高效液相色谱法测定人血清中阿西美辛和吲哚美辛

建立了测定人血清中阿西美辛及其活性代谢物吲哚美辛的高效液相色谱法。分析柱为Ｓｐｈｅｒｉｓｏｒｂ－Ｃ８（５μｍ ），４．６ ｍ ｍ ×２５０ ｍ ｍ ，流动相为Ｖ（醋酸盐缓冲液，ｐＨ ４．６）ｖ Ｖ（乙腈）ｖ Ｖ（甲醇）＝ ５５ｖ４０ｖ５，流速１．０ ｍ Ｌ／ｍ ｉｎ， 检测波长２５４ ｎｍ 。血清中药物质量浓度为１２．５ μｇ／Ｌ～１．６ ｍ ｇ／Ｌ时，阿西美辛、吲哚美辛峰高与内标甲苯磺丁脲峰高比值和质量浓度呈良好的线性关系；阿西美辛日内、日间变异系数分别为３．６％ 和５．６％ ，平均回收率为７８．３％ ；吲哚美辛日内、日间变异系数分别为２．４％ 和５．２％ ，平均回收率为８５．９％ 。

反相高效液相色谱法快速测定3种抗癫痫药物血药浓度

目的 建立快速反相高效液相色谱法测定 3种抗癫痫药血药浓度。方法 选择醋酸乙酯为萃取溶剂 ;采用Nova PakC18柱 (4 μm ,3.9mm× 15 0mm)为分析柱 ;0 .0 1mol/L磷酸盐缓冲液 (pH3.5 ) 甲醇 (5 0∶5 0 )为流动相 ;检测波长 2 10nm ;流速1mL/min。结果 该色谱条件下 3种药物分离良好 ,苯巴比妥、苯妥英钠、卡马西平线性范围为 1～ 10 0 ,1～ 4 0 ,1～ 2 0 μg·mL-1,平均回收率分别为 99.8% ,99.6 % ,10 0 .6 %。日内、日间RSD均小于 6 % ;用于 2 2 9例临床患者监测 ,在服用苯妥英钠的患者中有 5 6 .1%的患者血药浓度低于有效浓度 ,2 0 .1%高于有效浓度 ,并出现中毒症状。结论 本法快速 (5min)、简便、结果准确 。

高效液相色谱化学发光检测人体血清及尿样中的盐酸肾上腺素

研究发现,盐酸肾上腺素在碱性条件下能显著增强铁氰化钾-鲁米诺化学发光强度.基于此建立了新的测定肾上腺素的方法.本方法以C18 反相键合相为色谱柱,用 0.01 mol/L邻苯二甲酸氢钾-甲醇(92∶ 8 , V/V)为流动相,实现了对人体血清及尿样中盐酸肾上腺素的分离与测定.在最适宜条件下,方法的线性范围为 10～5000 μg/L;检出限为 4.0×10-6g/L;相对标准偏差为 3.0%(n=11).

高效液相色谱法分析人血清中硫唑嘌呤和巯嘌呤的浓度

建立了用ＨＰＬＣ同时测定人血清中硫唑嘌呤（ＡＺＰ）和６－巯基嘌呤（６－ＭＰ）浓度的方法。血清样品经乙腈除蛋白后在常压和３７℃下用氮气吹干，残余物用１００μＬ洗脱液溶解，离心后上清液直接进样。以ＳｐｈｅｒｉｓｏｒｂＣ１８固定相，采用梯度洗脱，从Ｖ（乙腈）∶Ｖ（０．０１ｍｏｌ／Ｌ磷酸二氢钾）＝３∶９７经５ｍｉｎ时变为１８∶８２，１５ｍｉｎ后再变为５０∶５０，检测波长开始为３２５ｎｍ，１０ｍｉｎ后为２７８ｎｍ，甲硝唑（ＭＮＺ）为内标。ＡＺＰ和６－ＭＰ平均回收率分别为（１００．６±４．２）％和（１０２．４±４．５）％，最低检出质量浓度均为５μｇ／Ｌ。所建方法简便、灵敏、准确。

