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白杨素通过下调Annexin A3逆转人肺腺癌A549/DDP细胞顺铂的耐药性
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作者 刘晖杰 彭荣 许华 《贵州医科大学学报》 CAS 2023年第7期800-806,共7页
目的观察白杨素对肺腺癌顺铂(DDP)耐药性细胞A549/DDP耐药敏感性的影响。方法取A549和A549/DDP细胞,qRT-PCR及Western blot法检测膜联蛋白A3(Annexin A3)基因及蛋白表达,CCK-8法测不同浓度白杨素(0、5、25、50、100 mmoL/L)干预后细胞... 目的观察白杨素对肺腺癌顺铂(DDP)耐药性细胞A549/DDP耐药敏感性的影响。方法取A549和A549/DDP细胞,qRT-PCR及Western blot法检测膜联蛋白A3(Annexin A3)基因及蛋白表达,CCK-8法测不同浓度白杨素(0、5、25、50、100 mmoL/L)干预后细胞生存率;将A549/DDP细胞分为A549/DDP组、白杨素组(50 mol/L)、Annexin A3过表达组(Annexin A3mimic组)、Annexin A3阴性对照组(Annexin A3 NC)、白杨素+Annexin A3mimic组,另取A549细胞正常培养作为空白对照组;CCK-8法检测细胞对DDP的半数生存浓度(IC50)及耐药指数;qRT-PCR和Western blot法检测Annexin A3基因和蛋白表达水平,流式细胞义监测细胞凋亡率,小鼠荷瘤实验检测移植瘤体积。结果不同浓度的白杨素均能时效依赖性和剂量依赖性降低A549、A549/DDP细胞生存率(P<0.05),选取50 mol/L为实验浓度作用细胞48 h;与A549细胞比较,A549/DDP细胞Annexin A mRNA及蛋白表达、对DDP的IC50、耐药指数均升高,凋亡率降低(P<0.05);与A549/DDP组比较,白杨素组细胞IC50、耐药指数、Annexin A3 mRNA及蛋白表达降低,细胞凋亡率升高(P<0.05),Annexin A3 mimic组细胞IC50、耐药指数、Annexin A3 mRNA及蛋白表达升高,细胞凋亡率降低(P<0.05);Annexin A3基因高表达可减弱A549/DDP细胞对白杨素的敏感性,降低细胞凋亡率(P<0.05);小鼠荷瘤实验证实,与单独的DDP治疗组比较,白杨素与DDP联合治疗可显著降低小鼠A549/DDP移植瘤瘤体体积(P<0.05),Annexin A3基因高表达的小鼠逆转白杨素与DDP联合治疗效果(P<0.05)。结论白杨素可能通过下调Annexin A3表达,逆转A549/DDP细胞对DDP的耐药性。 展开更多
关键词 肺腺肿瘤 白杨素 膜联蛋白A3 顺铂耐药 A549/ddp细胞
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补中益气汤中的有效成分槲皮素通过GSTP1-JAK-STAT途径增强肺腺癌耐药细胞株A549/DDP对顺铂的敏感性
2
作者 邹长鹏 郭燕 +2 位作者 张长旺 高思铭 李娜 《广州中医药大学学报》 CAS 2023年第10期2606-2614,共9页
【目的】探究补中益气汤的有效成分槲皮素联合顺铂治疗在增强肺腺癌对顺铂敏感性中的作用及其潜在分子机理。【方法】(1)网络药理学分析:从TCMSP数据库筛选补中益气汤的有效成分及其对应靶点,从TCGA数据库下载肺腺癌疾病的数据,并基于... 【目的】探究补中益气汤的有效成分槲皮素联合顺铂治疗在增强肺腺癌对顺铂敏感性中的作用及其潜在分子机理。【方法】(1)网络药理学分析:从TCMSP数据库筛选补中益气汤的有效成分及其对应靶点,从TCGA数据库下载肺腺癌疾病的数据,并基于差异分析和网络药理学分析挖掘补中益气汤治疗肺腺癌的主要活性成分和潜在作用靶点,通过富集分析以判断相关信号通路,通过分子对接模拟技术分析关键基因与有效成分之间的对接关系。(2)细胞实验:槲皮素或顺铂单一处理以及两者联合处理肺腺癌细胞(A549、A549/DDP),通过细胞计数试剂盒(CCK)-8、Western Blot法、流式细胞术分别对应分析肺腺癌细胞的细胞活力、关键蛋白的表达和细胞凋亡情况。细胞热迁移分析(CETSA)验证活性成分槲皮素与靶蛋白谷胱甘肽S-转移酶π(GSTP1)的结合关系。【结果】补中益气汤中的有效成分槲皮素能与GSTP1紧密结合。通路富集分析显示槲皮素和顺铂可能通过铂类耐药以及Janus激酶(JAK)-信号传导与转录激活因子(STAT)通路影响肺腺癌的进展。此外,槲皮素联合顺铂可下调肺腺癌细胞中GSTP1和JAK-STAT信号通路相关蛋白的表达。在功能上,槲皮素能加强顺铂诱导的肺腺癌细胞的抗癌活性。【结论】槲皮素可减轻肺腺癌耐药细胞对顺铂的耐药性。 展开更多
关键词 补中益气汤 槲皮素 肺腺癌 GSTP1 JAK-STAT途径 顺铂敏感性 A549/ddp细胞
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VARIOUS DOSES OF CISPLATIN (DDP) COMBINED WITH MULTI-DRUG CHEMOTHERAPY FOR ADVANCED MALIGNANT SOLID TUMOR
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作者 王奇璐 冯奉仪 +7 位作者 王金万 孙燕 周际昌 王采 熊辉 李青 吴冠清 苏嵋 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 1990年第4期59-62,共4页
