量。流动相为80%的乙腈+20%的25 mM乙酸铵,柱温30℃,检测波长210 nm。制剂回收率98.87%~101.14%,满足《NY/T 2887-2016农药产品质量分析方法确认指南》相关要求。方法操作简便,定量准确。 展开更多
关键词 亲水色谱 甲哌鎓 高效液相色谱 外标法
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Cocktail探针药物同时评价连翘对肝细胞色素P450的影响 被引量:31
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作者 闫淑莲 扈金萍 +1 位作者 徐艳霞 张锦楠 《中国药学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第10期761-763,共3页
目的 用Cocktail探针药物法 ,研究连翘对大鼠肝CYP4 5 0的影响。方法 将SD♂大鼠随机分组 ,给予连翘的水提物 ,以生理盐水组为空白对照 ,通过HPLC检测Cocktail探针药物的代谢率来评价各组CYP4 5 0。结果 给予连翘组的大鼠CYP1A2的水... 目的 用Cocktail探针药物法 ,研究连翘对大鼠肝CYP4 5 0的影响。方法 将SD♂大鼠随机分组 ,给予连翘的水提物 ,以生理盐水组为空白对照 ,通过HPLC检测Cocktail探针药物的代谢率来评价各组CYP4 5 0。结果 给予连翘组的大鼠CYP1A2的水平显著低于对照组 ,CYP3A4的水平显著高于对照组 ,CYP2E1的水平没有显著变化。结论 连翘对大鼠CYP1A2有抑制作用 ,对大鼠CYP3A4有诱导作用 ,但对大鼠CYP2E1的影响不显著。 展开更多
关键词 COCKTAIL 探针药物 连翘 细胞色素P450 急性肝损伤
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胍变及脲变α-淀粉酶的研究 Ⅰ.用高效疏水色谱法研究变性机理和复性效率 被引量:7
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作者 白泉 卫引茂 耿信笃 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期284-287,共4页
用疏水性强弱不同的两种色谱柱对7.0mol/L盐酸胍及8.0mol/L脲变性的α-淀粉酶变体和在疏水色谱介质表面上折叠的中间体进行了分离和复性。通过研究和比较发现,两者的变性机理和形成折叠中间体的个数以及复性效率均不... 用疏水性强弱不同的两种色谱柱对7.0mol/L盐酸胍及8.0mol/L脲变性的α-淀粉酶变体和在疏水色谱介质表面上折叠的中间体进行了分离和复性。通过研究和比较发现,两者的变性机理和形成折叠中间体的个数以及复性效率均不相同。在用疏水性较弱的疏水色谱柱对脲变α-淀粉酶的折叠中间体进行分离时,得到了疏水性接近连续的、数目很多的中间体。用疏水性较强的疏水色谱柱对胍变α-淀粉酶进行复性的效果较好。还研究了柱温变化对其折叠、分离效果和复性效率的影响。 展开更多
关键词 高效疏水色谱 蛋白折叠 Α-淀粉酶 胍变 脲变
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水溶性药物骨架片释放达零级的几种方法 被引量:21
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作者 林晓 陈济民 《中国药学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第3期192-195,共4页
目的 研究水溶性药物骨架片释放达零级的方法。方法 以盐酸氢吗啡酮 (hydromorphonehydrochloride)为模型药物 ,用熔融制粒法制备骨架片 ,用HPLC测定骨架片的释放度。结果 通过压制多层片和混合使用骨架材料 ,可解决盐酸氢吗啡酮骨... 目的 研究水溶性药物骨架片释放达零级的方法。方法 以盐酸氢吗啡酮 (hydromorphonehydrochloride)为模型药物 ,用熔融制粒法制备骨架片 ,用HPLC测定骨架片的释放度。结果 通过压制多层片和混合使用骨架材料 ,可解决盐酸氢吗啡酮骨架片前期释放偏快的问题 ,使整个释放近零级。结论 通过处方和工艺调整可以获得具有零级释放特征的水溶性药物骨架片。 展开更多
关键词 羟丙基甲基纤维素 羟甲基纤维素钠 十八醇 混合骨架片 盐酸氢吗啡酮 水溶性药物 释放速度 零有
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人唾液蛋白的高效疏水色谱分离纯化 被引量:3