高效液相色谱-荧光检测法测定血清中的犬尿氨酸

建立了高效液相色谱-荧光检测（HPLC-FLD）测定血清中犬尿氨酸（kynurenine,Kyn）含量的方法。采用Hy-persil C8色谱柱（300mm×6.0mm,10μm）,流动相为0.25mol/L醋酸锌及50mmol/L醋酸溶液（含3%乙腈）,流速为1.5mL/min,荧光检测激发波长和发射波长分别为365nm和480nm。血清标本经5%（v/v）高氯酸溶液去除蛋白质后取上层清液直接进样,Kyn经流动相等度洗脱分离后,用FLD进行测定。研究结果表明Kyn保留时间约为8.3min,线性范围为0.098-19.6μmol/L,最低检出浓度为0.04μmol/L,回收率为90.8%-96.2%,日内、日间测定的相对标准偏差均小于5%,苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、5-羟色胺和犬尿喹啉酸等物质对犬尿氨酸的测定均无干扰。建立的方法简便、快速、灵敏、特异,适用于临床和科研应用。

万古霉素血药浓度监测的临床应用

目的探讨万古霉素血药浓度监测的临床应用,以指导临床合理用药。方法收集临床上有病原学依据而应用万古霉素病人的血液标本,应用高效液相色谱法(HPLC)测定万古霉素血药浓度,实现个体化给药。结果 18例病人进行万古霉素血药浓度监测,设为治疗组,其中4例病人血药浓度在治疗窗范围内,未调整给药方案;14例病人经调整给药后,血药浓度亦控制在正常范围内。34例病人未进行万古霉素血药浓度测定,设为对照组。治疗组与对照组病人治愈率分别为100%和76.5%,两组疗效差异有统计学意义(P<0.05);肾毒性发生率分别为0和26.5%,两组肾毒性差异有统计学意义(P<0.05);两组均未出现耳毒性病人。结论应用高效液相色谱法测定万古霉素血药浓度,根据血药浓度制定个体化给药方案,能提高疗效,减少不良反应。

反相高效液相色谱法测定兔血清中小檗碱浓度

目的 :建立前列栓中小檗碱兔血清药物浓度的反相高效液相色谱定量分析方法。方法 :色谱条件为 :固定相 :PlatinumEPS柱 (C810 0A 3μ ,15 0mm× 4 6mm) ,流动相 :乙腈～ 1 12N磷酸盐缓冲液 ( 70∶30 ,v v) ,流速 :0 8ml·min- 1 ,检测波长 345nm ,柱温40℃ ,外标法为定量测定法。结果 :血清小檗碱浓度在 0 72 μg·L- 1 ～ 5 78 98μg·L- 1 的范围内线性关系良好 ,检测限 0 36 μg·L- 1 ,回收率 ( 96 0 6± 4 74) % ,日内、日间精密度为 1 16 %～ 2 18%、0 99%～ 3 0 4%。结论 :本法准确性、灵敏度、专一性高 ,可为小檗碱的体内血清药物浓度分析提供有意义的方法学参考。

高效液相色谱法检测氯丙嗪血药浓度

目的 建立反相高效液相色谱法检测抗精神病药氯丙嗪血药浓度。方法 采用惠普 110 0型高效液相色谱仪 ,原装进口BetaBasic C18分析柱 ,检测波长为 2 5 4nm ,柱温 4 0℃ ,甲醇、磷酸铵缓冲液为移动相 ,流速 1ml/min ,乙醚提取处理样本。以安定为内标。结果 批内、批间试验 :RSD <8 9% ;回收率 :92 0 %～ 99 4 %。最低检测限 :10ng。线性方程 :Y =3 9+132 9X ,r =0 9989,线性范围 :2 5～ 75 0ng/ml。结论 该方法快速、简便、正确 ,适合临床药物治疗时血药浓度的监测。

高效液相色谱测定人血清中鬼臼乙叉甙

高效液相色谱测定人血清中鬼臼乙叉甙朱光文，刘会臣，李新芳，沈丽霞，郭巧兰，高慧钦（白求恩国际和平医院药理室石家庄０５００８２）（河北医学院药学系石家庄０５００１７）１前言鬼臼乙叉甙（Ｅｔｏｐｏｓｉｄｅ，ＶＰ－１６）是临床治疗呼吸道恶性肿瘤和白血病的较...

