Research Advances in Detection Techniques of High Performance Liquid Chromatography-Refractive Index Detector

As a highly sensitive and stable detector,refractive index detector is usually used for quantitative detection of substances such as polymer,sugar and organic acid. The research reviewed the application of HPLC-RID in the fields of quantitative determination of medicine and food,in order to lay a foundation for wider use of RID.

Fast determination of tobramycin by reversed-phase ion-pair high performance liquid chromatography with a refractive index detector

A simple and direct method without a deriva- tion step for routine analysis of tobramycin has been developed. This method used reversed-phase ion-pair high performance liquid chromatography （HPLC） with a refractive index （RI） detector and a C18 column which is stable at pH above 1.00. The presence of 4.50mg.mL ] trifluoroacetic acid （TFA） in the mobile phase improved the protonation of tobramycin and the formation of ionpairs, and thus reduced its hydrophility. This unique separation-detection combination showed good linearity with correlation coefficients 0.9996 in the concentration range of 0.25-2.50mg.mL 1. The quantitation limit and detection limit were determined to be 0.23 mg.mL ~ and 0.071 mg. mL ~, respectively. Tobramycin was recovered in 98.00%, 98.84% and 99.64% for tobramycin solutions at concentrations of 2.25 mg.mL^-1, 1.50mg.mL 1 and 0.75 mg.mL ＇, respectively. The relative standard deviations for six spiked samples ranged from 0.20% to 2.40%, indicating a good reproducibility of this method.

基于酰胺基柱的HPLC-RID同时测定异麦芽酮糖中5种糖的含量及其影响因素

研究高效液相色谱-示差折光检测法(HPLC-RID)同时测定异麦芽酮糖产品中果糖、葡萄糖、蔗糖、异麦芽酮糖和海藻酮糖的含量及影响因素。方法采用酰胺基柱,通过精密度试验、t检验确证方法准确性,通过单因素试验和谱图比较确定色谱条件和前处理条件对分离的影响。结果表明,流动相中乙腈的增加能加强糖在酰胺基柱上的保留,三乙胺能显著消除果糖、葡萄糖和海藻酮糖在分离时产生的分裂峰或分叉峰并影响谱图中负峰的位置;样液介质中乙腈、三乙胺分别主要影响溶剂峰和负峰(峰的极性和大小)。在流动相中乙腈、三乙胺体积分数分别为75%、0.05%、柱温45℃、流速1.0 mL/min、进样体积10μL条件下,5种糖在10 min内基本基线分离,且色谱柱pH耐受安全,实际样品测定结果与COA无显著差异(p=0.05),精密度均小于1.3%,均满足相关检测标准的要求。

大蒜中低聚糖的TLC鉴别和HPLC-RID含量测定

目的建立大蒜中低聚糖的薄层色谱(TLC)法和高效液相-示差折光检测器(HPLC-RID)法,用于大蒜中低聚糖的鉴别和含量测定。方法采用TLC法大蒜中果糖、蔗糖、蔗果三糖和蔗果四糖进行鉴别,以冰乙酸-氯仿-水(21/18/4)为展开系统,苯胺-二苯胺溶液为显色剂;采用HPLC-RID法测定大蒜中果糖、蔗糖、蔗果三糖和蔗果四糖的含量,色谱柱为碳水化合物分析柱(4.6×250 mm,4μm);流动相:乙腈-水(75/25),柱温:35℃,流速:1.0 mL/min,进样量:15μL。结果薄层色谱中可以检测到果糖、蔗糖、蔗果三糖和蔗果四糖4种低聚糖。果糖、蔗糖、蔗果三糖和蔗果四糖分别在0.03~0.81、0.5~16.04、0.02~0.65、0.02~0.64 mg/mL范围线性关系良好。4种糖类低、中、高浓度平均回收率(n=3)分别为98.0%、99.7%、100.3%和98.2%;测定新疆5种不同海拔(1733、1680、1250、2800、2300 m)大蒜中果糖、蔗糖、蔗果三糖、蔗果四糖的含量分别为0.34~0.54、6.54~8.74、0.45~0.61、0.04~0.15 mg/g。结论本研究建立的大蒜中低聚糖的定性、定量分析方法准确可靠、重现性好,可用于大蒜中低聚糖的鉴别和含量测定。