Two hundred and thirty-six patinets with various advanced malignant solid tumors treated by combined chemotherapy with routine doses of cisplatin (DDP) from 1980 to 1986 are presented. According to different doses of ... Two hundred and thirty-six patinets with various advanced malignant solid tumors treated by combined chemotherapy with routine doses of cisplatin (DDP) from 1980 to 1986 are presented. According to different doses of cisplatin everyday, the patients were divided into 4 groups: (1) 20 ing/day×4- 5, 80 cases; (2) 30 mg day × 3 - 5, 91 cases; (3) 40 mg/ day 3 -4, 37 cases; (4) 50 mg/day×2 - 3, 28 cases. Each group was repeated for 3 weeks. The effect and toxicity were analysed and compared with 22 cases treated by single DDP in 1975. The response (CR+PR) rate was 39.2% in 194 evaluated patients. The response rate was similar in group 20 mg and single DDP (29.2% and 27.3%). Ths response rate was lower than that of group 30 mg, 40 mg, and 50 mg 43.4% and 50%) (P<0.05). The remissions in various groups were not significantly different.The toxicity of combined chemotherapy was not severe. 91.1% of patients had nausea and vomiting. There was no statistical difference in the various groups. Bone marrow suppresion was less in single DDP group than that of combined chemotherapy group (P<0.05), DDP 30-50 mg 1/d×5-3 was better than HD-DDP in some patients. 展开更多
关键词 ddp VARIOUS DOSES OF cisplatin COMBINED WITH MULTI-DRUG CHEMOTHERAPY FOR ADVANCED MALIGNANT SOLID TUMOR
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白藜芦醇通过铁死亡途径逆转食管癌细胞Eca109/DDP化疗耐药
4
作者 王陈等 马柏强 易弼顺 《世界华人消化杂志》 CAS 2023年第12期477-484,共8页
背景白藜芦醇不仅具有抗肿瘤作用,其还能增强多种化疗药物的化疗敏感性,但其对食管癌耐药细胞的顺铂敏感性的作用尚不清楚.目的探讨白藜芦醇逆转食管癌细胞Eca109/DDP的耐药效应并从铁死亡的角度分析其潜在的作用机制.方法采用MTT法确... 背景白藜芦醇不仅具有抗肿瘤作用,其还能增强多种化疗药物的化疗敏感性,但其对食管癌耐药细胞的顺铂敏感性的作用尚不清楚.目的探讨白藜芦醇逆转食管癌细胞Eca109/DDP的耐药效应并从铁死亡的角度分析其潜在的作用机制.方法采用MTT法确定白藜芦醇和顺铂的最佳作用时间和浓度;检测细胞增殖、细胞内丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)、活性氧(reactive oxygen species,ROS)及铁离子的水平;Western blot检测铁死亡相关调控因子酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(acyl coenzyme A synthetase long chain family member 4,ACSL4)、铁蛋白重链(ferritin heavy chain,FTH)、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)和肿瘤蛋白53(tumor protein 53,P53)的蛋白表达情况.结果MTT检测结果显示,相较于单用顺铂,联用白藜芦醇对Eca109/DDP细胞的生长抑制作用较为显著(P<0.05).此外,白藜芦醇和顺铂联用可显著降低Eca109/DDP细胞克隆形成数(P<0.05),增加细胞内铁离子、MDA和ROS水平(P<0.05),降低GSH水平(P<0.05).铁死亡抑制剂(ferrostatin-1,Fer-1)和铁离子螯合剂(deferoxamine,DFO)可部分逆转白藜芦醇对细胞增殖的抑制作用(P<0.05).Western blot的结果显示相较于其他组,白藜芦醇和顺铂联用组的FTH和GPX4的蛋白表达显著降低(P<0.05),而ACSL4和P53的蛋白表达显著增加(P<0.05).结论白藜芦醇可通过铁死亡抑制Eca109/DDP细胞的增殖并逆转顺铂耐药. 展开更多
关键词 白藜芦醇 食管癌细胞Eca109/ddp 顺铂耐药 铁死亡
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FoxM1对人宫颈癌顺铂耐药株Hela/DDP增殖、侵袭、凋亡的影响及其机制研究
