Preparative isolation and purification of 12,13-dihydroxyeuparin from Radix Eupatorii Chinensis by high-speed counter-current chromatography

An efficient method for the isolation and purification of 12,13-dihydroxyeuparin from Radix Eupatorii Chinensis by high speed counter-current chromatography (HSCCC) was established in this paper. The ether extracts of Radix Eupatorii Chinensis were purified by HSCCC with a solvent system of hexyl hydride-ethyl acetate-methanol-water (1:2:1:2, v/v/v/v). The upper phase was used as the stationary phase and the lower phase as the mobile phase. About 8.4 mg of 12, 13-dihydroxyeuparin was obtained from 200 mg of ether extracts from Radix Eupatorii Chinensis in one-step HSCCC separation, with the purity of 96.71%, as determined by HPLC. After methanol- water recrystallization, the purity of 12,13-dihydroxyeuparin reached 99.83%. Such a simple and effective method was fairly useful to prepare pure compound as reference substances for related study on Radix Eupatorii Chinensis.

Preparative separation and purification of deoxyschizandrin from Schisandrae Sphenantherae Fructus by high-speed counter-current chromatography

A high-speed counter-current chromatography （HSCCC） method was successfully developed for the preparative separation and purification of deoxyschizandrin from Schisandrae Sphenantherae Fructus in one step. The purity of deoxyschizandrin was 98.5%, and the structure was identified by MS, UV and NMR. This method was simple, fast, convenient and appropriate to prepare pure compound as reference substances for related research on Schisandrae Sphenantherae Fmctus.

An Economical Method for Preparative Purification of Five Alkaloids from Coptis Chinensis Franch by High-Speed Counter-Current Chromatography Using Singled Prepared Solvent System by GC

Coptis chinensis Franch, a widely used Traditional Chinese Medicine, shows various kinds of bioactivity. The major active components of the herb are considered to be alkaloids. Thus, preparative separation of these alkaloids is critical important for further pharmacology and mechanism studies. In the paper, five alkaloids from C. chinensis were purified by HSCCC using the solvent system composed of chloro-form-metha- nol-water (2:1:1, v/v/v) single prepared. The content of each solvent in solvent system were determined by gas chromatography (GC), then according the ratios of solvents in each phase to prepare the mobile and stationary phase respectively. And a comparative study was carried out between together preparation and single preparation of the solvent system. The purities and recoveries of all the products were over 98.5% and 92%. However, 134 mL chloroform, 336 mL methanol and 452 mL water were saved when the two phase were singled by GC. Our research showed an economical method for separating alkaloids from C. chinensis by HSCCC using the solvent system single prepared by GC.

Separation and Purification of Acetophenones from Cynanchum bengei Decne Root Bark by Combination of Silica Gel and High-speed Counter-current Chromatography

[Objectives] To develop a method for separation and purification of acetophenones from Cynanchum bengei Decne root bark by combination of silica gel and high-speed counter-current chromatography( HSCCC). [Methods]The crude extract of Cynanchum bengei Decne root bark was separated by silica gel column chromatography,and parts A and B containing acetophenones were obtained. Then,parts A and B were separated by HSCCC with a two-phase solvent system composed of petroleum ether-ethyl acetate-methanol-water( 4∶ 6∶ 4. 5∶ 5. 5 and4∶ 6 ∶ 3 ∶ 7, V/V), respectively. [Results] From 260 mg of part A, four compounds with p-dihydroxybenzene 3. 9 mg(Ⅰ),4-hydroxyacetophenone 17. 1 mg( Ⅱ),2,5-di-hydroxyacetophenone 13. 3 mg(Ⅲ) and 2,4-dihydroxyaceto-phenone 21. 0 mg(Ⅳ) were obtained. And from 300 mg of part B,136 mg of Radix Cynanchi Bungei benzophenone(Ⅴ) was obtained. The purity of compounds determined by HPLC was 97. 0%,96. 6%,99. 2%,99. 7%,99. 5%,respectively. [Conclusions] The established method is simple and efficient. It can be used for separation of acetophenones from Cynanchum bengei Decne root bark and has better practical value,which could provide a reference basis for development and utilization of Cynanchum bengei Decne root bark.