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作者 景娟 侯铁舟 +3 位作者 赵东方 王强 阮梅生 侯建霞 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期82-84,共3页
目的 探讨高效疏水色谱分离、纯化人全唾液蛋白、腮腺液蛋白及颌 /舌下腺液蛋白的最佳分离条件和临床意义。方法 将收集的唾液样品经低温离心 ,过滤 ,冻干 ,低温保存备用。以不同浓度的 (NH4 ) 2 SO4 、KH2 PO4 溶液分别为A、B流动相 ... 目的 探讨高效疏水色谱分离、纯化人全唾液蛋白、腮腺液蛋白及颌 /舌下腺液蛋白的最佳分离条件和临床意义。方法 将收集的唾液样品经低温离心 ,过滤 ,冻干 ,低温保存备用。以不同浓度的 (NH4 ) 2 SO4 、KH2 PO4 溶液分别为A、B流动相 ,梯度分离 ,收集各个组分峰 ,通过生化方法对蛋白进行定性。结果 全唾液蛋白被分离为 12个峰组分 ,腮腺液被分离为 6个峰组分 ,颌 /舌下腺液被分为 8个峰组分。经统计学处理 ,平均出峰时间标准差小 ,个体间重复性好。目前能初步定性的唾液蛋白为富含脯氨酸蛋白、半胱氨酸蛋白、富酪蛋白和富组蛋白及α 淀粉酶。结论 疏水色谱可用于人全唾液蛋白、腮腺液蛋白及颌 展开更多
关键词 高效疏水色谱(hphic) 全唾液 腮腺液 颌/舌下腺液 分离 纯化 唾液蛋白
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蛋白质疏水性测定方法的相关性及适用性 被引量:21
16
作者 曾茂茂 王霄 陈洁 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第15期117-120,共4页
针对蛋白质的疏水性,以食品中常用的蛋白质如大豆分离蛋白(SPI)及其水解物和乳清蛋白为对象,研究不同疏水性测定方法的相关性及适用性。结果表明:ANS荧光探针法对各种蛋白质及其水解物(DH<23)疏水性的测定均比较合适;CPA荧光探针法... 针对蛋白质的疏水性,以食品中常用的蛋白质如大豆分离蛋白(SPI)及其水解物和乳清蛋白为对象,研究不同疏水性测定方法的相关性及适用性。结果表明:ANS荧光探针法对各种蛋白质及其水解物(DH<23)疏水性的测定均比较合适;CPA荧光探针法不适合于测定疏水性较弱的蛋白质;反相高效液相色谱法较适合测定疏水性适中及较强的蛋白质;表面张力法中如采用气液界面参数进行表征,则其线性存在一定的缺陷。 展开更多
关键词 蛋白质 疏水性 荧光探针法 高效液相色谱(HPLC) 表面张力
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新型高效液相色谱酰胺键合固定相的制备与评价 被引量:7
17
作者 马言顺 龙远德 +1 位作者 翦英红 黄天宝 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2004年第2期232-236,共5页
将YWG 80硅胶和 3 氨基丙基三甲氧基硅烷反应后与 2 壬基丁二酰氯反应制得一种新型双齿酰胺键合固定相 (BABSP 2 )。采用元素分析和傅里叶变换红外光谱表征了键合相 ;用芳香族化合物溶质和甲醇 水二元流动相 ,考察了键合相的疏水选择... 将YWG 80硅胶和 3 氨基丙基三甲氧基硅烷反应后与 2 壬基丁二酰氯反应制得一种新型双齿酰胺键合固定相 (BABSP 2 )。采用元素分析和傅里叶变换红外光谱表征了键合相 ;用芳香族化合物溶质和甲醇 水二元流动相 ,考察了键合相的疏水选择性和亲硅醇基活性 ;评估了在酸性条件下 (pH 2 .5 )的水解稳定性。结果表明 :BABSP 2能有效抑制残留硅醇基活性 。 展开更多
关键词 高效液相色谱 双齿酰胺键合固定相 制备 评价 水解稳定性 疏水选择性 亲硅醇基活性
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重组人干扰素-γ的制备与鉴定 被引量:3
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作者 吴丹 高栋 +1 位作者 白泉 耿信笃 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期206-211,共6页