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作者 章霞 张秀峰 +2 位作者 吴顺红 陈峪 江红 《广西医科大学学报》 CAS 2023年第7期1101-1106,共6页
目的:探讨叉头框转录因子M1(FoxM1)对人宫颈癌顺铂耐药株Hela/DDP增殖、侵袭、凋亡的影响及其机制。方法:将Hela/DDP细胞分为空白组(常规培养,不予任何处理)、正常对照(NC)组(转染空白干扰质粒)、低表达组和过表达组。低表达组转染siRNA... 目的:探讨叉头框转录因子M1(FoxM1)对人宫颈癌顺铂耐药株Hela/DDP增殖、侵袭、凋亡的影响及其机制。方法:将Hela/DDP细胞分为空白组(常规培养,不予任何处理)、正常对照(NC)组(转染空白干扰质粒)、低表达组和过表达组。低表达组转染siRNA-FoxM1下调Hela/DDP细胞中FoxM1表达,过表达组转染pcDNA3.1-FoxM1上调Hela/DDP细胞中FoxM1表达。采用RT-qPCR法检测FoxM1 m RNA表达水平,CCK-8检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡,Transwell小室检测细胞侵袭能力。结果:FoxM1 mRNA在Hela细胞中的表达水平低于Hela/DDP细胞(P<0.05)。空白组与NC组中FoxM1 mRNA、增殖率、凋亡率、侵袭细胞数及HSP70、S100A9蛋白表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。与空白组比较,低表达组细胞活力和侵袭能力及FoxM1 mRNA、HSP70蛋白表达水平降低,凋亡率和S100A9蛋白表达水平升高(P<0.05),与空白组比较,过表达组细胞活力和侵袭能力及FoxM1 m RNA、HSP70蛋白表达水平升高,凋亡率和S100A9蛋白表达水平降低(P<0.05)。与低表达组比较,过表达组细胞活力和侵袭能力及FoxM1 mRNA、HSP70蛋白表达水平升高,凋亡率和S100A9蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:下调FoxM1表达可抑制HSP70表达,促进S100A9表达,调控宫颈癌细胞恶性行为,从而提高宫颈癌顺铂耐药细胞株对顺铂化疗的敏感性。 展开更多
关键词 叉头框转录因子M1 人宫颈癌细胞株Hela/ddp 顺铂化疗敏感性
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当归多糖对结直肠癌细胞顺铂耐药性的影响及作用机制
6
作者 杨柳 彭飞 +1 位作者 陆平 傅永吉 《北华大学学报(自然科学版)》 CAS 2024年第4期448-453,共6页
目的 探讨当归多糖对结直肠癌细胞顺铂耐药性的影响及作用机制。方法 将人结直肠癌细胞HT-15、顺铂耐药细胞株HT-15/DDP仅使用30μmol/L浓度的顺铂干预设为对照组,使用对应质量浓度1.0、1.5、2.0 mg/mL的当归多糖干预12 h后再加入30μmo... 目的 探讨当归多糖对结直肠癌细胞顺铂耐药性的影响及作用机制。方法 将人结直肠癌细胞HT-15、顺铂耐药细胞株HT-15/DDP仅使用30μmol/L浓度的顺铂干预设为对照组,使用对应质量浓度1.0、1.5、2.0 mg/mL的当归多糖干预12 h后再加入30μmol/L浓度顺铂设为当归多糖组。通过脂质体细胞转染技术分别将miR-10b-5p inhibitor、TGFBR2 mimics转染至HT-15/DDP细胞中,再加入2.0 mg/mL当归多糖干预48 h,然后将其分为当归多糖(2.0 mg/mL)+miR-10b-5p inhibitor组、当归多糖(2.0 mg/mL)+TGFBR2 mimics组。MTT法检测细胞增殖能力;Transwell小室试验检测细胞迁移能力;流式细胞术检测细胞凋亡能力。RT-PCR检测miR-10b-5p、TGFBR2 mRNA表达水平;Western blot检测TGFBR2蛋白表达水平。结果 单独顺铂干预的对照组HT-15/DDP细胞增殖率、细胞迁移个数明显高于HT-15细胞(P<0.01);经不同质量浓度当归多糖预处理12 h后,可明显增强HT-15/DDP细胞对顺铂的敏感性,HT-15/DDP细胞增殖率、细胞迁移个数明显降低(P<0.01)。单独顺铂干预的对照组HT-15/DDP细胞凋亡率明显低于HT-15细胞(P<0.01);经不同质量浓度当归多糖预处理12 h后,明显增强了HT-15/DDP细胞对顺铂的敏感性,HT-15/DDP细胞凋亡率明显升高(P<0.01)。HT-15/DDP细胞miR-10b-5p、TGFBR2表达水平在各组间比较差异均具有统计学意义(P<0.01);不同剂量当归多糖组中HT-15/DDP细胞miR-10b-5p表达水平明显低于对照组,TGFBR2表达水平明显高于对照组(P<0.01),随着当归多糖剂量的增加miR-10b-5p表达水平逐渐降低,TGFBR2表达水平逐渐升高(P<0.01)。使用生物信息学数据库(TargetScan、miRanda)预测miR-10b-5p的靶基因,结果显示,TGFBR2是miR-10b-5p的候选靶基因。miR-10b-5p表达下调后,HT-15/DDP细胞中TGFBR2相对表达量明显高于对照组HT-15/DDP细胞中TGFBR2相对表达量(P<0.01)。当归多糖(2.0 mg/mL)+miR-10b-5p inhibitor组、当归多糖(2.0 mg/mL)+TGFBR2 mimics组的HT-15/DDP细胞增殖率、细胞增殖迁移个数明显低于当归多糖组(2.0 mg/mL),HT-15/DDP细胞凋亡率明显高于当归多糖组(2.0 mg/mL)(P<0.05)。结论 当归多糖可通过下调miR-10b-5p表达、上调TGFBR2表达逆转结直肠癌细胞顺铂耐药性,进而抑制肿瘤细胞增殖、迁移,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 当归多糖 结直肠癌 HT-15细胞 HT-15/ddp细胞 顺铂耐药 miR-10b-5p TGFBR2