高效液相色谱法测定人血清中鬼臼乙叉甙浓度

建立了测定血清中鬼臼乙叉甙浓度的反相高效液相色谱方法。血清样品以乙酸乙酯提取，加表鬼臼毒噻吩糖甙作内标，以甲醇∶水（５５∶４５）为流动相，紫外２５４ｎｍ检测，最低检测浓度０．１ｍｇ／Ｌ，在药物浓度为０．５～５０ｍｇ／Ｌ范围内有良好的线性关系，Ｙ＝０．０１６０＋０．０３４０Ｘ，ｒ＝０．９９９１，回收率达９５．０％。日内、日间精密度分别为４．１６％和４．７６％（ｎ＝５）。用所建立的方法测定了患者的血清浓度，结果表明，方法简便、灵敏。

反相高效液相色谱法同时测定血清中5种水溶性维生素

目的建立血清中水溶性维生素B1(VB1)、B6(VB6)、烟酸、烟酰胺和叶酸的高效液相色谱同时测定方法。方法取全血40μL,用200μL甲醇沉淀蛋白,冰箱冷冻(-18℃)30 min后离心(8000 r/min,8 min),上清液通过固相萃取柱进一步净化,收集洗脱液,50℃水浴中氮气吹至0.20 mL,取50μL进样色谱柱分析。对样品的固相萃取条件和色谱条件进行优化后,用于测定人血清样品中5种水溶性维生素的含量。结果优化后的固相萃取条件:固相萃取柱AGTcleanertTMODS C18柱;洗脱液:甲醇(2.4 mL)-水(0.6 mL)混合液;洗脱流速:0.5 mL/min。本法的色谱分离条件为:分离柱Phenomenex C18 Luna色谱柱(250×4.6 mm,5μm);柱温:室温(20℃);流动相:0.05 mol/L KH2PO4溶液(pH6.0)-甲醇梯度洗脱;流速:0.9 mL/min;紫外检测波长:266 nm。5种水溶性维生素标准曲线的线性范围为0～100 ng,相关系数均大于0.999,相对标准偏差(RSD)小于5%,方法检出限(信噪比S/N=2)为0.076～0.170μg/mL,加标回收率为80.2%～115.0%。人血清样品中除烟酰胺未检出外,其余4种均检出。结论所建立的方法快速、简便、灵敏、准确,可用于人血清中水溶性维生素VB1、VB6、烟酸和叶酸的同时测定,但烟酰胺的检测灵敏度有待提高。

高效液相色谱与微超滤技术联用化学发光检测人体血清中的盐酸多巴酚丁胺

研究发现 ,盐酸多巴酚丁胺在碱性条件下能大大增强Luminol K3 Fe(CN) 6化学发光强度 ,基于此 ,并结合HPLC分离技术 ,建立起盐酸多巴酚丁胺的HPLC CL分析新方法。在C1 8反相键合相为色谱柱 ,乙腈为流动相的条件下 ,实现了对人体血清中的盐酸多巴酚丁胺的分离与测定。方法的线性范围为 1 .0～ 1 0 0μg/L,相关系数为 0 .9995 ;检出限为 0 .76 μg/L;相对标准偏差为 2 .9% (n =1 1 )。