高速逆流色谱(HSCCC)在食品色素制备中的应用

综述了高速逆流色谱在食品色素制备中的应用情况,包括溶剂选择、色素种类等。

高速逆流色谱法(HSCCC)分离制备香水莲花中的柚皮素

采用高速逆流色谱法对香水莲花中的黄酮类化合物进行了分离,溶剂系统为正己烷-醋酸乙酯-甲醇-水(体积比1∶1.2∶2∶1),上层为固定相,下层为流动相,流速2.0 mL/min,转速830 r/min,检测波长280 nm,进样量300 mg,分离出80 mg化合物C,经HPLC测定纯度>98.6%,根据UV光谱、MS分析及1H-NMR、13C-NMR图谱分析结果,化合物C鉴定为柚皮素,该化合物为首次从该植物中分离得到,为香水莲花的开发应用提供了理论依据。

HSCCC分离纯化未成熟罗汉果皂苷类化合物

为建立高速逆流色谱分离未成熟罗汉果中皂苷类化合物的方法,该研究将罗汉果粗提物先经过大孔树脂富集皂苷类化合物,再采用高速逆流色谱分离罗汉果皂苷。结果表明:以氯仿-甲醇-正丁醇-水(5∶6∶1∶4,v/v/v/v)作为两相溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相,在主机转速为860 r·min^(-1),流速为2.5 mL·min^(-1),检测波长为203 nm的条件下,一次性制备得到4个化合物,即11-O-罗汉果皂苷Ⅱ(Ⅰ)、罗汉果皂苷ⅡE(Ⅱ)、11-O-罗汉果皂苷Ⅲ(Ⅲ)和罗汉果皂苷Ⅲ(Ⅳ),经高效液相色谱检测纯度分别为95.5%、98.2%、80.1%和97.6%。该方法实现了未成熟罗汉果皂苷快速有效的分离,具有样品回收率高、损失少、避免样品失活等优点,提高了分离效率。该研究结果为更多的罗汉果皂苷化合物的分离纯化奠定了基础,补充与优化了罗汉果皂苷类化合物的分离方法。

应用高速逆流色谱(HSCCC)分离纯化山茱萸中的没食子酸

应用高速逆流色谱 ( HSCCC)分离山茱萸中的没食子酸并结合波谱技术进行结构鉴定。经过一次逆流色谱分离 ,可以得到纯度在 70 %以上的没食子酸 ,第二次分离即可使其纯度达到 97%以上。

桑黄中黄嘌呤氧化酶抑制剂的筛选分离及质谱分析

以桑黄为研究对象,综合利用数学模型、色谱和质谱技术,建立了快速筛选分离桑黄中黄嘌呤氧化酶抑制剂的新方法。利用数学模型结合响应面优化桑黄中黄酮类活性成分的提取工艺,以黄嘌呤氧化酶为靶点,应用超滤-质谱技术快速筛选桑黄中黄嘌呤氧化酶的抑制剂;在活性指导下,利用高速逆流色谱技术分离纯化桑黄中活性成分,采用高效液相色谱-高分辨质谱结合核磁共振波谱技术对其进行结构鉴定。结果表明,在此条件下得到桑黄黄酮提取率为24.95 mg/g,优于响应面试验;从桑黄中筛选并分离出3个纯度均在90%以上的黄嘌呤氧化酶抑制剂,抑制效果强弱顺序为桑黄素D>桑黄素E>纤孔菌素A。本方法快速、灵敏,可为桑黄药理作用研究提供支撑,同时可为桑黄食品开发提供可行方法和理论支持。