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川芎嗪对人卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1/DDP的逆转作用研究 被引量:15
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作者 刘明华 任美萍 +2 位作者 李蓉 章卓 肖顺汉 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第20期1982-1984,1987,共4页
目的建立人卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1/DDP,探讨川芎嗪对COC1/DDP顺铂耐药性的逆转作用及其机制。方法采用逐步递增DDP浓度、体外间歇诱导法诱导建立人卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1/DDP;CCK-8(cell counting kit-8)检测川芎嗪对COC1/DDP细... 目的建立人卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1/DDP,探讨川芎嗪对COC1/DDP顺铂耐药性的逆转作用及其机制。方法采用逐步递增DDP浓度、体外间歇诱导法诱导建立人卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1/DDP;CCK-8(cell counting kit-8)检测川芎嗪对COC1/DDP细胞顺铂耐药性的逆转作用;GSH和GSSG试剂盒检测细胞内GSH的水平,高效液相色谱测定细胞内顺铂的含量。结果历时5个月建立了在1.0μg/mL DDP作用下生长良好的耐药细胞株COC1/DDP,耐药指数为9.44,对卡铂、长春新碱和阿霉素有不同程度的交叉耐药性;川芎嗪0.25 mg/mL对COC1/DDP的顺铂耐药性有逆转作用,逆转倍数达到3.76倍;与COC1比较,COC1/DDP细胞内GSH水平增高,顺铂含量下降,但经川芎嗪0.25 mg/mL干预后,COC1/DDP胞内的GSH水平降低,顺铂的含量增加(P<0.01)。结论川芎嗪对COC1/DDP的顺铂耐药性有逆转作用,其机制可能与干预COC1/DDP细胞内GSH/GST-π解毒系统,增加细胞内顺铂的含量有关。 展开更多
关键词 川芎嗪 顺铂 COC1/ddp 多药耐药性
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在顺铂耐药的A549/DDP人肺腺癌细胞中乙醛脱氢酶表达增加 被引量:8
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作者 何进喜 宋旭梅 +5 位作者 于亮 李靖 乔志雄 氿睿 余博 刘晓明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期625-629,共5页
目的观察乙醛脱氢酶(ALDH)在A549/DDP人肺腺癌耐顺铂细胞中的表达及在顺铂耐药性中的功能。方法流式细胞术检测肿瘤干细胞标志分子CD44、CD90、CD73、CD105、上皮细胞黏附分子(Ep CAM)、ATP结合盒式超家族G成员2(ABCG2)以及ALDH在A549... 目的观察乙醛脱氢酶(ALDH)在A549/DDP人肺腺癌耐顺铂细胞中的表达及在顺铂耐药性中的功能。方法流式细胞术检测肿瘤干细胞标志分子CD44、CD90、CD73、CD105、上皮细胞黏附分子(Ep CAM)、ATP结合盒式超家族G成员2(ABCG2)以及ALDH在A549细胞和A549/DDP细胞表达的阳性率;MTT法检测100μmol/L二乙氨基苯甲醛(DEAB)处理前后A549/DDP细胞的增殖能力和对顺铂的敏感性;实时定量PCR检测ALDH各亚型在A549细胞与A549/DDP细胞中的mRNA水平的表达;Western blot法检测实时定量PCR有明显差异结果的ALDH的亚型ALDH1A3和ALDH1B1在A549细胞与A549/DDP细胞中的蛋白水平的表达。结果与A549细胞相比,ABCG2和ALDH在A549/DDP细胞的阳性率增加,ALDH阳性率达97.7%,在A549细胞中仅仅为4.3%;CD44、CD90、CD73、CD105在二者间阳性率无明显差异,而Ep CAM在A549/DDP细胞阳性率降低;经100μmol/L DEAB处理后,A549/DDP细胞对顺铂的耐药性显著低于未处理前;与A549细胞相比,ALDH1A3和ALDH1B1的mRNA在A549/DDP细胞中表达水平增高;ALDH1B1蛋白表达升高,ALDH1A3表达降低。结论 ALDH可作为顺铂耐药人肺腺癌细胞的标志分子之一,其中ALDH1B1在顺铂耐药性中可能发挥一定作用,为临床上治疗肺腺癌耐药患者提供新的治疗靶点和策略。 展开更多
关键词 A549/ddp 顺铂耐药 乙醛脱氢酶
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雷公藤多苷增强耐顺铂人上皮性卵巢癌SKOV3/DDP细胞株顺铂敏感性的体外研究 被引量:3
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作者 刘文成 谭布珍 +3 位作者 占欣璐 胡辉 黄根华 曹青 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2017年第12期1364-1370,共7页