HPLC-RID法测定苹果中果糖 山梨醇 葡萄糖和蔗糖

采用高效液相色谱-示差检测器优化并建立苹果中果糖、山梨醇、葡萄糖和蔗糖的测定方法,该方法具有线性好(R2>0.99)、检测限(0.03~0.10 mg/mL)和定量限(0.09~0.30 mg/mL)低、精确性(RSD<2.16%)和回收率(93.59%~99.76%)高的特点。通过对苹果样品的分析,发现阿克苏冰糖心苹果中果糖含量最高(74.43±2.00 mg/g),其次是蔗糖(30.51±1.89 mg/g)、葡萄糖(18.75±1.52 mg/g),山梨醇含量最低(16.53±0.03 mg/g);其中,糖心果肉中山梨醇含量高,而果糖、葡萄糖和蔗糖低,说明阿克苏苹果“冰糖心”的形成与山梨醇的含量密切相关,山梨醇可能是阿克苏“冰糖心”苹果的重要特征指标。

HPLC-RID法测定蒜酶提取物中PEG含量

目的建立高效液相-示差折光检测器(HPLC-RID)法测定蒜酶提取物中聚乙二醇(PEG)含量的方法,并进行方法学考察。方法高效液相色谱法色谱柱为TSK gel G3000PWXL(7.8 mm×300 mm,7μm),流动相为纯水,柱温25℃,流速0.7 mg/mL,检测器为示差检测器,进样量15μL进行PEG含量检测。结果 PEG在浓度为0.05~15 mg/mL时,呈良好线性,相关系数r=1;精密度实验峰面积RSD分别为0.32%(日内精密度)和1.35%(日间精密度);重复性实验峰面积RSD为0.35%;稳定性实验峰面积RSD为1.27%;低、中、高浓度回收率分别为101.077%、100.045%、99.213%,RSD值分别为1.05%、1.08%、1.58%。6批蒜酶提取物中PEG平均含量为456.4mg/g。结论建立的HPLC-RID法各项检测指标均符合要求,可用于测定蒜酶提取物中PEG含量。

HPLC-RID测定盐酸金刚烷胺片中盐酸金刚烷胺的含量

目的建立高效液相色谱-示差折光检测器法(HPLC-RID)测定盐酸金刚烷胺片中盐酸金刚烷胺的含量。方法采用Waters Sun Fire C_(18)色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为甲醇-水(10:90),柱温30℃,进样量20μL,流速1.0 mL/min,检测器为RID,检测池温度30℃。结果盐酸金刚烷胺的线性范围为0.2513~2.5130mg/mL(r=0.9994),平均回收率为100.1%,RSD为0.9%(n=9)。结论该方法简便、快速、准确、重现性好,可用于盐酸金刚烷胺片的含量测定。

HPLC-RID法同时快速定量分析N-月桂酰基谷氨酸钠及副产物皂

N-月桂酰基谷氨酸钠(SLG)是一种生物质来源的表面活性剂,副产物月桂酸钠皂(SLA)会与SLG互相干扰难以同时快速测定。文章建立了反相高效液相色谱偶联示差折光检测器快速定量分析SLG和SLA的方法。结果表明,采用Wonda Cract ODS-2 C_(18)色谱柱,体积比10:2:0.03的甲醇、水和甲酸混合流动相能使SLG和SLA达到基线分离,且线性相关系数均高达0.9999,平均加标回收率分别为99.82%和98.91%,相对标准偏差分别为0.84%和1.22%,定量下限分别为16.2μg·mL^(-1)和13.3μg·mL^(-1),可作为SLG与SLA的同时快速定量检测方法。

高效液相色谱-示差折光检测器法测定复配消毒液中3种双链季铵盐的含量

提出了高效液相色谱-示差折光检测器法测定复配消毒液中二癸基二甲基氯化铵、辛基癸基二甲基氯化铵、二辛基二甲基氯化铵等3种双链季铵盐含量的方法。复配消毒液样品经流动相稀释,以Welchrom C_(18)色谱柱为固定相,以体积比70:30的乙腈-0.01 mol·L^(-1)丁烷磺酸钠溶液的混合溶液(pH 3.5)为流动相进行洗脱,采用示差折光检测器测定3种双链季铵盐的含量。结果表明:3种双链季铵盐的质量浓度在50~1000 mg·L^(-1)内与对应的峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)为3.3~5.1 mg·L^(-1);对实际样品进行3个浓度水平的加标回收试验,回收率为91.0%~105%,测定值的相对标准偏差(n=6)为1.3%~2.2%。采用独立样本t检验法比对本方法与高效液相色谱-蒸发光散射检测器法是否具有显著性差异,结果显示两组检测结果t值为1.85,P值为0.089,表明无显著性差异。