用聚乙二醇200疏水相互作用色谱固定相(PEG200-STHIC)分别在色谱柱和色谱饼上完成了一步复性并同时纯化来源于大肠杆菌(E.coli)表达的重组人干扰素-γ(rhIFN-γ)。为了能使色谱分离方法用于不同来源的rhIFN-γ的纯化,对rhIFN-γ在反相... 用聚乙二醇200疏水相互作用色谱固定相(PEG200-STHIC)分别在色谱柱和色谱饼上完成了一步复性并同时纯化来源于大肠杆菌(E.coli)表达的重组人干扰素-γ(rhIFN-γ)。为了能使色谱分离方法用于不同来源的rhIFN-γ的纯化,对rhIFN-γ在反相色谱、离子交换色谱、固定化镍离子亲和色谱上的保留行为也进行了研究。色谱柱纯化的rhIFN-γ收集液经排阻色谱除盐和冷冻干燥得到rhIFN-γ干粉。用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱对rhIFN-γ干粉进行了测定,rhIFN-γ单体的相对分子质量为17184.0,二聚体的相对分子质量为34204.4。用细胞病变抑制法(CPEI)测定rhIFN-γ干粉的比活性为9.5×108IU/mg。用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测定rhIFN-γ干粉的纯度高于95%。用色谱柱复性并同时纯化rhIFN-γ的质量回收率达到93.7%,纯度高于95%,比活性为4.3×107IU/mg。结果表明,采用PEG200-STHIC色谱柱复性并同时纯化rhIFN-γ是一种十分高效的方法。 展开更多
关键词 重组人干扰素-γ 蛋白折叠液相色谱法 高效疏水色谱 复性 纯化
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棉铃虫中肠微粒体P450的分离纯化 被引量:3
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作者 郑明奇 张文吉 +1 位作者 邱星辉 冷欣夫 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期359-364,共6页
为深入研究棉铃虫Helicoverpaarmigera细胞色素P450的结构与功能,需要分离不同型的P450蛋白。作者建立了适用于棉铃虫中肠微粒体P450的纯化方法,包括聚乙二醇8000(PEG8000)沉淀、高效疏水作用色谱(HPHIC)和高效离子交换色谱(HPIEC)等连... 为深入研究棉铃虫Helicoverpaarmigera细胞色素P450的结构与功能,需要分离不同型的P450蛋白。作者建立了适用于棉铃虫中肠微粒体P450的纯化方法,包括聚乙二醇8000(PEG8000)沉淀、高效疏水作用色谱(HPHIC)和高效离子交换色谱(HPIEC)等连续分离步骤。SDS_PAGE(银染)显示,棉铃虫中肠微粒体经以上步骤分离纯化后,在含P450的馏分中检测出分子量分别为58kD、47kD、56kD和45kD的4条蛋白带。P450的回收率为14.3%,比含量提高了39倍。 展开更多
关键词 棉铃虫 细胞色素P450 聚乙二醇沉淀 高效疏水作用色谱 高效离子交换色谱 纯化
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多索茶碱与莫西沙星在大鼠体内药动学的相互作用 被引量:19
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作者 顾健 李玉珍 《中国药学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第4期285-289,共5页
目的 考察多索茶碱和莫西沙星在大鼠体内的药动学特性及合用时的相互作用。方法 采用高效液相色谱法测定大鼠给药后不同时间的多索茶碱和莫西沙星的血浆浓度。血浆浓度 时间数据用非线性程序WINNONLIN拟合 ,求得药动学参数。结果 ... 目的 考察多索茶碱和莫西沙星在大鼠体内的药动学特性及合用时的相互作用。方法 采用高效液相色谱法测定大鼠给药后不同时间的多索茶碱和莫西沙星的血浆浓度。血浆浓度 时间数据用非线性程序WINNONLIN拟合 ,求得药动学参数。结果 两药合用与单独用药时的药 时曲线基本一致 ,多索茶碱呈一级吸收一级开放式模型 ,莫西沙星呈一级吸收二室开放式模型 ,药动学参数无统计学差异。但多索茶碱与莫西沙星合用时 ,多索茶碱的代谢产物之一茶碱的AUC约是单用多索茶碱时的 2倍。结论 两药合用药动学上无明显的相互作用 ,但莫西沙星有减慢多索茶碱的代谢产物茶碱代谢的趋势 ,两药可以同时服用 。 展开更多
关键词 多索茶碱 莫西沙星 大鼠 体内 药动学 相互作用
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