目的:探讨雷公藤多苷(GTW)对耐顺铂人上皮性卵巢癌细胞株(SKOV3/DDP)的顺铂(DDP)增敏作用及机制。方法:将对数生长期的SKOV3/DDP细胞随机分为8组:空白对照组、10μg/mL DDP组、50μg/mL GTW组、800μg/mL GTW组、3 200μg/mL GTW组、10... 目的:探讨雷公藤多苷(GTW)对耐顺铂人上皮性卵巢癌细胞株(SKOV3/DDP)的顺铂(DDP)增敏作用及机制。方法:将对数生长期的SKOV3/DDP细胞随机分为8组:空白对照组、10μg/mL DDP组、50μg/mL GTW组、800μg/mL GTW组、3 200μg/mL GTW组、10μg/mL DDP+50μg/mL GTW组、10μg/mL DDP+800μg/mL GTW组、10μg/mL DDP+3 200μg/mL GTW组,利用CCK-8法、流式细胞术、Western blot法检测各组细胞生长、细胞凋亡以及细胞谷胱甘肽S转移酶-π(GST-π)基因蛋白、P-糖蛋白(MDR1)、信号转导和转录激活因子3(STAT3)、p-STAT3的表达。结果:DDP与GTW联用在抑制SKOV3/DDP细胞生长作用上呈现相加效应;800、3 200μg/mL GTW分别与10μg/mL DDP联用后,可显著促进SKOV3/DDP细胞凋亡,下调p-STAT3的表达(P<0.05)。结论:GTW可显著增强SKOV3/DDP细胞对DDP的敏感性,其作用机制可能是下调STAT3信号通路中的p-STAT3表达。 展开更多
关键词 雷公藤多苷 SKOV3/ddp 顺铂 增敏作用 STAT3
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PI-103对人卵巢癌细胞株SKOV3/DDP顺铂化疗效果的影响 被引量:6
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作者 刘俊 蔡云朗 +2 位作者 任慕兰 吴迪 曾娅 《东南大学学报(医学版)》 CAS 2013年第5期574-579,共6页
目的:探讨磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)双抑制剂PI-103对卵巢癌耐顺铂株SKOV3/DDP顺铂化疗效果的影响。方法:将PI-103、顺铂及两者联合分别作用于SKOV3/DDP细胞,采用CCK-8法检测细胞生长情况,流式细胞技术检测... 目的:探讨磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)双抑制剂PI-103对卵巢癌耐顺铂株SKOV3/DDP顺铂化疗效果的影响。方法:将PI-103、顺铂及两者联合分别作用于SKOV3/DDP细胞,采用CCK-8法检测细胞生长情况,流式细胞技术检测药物单独或联合作用对细胞凋亡的影响;应用Western blot检测蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)、核糖体蛋白(rpS6)、磷酸化rpS6(p-rpS6)以及凋亡相关蛋白Bcl-2与Bax蛋白表达变化。结果:PI-103能够抑制SKOV3/DDP细胞增殖,且呈浓度、时间依赖性;联合用药可以明显增加对细胞生长抑制和凋亡作用。PI-103能下调Akt和rpS6的磷酸化水平,促DDP上调Bax和下调Bcl-2的表达。结论:PI-103抑制PI3K/Akt/mTOR信号传导通路,促DDP上调促凋亡蛋白及下调抗凋亡蛋白的表达,从而抑制癌细胞生长,诱导其凋亡,增加卵巢癌耐顺铂株SKOV3/DDP细胞对DDP的化疗效果。 展开更多
关键词 PI-103 人卵巢浆液性乳头状囊腺癌顺铂耐药细胞株 磷脂酰肌醇3激酶 蛋白激酶B 哺乳动物 雷帕霉素靶体蛋白信号通路 顺铂
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基因工程腺病毒H101逆转A549/DDP细胞对顺铂耐药性的实验研究 被引量:9
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作者 徐瑞华 袁中玉 +1 位作者 管忠震 李苏 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第8期975-979,共5页
背景及目的:耐药性产生是化疗失败的主要原因之一,克服耐药性的方法之一是使用逆转剂。目前尚无一种理想的、可应用于临床的顺铂(DDP)耐药逆转剂。本研究探讨基因工程腺病毒H101对DDP耐药性的逆转作用及其机制。方法:体外利用人肺腺癌... 背景及目的:耐药性产生是化疗失败的主要原因之一,克服耐药性的方法之一是使用逆转剂。目前尚无一种理想的、可应用于临床的顺铂(DDP)耐药逆转剂。本研究探讨基因工程腺病毒H101对DDP耐药性的逆转作用及其机制。方法:体外利用人肺腺癌细胞株A549的DDP耐药模型A549/DDP,采用MTT法检测H101对A549/DDP细胞耐药性的逆转作用。用流式细胞仪(FCM)测定细胞多药耐药蛋白1(multidrugresistantprotein1,MRP1)、谷胱甘肽鄄S鄄转移酶(GST)及TOPO鄄Ⅱ蛋白表达量,荧光鄄考马斯亮蓝法检测细胞内GSH含量,原子吸收法测定细胞内铂浓度。结果:A549/DDP细胞对DDP的耐药指数为14.3。加入H101后,DDP对A549/DDP的半数抑制浓度(IC50)由352.4μmol/L降至61.6μmol/L,逆转倍数为5.7倍。FCM检测结果显示,A549/DDP细胞的GST和TOPO鄄Ⅱ蛋白水平均较A549细胞高,而两种细胞内均未检测到MRP1的表达,经H101处理后的A549/DDP细胞胞内GST蛋白和TOPO鄄Ⅱ蛋白水平均明显下降。A549/DDP胞内GSH含量比A549高2倍多;H101感染A549/DDP细胞后,胞内的GSH含量下降,随着H101剂量的增加,胞内GSH含量逐渐下降,达A549细胞内GSH水平。原子吸收法测定细胞内铂含量的结果显示,A549细胞内铂含量是A549/DDP细胞内铂含量的3倍,加入H101后,A549细胞内铂的含量无明显变化,但A549/DDP细胞内铂的含量明显增加。结论:H101能逆转A549/DDP对DDP的耐药性,H101逆转DDP耐药性的机制可能是减少A549/DDP细胞内GSH和TOPOⅡ蛋白的水平,增加了A549/DDP细胞内铂的蓄积。 展开更多