基于多指标成分定量、化学计量学、EW-TOPSIS分析的白术厚朴合剂质量评价研究

目的以10种成分为指标,建立白术厚朴合剂HPLC定量分析方法,联合化学计量学及熵权优劣解距离法(EW-TOPSIS)对其质量进行综合评价。方法以75%甲醇提取液为样品,采用Agilent TC-C18色谱柱,乙腈-0.1%磷酸为流动相梯度洗脱,HPLC法同时测定12批白术厚朴合剂中10个化合物(白术内酯Ⅲ、白术内酯Ⅰ、肉桂醇、肉桂酸、桂皮醛、和厚朴酚、厚朴酚、6-姜辣素、8-姜酚和10-姜酚)含量,运用化学计量学和EW-TOPSIS法对含量数据进行分析。结果经方法学验证,各指标均符合《中华人民共和国药典》要求:10种成分在各自质量浓度范围内线性关系良好,相关系数>0.999;精密度、稳定性、重复性、加样回收率RSD均<2.0%。化学计量学分析显示,前2个主成分代表10个成分92.24%的信息,12批样品聚为3类,桂皮醛、厚朴酚、和厚朴酚、白术内酯Ⅲ、6-姜辣素和白术内酯Ⅰ对白术厚朴合剂的质量影响较大。EW-TOPSIS法结果显示,12批白术厚朴合剂的最优解欧氏贴近度均值为0.2385~0.6662,各批次间质量差异较大。结论建立的多指标成分定量方法操作便捷、结果准确,可用于白术厚朴合剂的质量控制,化学计量学及EW-TOPSIS分析可实现对白术厚朴合剂质量的综合评价,为白术厚朴合剂质量标准提升提供参考。

示差折光检测器高效液相色谱法测定中间馏分芳烃含量的不确定度分析

采用示差折光检测器高效液相色谱法测定中间馏分芳烃含量,使用不确定度评估方法来建立数学模型,对不确定性来源进行分析,计算各个不确定度分量的结果,然后评估合成标准不确定度和扩展不确定度。评定结果表明,标准溶液配制过程产生的不确定度分量最大,其中以质量称量过程中的不确定度最大,其次是定容和标准物质纯度引入的不确定度;标准曲线拟合引入的不确定度次之。此外,值得关注的还有数值修约和测量重复性引入的不确定度。取置信区间为95%,包含因子k=2,总多环芳烃质量分数测定结果为10.4%±1.1%,总芳烃质量分数测定结果为23.9%±2.7%。

高效液相色谱法测定青橄榄中三氯蔗糖含量的不确定度评定

运用高效液相色谱-示差折光检测器对青橄榄中三氯蔗糖含量进行测定,并从测量重复性、标准物质、样品处理、加标回收率等五个方面对其进行不确定度评估。评估结果显示,加标回收率和标准溶液配制因素对不确定度影响较大。取置信区间95%,包含因子k=2,当测量结果为0.0250g/kg时,其扩展不确定度为0.0017g/kg,则青橄榄中三氯蔗糖含量表示为(0.0250±0.0017)g/kg。

HPGPC-RID法测定右旋糖酐20分子量及其分布的可行性研究

目的 建立高效凝胶渗透色谱-示差折光检测器(HPGPC-RID)测定右旋糖酐20分子量及其分布的方法,并对该方法进行可行性研究。方法 对新建方法进行专属性、准确度、重复性及耐用性验证,并评价新建方法与《中国药典》2020版(二部)收录方法检测结果的等效性。结果 新建方法专属性、准确度、重复性、耐用性良好,且与药典方法等效,可用于右旋糖酐20分子量及其分布的测定。与此同时,新建方法能避免药典方法中硫酸钠(Na_(2)SO_(4))峰对右旋糖酐20峰的干扰。结论 相比于药典方法,新建方法对右旋糖酐20分子量及其分布测定具有更好的适用性。

高效液相色谱法测定饮料中防腐剂和甜味剂

建立了高效液相色谱-示差折光检测器法同时测定碳酸饮料中苯甲酸、山梨酸、糖精钠、甜蜜素的分析方法,考察了流动相配比、缓冲溶液的浓度、柱温、检测器的温度及灵敏度设置对测定的影响,确定了最佳色谱条件:Novopak-C18柱,示差折光检测器(RID),流动相为甲醇-0.010mol/L乙酸铵溶液(3:97,V/V),等度洗脱方式,柱温及RID检测器温度30℃,RID检测器灵敏度设置64。结果显示,线性范围为2.0～200μg/ml,相关系数为0.9995～0.9999,检出限依次为0.2、0.2、0.2、1.3μg/ml,相对标准偏差2.1%～3.5%,平均回收率89.0%～104.5%,实现了7min内对碳酸饮料中苯甲酸、山梨酸、糖精钠、甜蜜素的同时测定。