高速逆流色谱法分离β-谷甾醇和菜油甾醇的研究

利用高速逆流色谱法 ,并选用V(庚烷 )∶V(乙腈 )∶V(乙酸乙酯 ) =5∶5∶1溶剂体系 ,成功地分离了混合植物甾醇标准品中的 β 谷甾醇和菜油甾醇。经过HPLC检测 ,一次性分离可得到质量分数为 97%的 β 谷甾醇和质量分数为 91%的菜油甾醇产品 ,收率分别可达 5 6 %和 5 0 %。该方法简便、重现性好 ,可作为高纯度 β

苦参生物碱的高速逆流色谱法制备研究——色谱参数和仪器参数的最佳化

应用新型的液液分配技术——高速逆流色谱法 (High Speed Counter- current Chromatography,HSCCC)对苦参生物碱类成分的分离制备进行探讨。选用氯仿 -磷酸 -磷酸钠缓冲液 (p H6 .2 0 )溶剂系统 ,经正交试验确定了HSCCC的最佳运行参数 ,将苦参粗提物分离得到 6个固态收集物 ,经 TL C4种不同展开系统证实其中有一个为单一组分。实验表明 ,HSCCC法是一种高效、简便的分离制备中草药有效成分纯品的新方法。

高速逆流色谱法分离纯化环孢菌素

应用高速逆流色谱法对环孢菌素的分离纯化进行研究 ,选择石油醚 -丙酮 -水 (3∶ 3∶ 2 ,V/ V)为两相体系 ,计算环孢菌素 A、B、C、D在两相体系中的分配系数 ,以上相为固定相 ,下相为流动相进行高速逆流色谱分离纯化 ,高效液相色谱法测定单组分纯度。实验结果表明一次高速逆流色谱即可将环孢菌素粗品分离纯化 ,得到纯度 98.5 %以上的环孢菌素 A、B、C、D单组分 ,收率达 85 %以上。

高速逆流色谱分离纯化九里香中的黄酮类化合物

应用高速逆流色谱法分离纯化了九里香中的4种黄酮类化合物。以石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(5:5:4.8:5,v/v/v/v)作为两相溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相,以主机转速800r/min、流速2.0mL/min、单次进样量200mg的条件成功地从4.0g九里香粗提物中分离纯化出54.31mg5,7,3′,4′,5′-五甲氧基黄酮(重结晶后)、107.68mg5-羟基-6,7,3′,4′-四甲氧基黄酮、215.54mg5-羟基-6,7,8,3′,4′-五甲氧基黄酮、84.36mg5-羟基-6,7,8,3′,4′,5′-六甲氧基黄酮,纯度均在95%以上。各化合物的结构均由质谱和核磁共振氢谱、碳谱鉴定。其中化合物5-羟基-6,7,3′,4′-四甲氧基黄酮为首次从九里香中分离得到。

高速逆流色谱法从蝙蝠蛾拟青霉中快速分离制备麦角甾醇纯品

建立了用高速逆流色谱从蝙蝠蛾拟青霉中高效、快速分离制备高纯度麦角甾醇的方法。将蝙蝠蛾拟青霉的乙酸乙酯提取物直接进行高速逆流色谱分离,考察了不同溶剂系统的分离效果。结果表明,最佳的溶剂系统为正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(体积比为6∶1.7∶6∶0.3),以上相为固定相,下相为流动相,转速为850r/min,流速为2mL/min,检测波长为280nm。制备所得的麦角甾醇经紫外光谱(UV)和高分辨质谱(HRMS)鉴定及与标准品对照定性;纯度经高效液相色谱(HPLC)分析为99.2%(峰面积归一化法)。该方法制备麦角甾醇简便、快速,所得产物的纯度高,适合于麦角甾醇对照品的制备。

高速逆流色谱分离制备陈皮中的黄酮类化合物

应用高速逆流色谱法分离制备了陈皮中3种黄酮类化合物。以石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(体积比为2∶4∶3∶3)为两相溶剂系统,在主机转速850r/min、流动相流速1.7mL/min、检测波长280nm条件下进行分离制备,6h内从4.0g陈皮粗提物中一步分离制备得到橙皮苷10.1mg、桔皮素49.8mg和5-羟基-6,7,8,3′,4′-五甲氧基黄酮50.6mg,纯度均达97.0%以上,各化合物结构经质谱和核磁共振氢谱、碳谱鉴定。利用该方法可以对陈皮中的黄酮类化合物进行快速的分离和纯化。