高效液相色谱法测定人血清中假尿嘧啶核苷的浓度

应用反相高效液相色谱法测定人血清中假尿苷（ＰＤ）的含量，色谱柱为Ｎｏｖａ－ＰａｋＣ１８３．９ｍｍ×１５０ｍｍ，流动相为０．０４ｍｏｌ／Ｌ磷酸二氢钾缓冲液（ｐＨ４．０），检测波长为２６３ｎｍ，线性范围为０．７～６．８μｍｏｌ／Ｌ，回收率为９３．５０％，日间误差ＣＶ＝３．１１％（ｎ＝６）。同时测定了部队体检正常人血清中ＰＤ的浓度，并用于临床观察肝炎、肾病、肺癌等多种疾病以及Ｈｅ－Ｎｅ激光治疗前后患者血中ＰＤ含量的变化。正常人血中ＰＤ的浓度无性别差异，成年人的正常值与文献一致。肾脏疾病中以尿毒症患者血清中的假尿苷升高最为明显，３例肺癌患者也都有升高的趋势。而我院开展的Ｈｅ－Ｎｅ激光治疗前后无明显的变异，证明激光对细胞修饰没有显著的影响。

高效液相色谱法测定人血清中万古霉素和去甲万古霉素浓度

目的建立人血清中万古霉素和去甲万古霉素浓度的高效液相色谱法(HPLC)测定方法。方法色谱柱为Hypersil BDS C18(250mm×4.6mm,5μm)柱;流动相为磷酸二氢钾缓冲液-甲醇(87∶13),流速1ml/min;紫外检测波长236nm;以甲硝唑为内标,采用乙腈和硫酸锌沉淀蛋白后直接进样。结果万古霉素、去甲万古霉素血清浓度与峰面积线性关系良好,万古霉素回归方程为Y=0.0873X-0.0061,r=0.9999;去甲万古霉素回归方程为Y=0.1000X-0.0004,r=0.9997;线性范围1.0～50.0mg/L。日内相对标准编差(RSD)小于4.8%,日间RSD小于6.6%;万古霉素低、中、高浓度的平均方法回收率分别为102.41%,100.44%,104.69%,平均提取回收率分别为87.54%,89.86%,88.13%;去甲万古霉素低、中、高浓度的平均方法回收率分别为99.46%,98.88%,99.47%,平均提取回收率分别为78.13%,77.41%,76.45%。结论方法操作简便快速,回收率稳定,适于临床血药浓度测定及相关科研的应用。

高效液相色谱法测定人血清中克拉维酸浓度

目的：建立柱前衍生化高效液相色谱法测定人血清中克拉维酸浓度的新方法。方法：应用 Ａｇｉｌｅｎｔ １００色谱系统，色谱柱为 Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ＴＭＣ１８。流动相为甲醇：０．０５ｍｏｌ·Ｌ－１磷酸二氢钾水溶液（５：９５，Ｖ／Ｖ），ｐＨ为３．７０，流速为１ｍｌ·ｍｉｎ－１。柱温为４０℃。ＵＶ检测波长为３１１ｎｍ。血清经两步液液提取一咪唑衍生后进样测定。结果：测定克拉维酸的线性范围为０．０６２５～８ｍｇ·Ｌ－１，最低检测浓度为０．０２９ｍｇ·Ｌ－１。日内精密度＜８．０７％，日间精密度＜７．８８％。方法回收率范围为９９．８％～１０５．６％。结论：本方法精密、准确，适用于克拉维酸的药代动力学研究。

高效液相色谱/光散射检测器测定肝病病人血清中的胆汁酸

利用反相高效液相色谱／挥发激光散射检测器发展了分析胆汁酸的新方法，采用甲醇和乙酸铵缓冲液混合溶液为冲洗体系，梯度淋洗，１０种甘氨型和牛磺型胆汁酸在２５ｍｉｎ内完成基线分线。方法简单快速，不需衍生，血清样品经预处理，平均回收率为９６．１％，在４～５０ｍｇ／Ｌ浓度范围内对峰面积与浓度进行线性回归分析，回归系数在０．９９１５～０．９９８２之间。可用于正常人和肝硬化病人血清中胆汁酸的测定。