莱茵—埃农氏法和高效液相色谱—示差折光法检测奶粉中乳糖和蔗糖的比较研究

选用市售同种品牌不同年龄段的奶粉,采用莱茵—埃农氏法和高效液相色谱—示差折光检测法对其乳糖和蔗糖进行测定,分析乳糖和蔗糖的差异,并对两种分析方法的结果进行比较,为奶粉中乳糖和蔗糖的检测方法提供依据。结果表明,莱茵—埃农氏法和高效液相色谱—示差折光检测法相比,高效液相色谱—示差折光检测法测定乳糖和蔗糖含量的准确度更高,蔗糖和乳糖的线性范围均为2-12 mg/mL,相关系数分别为0.999 3、0.999 6,精密度实验结果表明,相对标准偏差分别为2.53%、3.81%,平均加样回收率分别为99.70%、101.06%。高效液相色谱—示差折光检测法结果准确、分析时间短、前处理简单,适用于快速测定奶粉中蔗糖和乳糖含量。

高效液相色谱-示差折光检测技术研究进展

示差折光检测器是一种高度灵敏和稳定的检测器,多用于聚合物、糖及有机酸等物质的定量检测。论文对高效液相色谱-示差折光检测器在检测药物及食品中有效成分的含量方面的应用进行综述,为示差折光检测器的更广泛应用奠定基础。

高效液相色谱法同时测定枸杞中单糖和低聚糖的含量

目的建立同时测定枸杞中鼠李糖、果糖、葡萄糖三种单糖和蔗糖、麦芽糖两种低聚糖含量的高效液相色谱一示差折光检测方法。方法枸杞中的单糖和低聚糖用蒸馏水提取后，经Zorbax Carbohydrate色谱柱分离，采用示差折光检测器检测。结果本方法检测枸杞中的鼠李糖、果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖在10．0～400．0mg／L范围内，质量浓度与色谱峰面积呈良好的线性关系，相关系数r=0．9976～0．9998。方法的精密度RSD分别为2．15％、1．49％、1．09％、3．82％、4．65％，加标回收率为92．27％～101．93％，方法的检出限（信噪比S／N=3）分别为4mg／kg、5mg／kg、4mg／kg、6mg／kg、5mg／kg。结论高效液相色谱一示差折光检测方法简便、快速，适用于枸杞中鼠李糖、果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖含量的测定。

银杏内酯的快速测定方法的研究

目的：介绍一种快速测定银杏内酯的新方法。方法：采用单柱层析和高效液相色谱联用的纯化分离技术。结果和结论：该方法可减少样品的预纯化时间，与目前的常规测定方法相比，其纯化时间缩短到常规方法的１／６，回收率高，相对标准偏差小，而且操作简便，易于掌握，可用于银杏叶及其提取物（ＧＢＥ）中银杏内酯的快速测定和质量监控。

高效液相色谱法快速测定润滑油基础油化学族组成的研究

用高效液相色谱法对润滑油基础油的化学族组成进行了分离分析 .以键合氰基柱和硅胶柱双柱切换的方式 ,正己烷为流动相 ,示差折光检测器检测 .经典柱色谱分析得到的样品分析结果作为高效液相色谱法对饱和烃、芳烃和胶质分析进行定量校正的依据 ,使用该种定量校正方法可得到不同产地和馏程的基础油族组成分析的定量校正因子 .为了简化数据处理过程、提高分析速度 ,引入平均校正因子 ,即同一馏程的样品定量校正因子为多产地样品校正因子的平均值 .用该种定量校正方法对已知样品和未知样品进行分析 ,结果表明该方法可以满足润滑油生产工艺中对烃类族组成快速分析的要求 .

响应因子对高效液相色谱法测定柴油族组成的影响

采用高效液相色谱法测定柴油烃族组成,氰基柱作固定相,正庚烷为流动相,辅以反冲技术将样品分离成饱和烃、单环芳烃、双环芳烃和多环芳烃及胶质等组分,用示差折光检测器进行检测,气质联用仪分析得到的样品分析结果作为高效液相色谱法对饱和烃、芳烃和胶质分析进行定量校正的依据,考察了不同的标样测得的响应因子对定量结果的影响。结果发现,对不同组成的油样选用不同类型的标样测得的响应因子进行定量时,结果差别较大。