高速逆流色谱结合制备液相色谱法分离制备葡萄籽中的多酚

采用高速逆流色谱结合制备液相色谱法从葡萄籽乙醇提取物中分离得到了8种多酚。高速逆流色谱以上相为固定相,下相为流动相,主机转速为900 r/min,流速为2 mL/min,分离温度为25℃,检测波长为280 nm,利用正向和反向洗脱相结合的模式,在正丁醇-乙酸乙酯-水(1∶14∶15,v/v/v)和正己烷-乙酸乙酯-水(1∶10∶10,v/v/v)溶剂系统下从葡萄籽提取物中分离得到了5种多酚。原花青素B1、原花青素B2、没食子酸、表儿茶素没食子酸酯和儿茶素的纯度分别为98.5%、97.2%、98.3%、98.9%和96.7%。利用制备液相色谱法对高速逆流色谱分离成分进一步分离纯化,获得了表儿茶素、表没食子儿茶素没食子酸酯和没食子儿茶素没食子酸酯,纯度分别99.2%、99.3%和99.2%。该方法单次制备量均达到毫克级,简便、快速、分离纯度高,适合于葡萄籽中多酚的分离制备。

高速逆流色谱法分离附子中的15-a-羟基新乌碱

采用高速逆流色谱法对附子中的化学成分进行研究,分离得到了15 α 羟基新乌碱单体。溶剂系统为氯仿-甲醇-盐酸(0.3mol L)=4∶3∶2,上层为固定相,下层为流动相。流速1.8mL min,转速850r min。并对其结构进行了鉴定。

高速逆流色谱法分离纯化银杏叶中白果内酯和银杏内酯A、B、C

目的从银杏叶中分离纯化白果内酯和银杏内酯A、B、C。方法银杏叶提取液经醋酸乙酯萃取、D-101大孔吸附树脂柱和Al2O3柱纯化后得到总内酯提取物,提取物再经两次高速逆流色谱分离制备4种内酯单体。结果25%乙醇热提取、醋酸乙酯萃取、D-101柱、pH4.0的Al2O3柱对总内酯的提纯最终使总内酯质量分数达到44.98%。经高速逆流色谱制备得到的白果内酯和银杏内酯A、B、C最高质量分数分别为98.3%、98.9%、98.8%、98.4%。结论本法简便快速、回收率高。

高速逆流色谱与硅胶柱色谱结合分离制备高纯度芦荟素异构体

芦荟素是芦荟叶中主要的蒽醌类成分,通常以芦荟素A和B两种非对映异构体形式并存,目前已成为许多芦荟产品质量控制指标之一。采用高速逆流色谱和硅胶柱色谱结合的方法,从老芦荟干粉中分离制备了高纯度的芦荟素A(纯度为98%)和芦荟素B(纯度为96%)样品,并采用快原子轰击质谱(FAB-M S)和核磁共振氢谱(1H NMR)以及GOE SY(grad ien t-enhanced nuc lear O verhau ser e ffec t spec tro scopy)等方法对所得的两个芦荟素异构体的立体构象进行了确认。该法具有制备量大和分离效率高的特点。

土豆叶中茄尼醇的高速逆流色谱法分离纯化及质谱解析

采用超微回流提取方法提取土豆叶中的茄尼醇,用高速逆流色谱(HSCCC)对粗提物中的茄尼醇进行分离纯化。以正己烷-甲醇(体积比为10∶7)作为两相溶剂系统,以其下相为流动相,上相为固定相,经过一步HSCCC从60mg茄尼醇粗提物中分离得到了5mg纯度为98.7%的茄尼醇;对分离得到的茄尼醇进行大气压化学电离质谱解析,研究了茄尼醇的大气压化学电离质谱的一级电离规律和二级质谱裂解规律。