关键词 基因工程腺病毒/治疗应用 基因转染 肺肿瘤 A549/ddp细胞株 顺铂/药理学 耐药
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槐耳清膏对人肺腺癌A549/DDP细胞增殖的影响及顺铂耐药逆转作用 被引量:4
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作者 鲁明骞 卢宏达 +6 位作者 卢忠心 孔庆志 雷章 许新华小 许新华 徐冰清 郭蓉 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2016年第9期2185-2187,共3页
目的:探讨槐耳清膏对人肺腺癌A549细胞和A549/DDP细胞增殖的抑制影响及其顺铂耐药细胞A549/DDP的逆转作用。方法:以体外培养的人肺腺癌A549及A549/DDP细胞为实验模型,采用MTT法测定不同浓度槐耳清膏对A549细胞及A549/DDP细胞的增殖抑制... 目的:探讨槐耳清膏对人肺腺癌A549细胞和A549/DDP细胞增殖的抑制影响及其顺铂耐药细胞A549/DDP的逆转作用。方法:以体外培养的人肺腺癌A549及A549/DDP细胞为实验模型,采用MTT法测定不同浓度槐耳清膏对A549细胞及A549/DDP细胞的增殖抑制率,并运用流式细胞术检测顺铂联合槐耳清膏对A549/DDP细胞的变化,以及增敏作用效应。结果:槐耳清膏对A549细胞及A549/DDP细胞的增殖有明显抑制作用,随着药物浓度的增加,其抑制率逐渐增加,具有明显的量-效关系(P<0.05)。顺铂40μmol/L作用于A549及A549/DDP细胞48 h后,其凋亡率分别为(27.61±3.45)%和(17.93±1.73)%,两组间有统计学差异(P<0.01)。槐耳清膏1 mg/m L作用于人肺腺癌A549和A549/DDP细胞40 h后,再以相同浓度顺铂诱导,A549细胞凋亡率为(32.35±2.68)%,A549/DDP细胞凋亡率为(30.01±3.65)%,两组间无统计学意义,但与单独DDP作用相比,差异具有显著意义(P<0.01)。结论:槐耳清膏能显著抑制人肺腺癌A549及A549/DDP细胞的增殖,诱导细胞凋亡,还可以增加A549/DDP细胞对顺铂的敏感性。 展开更多
关键词 槐耳清膏 人肺腺癌A549/ddp细胞 细胞增殖 顺铂耐药
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黄芪多糖通过调控miR-20a/TGFBR2分子轴降低结直肠癌HT-29/DDP细胞的顺铂耐药性 被引量:13
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作者 招志辉 丘振文 招远明 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期417-425,共9页
目的:探讨黄芪多糖(APS)通过调控miR-20a/TGFBR2分子轴对结直肠癌(CRC)顺铂耐药细胞HT-29/DDP增殖、侵袭、凋亡和耐药性的影响及其机制。方法:以人CRC HT-29细胞、HT-29/DDP细胞为亲本和耐药细胞模型,将HT-29/DDP细胞随机分为4组:对照组... 目的:探讨黄芪多糖(APS)通过调控miR-20a/TGFBR2分子轴对结直肠癌(CRC)顺铂耐药细胞HT-29/DDP增殖、侵袭、凋亡和耐药性的影响及其机制。方法:以人CRC HT-29细胞、HT-29/DDP细胞为亲本和耐药细胞模型,将HT-29/DDP细胞随机分为4组:对照组、APS处理组、过表达miR-20a+APS组、沉默TGFBR2+APS组。用不同质量浓度的APS(0、0.5、1.0、1.5和2.0 mg/ml)处理HT-29/DDP细胞后,以qPCR和Wb实验检测细胞中miR-20a和TGFBR2的表达水平;用CCK-8、Transwell和Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术检测对HT-29/DDP细胞增殖、侵袭和凋亡的影响;用双荧光素酶报告基因验证miR-20a与TGFBR2的靶向作用关系。构建裸鼠皮下CRC HT-29/DDP细胞移植瘤模型,观察APS对移植瘤生长的影响及其机制。结果:APS显著抑制HT-29/DDP细胞的增殖(P<0.01),且呈剂量依赖性。miR-20a在经APS处理后的HT-29/DDP细胞中低表达(P<0.01)、TGFBR2的表达水平显著上调(P<0.01)。双荧光素酶报告基因证实miR-20a靶向作用TGFBR2并下调其表达水平。体内外实验证实APS通过靶向下调miR-20a对TGFBR2的抑制作用,提高HT-29/DDP细胞的药物敏感性,进而抑制该细胞增殖、侵袭和促进凋亡(均P<0.01);同时发现,该作用与抑制PCNA、Bcl-2蛋白而促进Bax、Caspase-3蛋白表达有关联。结论:APS通过下调miR-20a对TGFBR2表达的抑制作用,从而逆转HT-29/DDP细胞对顺铂的耐药性。 展开更多
关键词 黄芪多糖 结直肠癌 HT-29细胞 HT-29/ddp细胞 顺铂 miR-20a/TGFBR2分子轴
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Bcl-XL siRNA对肺腺癌细胞A549/DDP药物敏感性及凋亡的影响 被引量:2
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作者 黄泽香 刘丽娟 +4 位作者 姚淑琼 雷小勇 朱炳阳 唐圣松 廖端芳 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2007年第1期57-61,共5页
