富锌酵母的药代动力学及生物利用度研究

选用10只健康蛋鸡进行口服富锌酵母和硫酸锌的药物代谢动力学和生物利用度研究。采用原子吸收法测定血浆锌浓度,药-时数据经MCPKP程序处理,结果口服富锌酵母和硫酸锌在蛋鸡体内运转适合一室开放模型,主要药代动力学参数:富锌酵母为tmax=2.11h,Cmax=2.42μg/mL,Ka=1.06h-1,t1/2Ka=0.76h,t1/2K=2.47h,Kel=0.29h-1;硫酸锌为tmax=2.27h,Cmax=1.63μg/mL,Ka=1.19h-1,t1/2Ka=0.74h,Kel=0.31h-1,t1/2K=2.32h;口服高锌酵母的相对生物利用度F(AUC富锌酵母/AUC硫酸锌)=148%,显示蛋鸡口服富锌酵母要比硫酸锌效果好,为其1.48倍。

大豆锌指转录因子GmDi19-5对高温的响应及互作蛋白的筛选

【目的】高温胁迫已经成为威胁作物生长发育的主要非生物胁迫因素之一,转录因子在植物非生物胁迫响应中起着重要作用。通过对大豆锌指转录因子基因Gm Di19-5在高温胁迫下的响应和功能鉴定,以及利用酵母双杂交技术从大豆c DNA文库筛选与其互作的候选蛋白,研究Gm Di19-5对高温胁迫的响应机制。【方法】以大豆c DNA为模板,利用实时荧光定量PCR检测Gm Di19-5在高温处理不同时间段的表达模式;通过Plant CARE和PLACE数据库预测Gm Di19-5启动子元件,并对Gm Di19-5启动子转基因拟南芥在高温处理下进行的组织化学染色,分析Gm Di19-5启动子在高温胁迫下的活性;构建p GBKT7-Gm Di19-5诱饵载体,验证自激活活性;利用酵母双杂交技术,以p GBKT7-Gm Di19-5为诱饵筛选大豆c DNA文库,筛选与其互作的候选蛋白;进一步用酵母双杂交系统验证Gm Di19-5与候选蛋白的互作;利用实时荧光定量PCR检测候选蛋白基因在对高温处理的响应情况;构建融合表达载体,用GFP-Gm Di19-5融合表达载体转化拟南芥原生质体,检测Gm Di19-5蛋白的亚细胞定位情况。【结果】实时荧光定量PCR结果显示,Gm Di19-5在高温胁迫下上调表达;启动子元件分析表明,Gm Di19-5包含多种与胁迫应答相关的顺式作用元件,包括热响应元件HSE;组织化学染色分析发现,经高温处理后,过表达拟南芥幼苗的地上部分和地下部分均有报告基因的表达;亚细胞定位结果表明,Gm Di19-5蛋白定位于拟南芥原生质体的细胞核中;通过酵母双杂交技术筛选到了与Gm Di19-5互作的候选蛋白,试验进一步验证了Gm Di19-5与Gm Dna J在酵母细胞中互作;另外,实时荧光定量PCR结果显示,互作蛋白基因Gm Dna J受高温胁迫诱导表达。【结论】Gm Di19-5受高温诱导表达,Gm Di19-5可能与Gm Dna J互作,表明Gm Di19-5功能的发挥可能需要Gm Dna J的参与。

微量元素锌营养剂的研究进展

锌是人体内具有重要生理功能的营养素 ,低毒高效锌补充营养剂的研制与开发将是未来微量元素锌营养剂研究的方向 ,而其中具有有机活性锌酵母的研制作为锌研究的主流 ,将最终成为生物补锌的主要形式。

超高压诱变选育富锌啤酒酵母菌株的研究

以啤酒酵母为出发菌株,采用超高压诱变方法诱变选育高富集锌的酵母菌株。优化了超高压处理的工艺条件,并基于菌株对锌离子的耐受性和富集性,对菌株进行筛选。结果表明,培养10 h的啤酒酵母菌处于对数生长期,适宜于诱变;超高压处理压力250 MPa、保压时间20 min为诱变的最佳工艺条件;成功选育出一株高富集锌的突变菌株,其细胞锌含量达2.75 mg/g,是出发菌的6.55倍。