高效液相色谱法同时测定血清中茶碱、苯妥英钠、苯巴比妥及卡马西平的药物浓度

报道了用高效液相色谱法（HPLC）同时测定血清中茶减、苯妥莫纳、苯巴比妥及卡马西平的药物浓度。实验条件:Nova-PahC18柱，流动相为甲醇-水（1:1，V／V），检测波长210nm，流速为1mL／min，萃取液为级访-异丙醇（95:5，V／V）。方法具有灵敏（10-9）、准确（回收率在97％～105％之间）、快速（7min）等特点，对临床血药浓度监测有实际应用价值。

高效液相色谱法测定中国健康志愿者血清中坎地沙坦及坎地沙坦西酯片的人体药动学

目的建立高效液相色谱-荧光检测法测定人血清中坎地沙坦的方法,考察坎地沙坦西酯片在中国健康志愿者体内的药动学参数。方法以萘普生为内标,按内标法定量。血清样品经盐酸酸化后,加入甲基叔丁基醚萃取,离心分离,取上清液置于已加入1,3-丙二醇的离心管,吹干后用流动相溶解进样。色谱柱：YMC ODS柱（250mm×4.6mm,5μm）,柱温：30℃;流动相：10mmol/L磷酸二氢钾溶液（磷酸调pH到3.0）∶乙腈=60∶40,流速：1.0mL/min。荧光检测波长：λex270nm,λem390nm。用该方法测定20名健康志愿者口服坎地沙坦西酯片8mg后血清中的药物浓度,进行药动学分析。结果坎地沙坦和萘普生的保留时间分别为10.4min和16.5min;坎地沙坦的线性范围是1.01～202μg/L;日内、日间RSD小于10.39%;方法回收率在94.05%～112.80%范围内。结论此方法适合人体药动学的血样分析,结果准确可靠。

柱前衍生-反相高效液相色谱法测定人血白蛋白中辛酸钠含量

建立了柱前衍生-反相高效液相色谱法测定人血白蛋白中辛酸钠含量的方法。用正己烷萃取人血白蛋白中的辛酸钠,与ω-溴苯乙酮和18-冠-6醚在50℃反应30min,然后用甲醇-水(75∶25,V/V)于Nova-ParkC18柱(150mm×3.9mm,4μm)上分离,在262nm检测衍生物,流速为1.0mL/min,庚酸为内标。辛酸和庚酸的萃取率可分别达到98.2%和97.9%,RSD小于0.9%。方法的线性范围为9.00×10-4～1.44×10-2mol/L(r=0.9995),平均加样回收率为99.7%,RSD≤0.9%。本方法准确、重现性好,可用于人血白蛋白中辛酸钠含量的测定。

改进HPLC法测定人血清中丙戊酸钠的浓度

目的：建立改进HPLC法测定人血清中丙戊酸钠的浓度,为临床合理使用丙戊酸钠提供依据。方法：环己烷羧酸作为内标,血样经硫酸酸化和蛋白沉淀,用正己烷提取后,与2-溴苯乙酮和三乙胺催化衍生,使用HPLC进行测定。色谱柱：ZORBAX SB-C18柱（150 mm×4.6 mm,5μm）;流动相：甲醇-水（72∶28）;流速：1.0 m L/min;紫外检测波长：248 nm;柱温：25℃;进样量：10μL。结果：血清中丙戊酸钠线性范围13.3~160.7μg/m L（r=0.9979,n=6）,血清丙戊酸钠低、中、高浓度方法回收率和萃取回收率分别为88.6%~107.2%和82.1%~89.5%,日内精密度≤6.4%,日间精密度≤8.2%。结论：本实验改进后的方法特异性强、准确度高、线性关系良好、节约实验室成本等,可适用于临床丙戊酸钠常规血药浓度监测的需求。