目的:探讨小干扰RNA沉默Bcl-XL对肺腺癌耐药细胞株A549/DDP药物敏感性的影响及其凋亡机制。方法:将Bcl-XLsiRNA质粒载体转染至A549/DDP细胞,MTT、流式细胞仪检测细胞药物敏感性的改变;丫啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色法检测细胞凋亡;RT-PCR... 目的:探讨小干扰RNA沉默Bcl-XL对肺腺癌耐药细胞株A549/DDP药物敏感性的影响及其凋亡机制。方法:将Bcl-XLsiRNA质粒载体转染至A549/DDP细胞,MTT、流式细胞仪检测细胞药物敏感性的改变;丫啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色法检测细胞凋亡;RT-PCR检测Bcl-XLmRNA水平;Western-Blot检测Bcl-XL、caspase-3蛋白表达的变化。结果:分别用0.2、2、20、200μg/mL顺铂处理细胞48 h,MTT显示转染Bcl-XLsiRNA细胞组A570吸光度值较阴性siRNA细胞组和未转染对照组明显降低,细胞生长抑制率明显增高;用20μg/mL顺铂处理细胞48 h,流式细胞仪检测,转染Bcl-XLsiRNA组凋亡率较转染阴性siRNA组和未转染组增加;AO/EB染色显示转染Bcl-XLsiRNA的细胞较转染阴性siRNA及未转染者凋亡率增加;转染Bcl-XLsiRNA降低了Bcl-XLmRNA和蛋白水平,升高了caspase-3活性形式蛋白表达。结论:Bcl-XLsiRNA特异性下调A549/DDP细胞Bcl-XL的表达,活化caspase-3蛋白,促进A549/DDP细胞凋亡,增强该肺腺瘤细胞对顺铂的敏感性。 展开更多
关键词 小干扰RNA BCL-XL A549/ddp细胞 凋亡 顺铂
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姜黄素增强卵巢癌耐药细胞株COC1/DDP对顺铂敏感性的研究 被引量:9
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作者 吕靖 英焕春 戴进 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第8期1183-1186,共4页
目的:探讨姜黄素的使用与卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1/DDP对顺铂化疗敏感性的关系。方法:采用MTT法和TUNEL法检测姜黄素、顺铂单独和联合作用时对COC1/DDP细胞增殖和凋亡的影响;RT-PCR检测上述各组细胞凋亡相关基因Bcl-2、Smac的表达。结... 目的:探讨姜黄素的使用与卵巢癌顺铂耐药细胞株COC1/DDP对顺铂化疗敏感性的关系。方法:采用MTT法和TUNEL法检测姜黄素、顺铂单独和联合作用时对COC1/DDP细胞增殖和凋亡的影响;RT-PCR检测上述各组细胞凋亡相关基因Bcl-2、Smac的表达。结果:顺铂的浓度在1.25~5μg/mL时与姜黄素合用后耐药细胞生存率下降明显(P<0.05),尤以2.5μg/mL顺铂和20μmol/L姜黄素联合作用时,耐药细胞生存率下降最明显;顺铂与姜黄素联合用药与单独用药相比,凋亡率明显增加(P<0.05);联合用药与单独用药相比Bcl-2 mRNA的表达明显降低(P<0.05),Smac mRNA的表达明显增高(P<0.05)。结论:姜黄素能够显著抑制COC1/DDP增殖,并能增强该细胞系对顺铂的敏感性,机制可能与降低Bcl-2基因的表达,增加Smac基因的表达有关。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 姜黄素 顺铂 基因 BCL-2 COC1/ddp 耐药 SMAC
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冰片对Eca109/DDP细胞耐顺铂的逆转作用 被引量:2
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作者 戴翠萍 张徐宁 +1 位作者 薛彩萍 季宁东 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1317-1319,共3页
目的观察冰片对食管癌细胞Eca109/DDP耐顺铂(DDP)的逆转作用,并探讨其机制。方法 MTT法检测冰片单用及与DDP联用对Eca109/DDP细胞增殖的影响,观察冰片对Eca109/DDP细胞耐DDP的逆转作用,计算耐药逆转指数;Western blot法检测Eca109/DDP细... 目的观察冰片对食管癌细胞Eca109/DDP耐顺铂(DDP)的逆转作用,并探讨其机制。方法 MTT法检测冰片单用及与DDP联用对Eca109/DDP细胞增殖的影响,观察冰片对Eca109/DDP细胞耐DDP的逆转作用,计算耐药逆转指数;Western blot法检测Eca109/DDP细胞P-糖蛋白(P-gp)的表达水平。结果 0.195、0.390、0.780、1.560μg/mL冰片对Eca109/DDP细胞无明显毒性作用(P>0.05),但与1μg/mL的DDP联用能浓度依赖性增加DDP对Eca109/DDP细胞的毒性(P<0.05),降低DDP对Eca109/DDP细胞的半数抑制浓度(IC50)(P<0.05),耐药逆转指数高达5.31,并能下调Eca109/DDP细胞P-gp的表达水平(P<0.05)。结论冰片能逆转Eca109/DDP细胞对DDP的耐药,其作用与下调Eca109/DDP细胞P-gp的表达有关。 展开更多
关键词 冰片 顺铂 ECA109 ddp 耐药逆转 P-糖蛋白
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MicroRNA-98对A549/DDP细胞顺铂耐药性的影响 被引量:2
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作者 向琼 唐惠芳 +4 位作者 殷杰 虞佳 杨晓燕 朱炳阳 雷小勇 《中南医学科学杂志》 CAS 2011年第3期262-265,共4页
目的探讨MicroRNA-98(miR-98)对肺腺癌耐顺铂细胞系A549/DDP顺铂耐药性的影响。方法利用MicroRNA(miRNA)芯片及生物信息学筛选出miR-98。将miR-98质粒载体瞬时转染至A549/DDP细胞;MTT检测细胞药物敏感性的改变。结果在A549/DDP细胞中miR... 目的探讨MicroRNA-98(miR-98)对肺腺癌耐顺铂细胞系A549/DDP顺铂耐药性的影响。方法利用MicroRNA(miRNA)芯片及生物信息学筛选出miR-98。将miR-98质粒载体瞬时转染至A549/DDP细胞;MTT检测细胞药物敏感性的改变。结果在A549/DDP细胞中miR-98表达水平下调。转染miR-98的A549/DDP细胞生长抑制率明显增高。结论miR-98能够增加肺腺癌耐药细胞株A549/DDP对顺铂的药物敏感性。 展开更多
关键词 MicroRNA-98 A549/ddp细胞 顺铂 耐药性
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二十二碳六烯酸逆转食管癌Eca109/DDP细胞对顺铂耐药的机制 被引量:1
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作者 张徐宁 戴翠萍 +2 位作者 夏前正 韩雪花 季宁东 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2013年第33期3695-3699,共5页
目的:构建食管癌耐药细胞株,探讨二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)逆转人食管癌Eca109/顺铂(cisplatin,DDP)细胞对DDP的耐药作用及其机制.方法:采用递增顺铂药物质量浓度持续作用诱导法建立耐顺铂细胞株;MTT法检测DHA对Eca109/... 目的:构建食管癌耐药细胞株,探讨二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)逆转人食管癌Eca109/顺铂(cisplatin,DDP)细胞对DDP的耐药作用及其机制.方法:采用递增顺铂药物质量浓度持续作用诱导法建立耐顺铂细胞株;MTT法检测DHA对Eca109/DDP细胞增殖影响,计算耐药逆转作用,Western blot检测Eca109/DDP细胞膜P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)表达水平.结果:历经6 mo的诱导,Eca109细胞能在含1 g/mL DDP的培养基中稳定生长,耐药指数(resistant index,RI)为15.9;DHA浓度在1.560 g/mL以下,对Eca109/DDP细胞的生长无显著抑制作用(P>0.05),但与DDP联合应用能增加DDP对Eca109/DDP细胞的毒性且呈浓度依赖性(P<0.05);1 g/mL DDP对Eca109/DDP细胞的半数抑制浓度(IC50)为3.50g/mL±1.04 g/mL,当分别与0.195、0.390、0.780、1.560 g/mL的DHA联合应用时,对Eca109/DDP细胞的半数抑制浓度(IC50)从1.99g/mL±0.11 g/mL降低到0.83 g/mL±0.22g/mL(P<0.05),提高逆转指数,并能显著抑制Eca109/DDP细胞P-gp表达水平,P-gp相对表达量从0.99±0.12降至0.52±0.08(P<0.05).结论:DHA与DDP联合应用通过下调Eca109/DDP细胞P-gp的表达水平逆转对DDP的耐药,促进DDP对耐药细胞的杀伤作用. 展开更多
关键词 二十二碳六烯酸 多药耐药 ECA109 ddp 顺铂 P-糖蛋白
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Bcl2-siRNA提高人肺腺癌细胞A549/DDP对顺铂敏感性的研究 被引量:4
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作者 张学林 余秉翔 《军医进修学院学报》 CAS 2012年第6期649-652,共4页
目的探讨Bcl2-siRNA对人肺腺癌顺铂耐药细胞株A549/DDP对顺铂敏感性的影响。方法在人肺腺癌顺铂耐药细胞株A549/DDP细胞中转染bcl2-siRNA,48h后加入不同浓度(0、3、6、9、12、15μg/ml)新鲜配置的顺铂溶液,药物作用48h后,用CCK-8法检测... 目的探讨Bcl2-siRNA对人肺腺癌顺铂耐药细胞株A549/DDP对顺铂敏感性的影响。方法在人肺腺癌顺铂耐药细胞株A549/DDP细胞中转染bcl2-siRNA,48h后加入不同浓度(0、3、6、9、12、15μg/ml)新鲜配置的顺铂溶液,药物作用48h后,用CCK-8法检测细胞生长抑制率。荧光实时定量PCR(Real time RT-PCR)检测A549/DDP细胞转染bcl2-siRNA后Bcl-2mRNA的变化,Western Blot检测A549/DDP细胞转染bcl2-siRNA后Bcl-2蛋白的变化。结果在A549/DDP细胞中转染bcl2-siRNA后,细胞Bcl-2 mRNA降低92.6%(P<0.05),Bcl-2蛋白表达也明显降低,同时细胞对顺铂的敏感性增加57.8%(P<0.05)。结论 Bcl2-siRNA能降低A549/DDP中Bcl-2 mRNA及蛋白的表达,增加A549/DDP对顺铂的敏感性。 展开更多
关键词 A549/ddp 小干扰RNA Bcl-2 顺铂 耐药
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PPAR-γ对人鼻咽癌CNE1/DDP细胞顺铂耐药性的逆转作用及其机制探讨 被引量:2
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作者 陈磊 郑树艳 黄永望 《山东医药》 CAS 2014年第40期10-12,15,共4页
目的观察氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)对人鼻咽癌CNE1/DDP细胞顺铂耐药性的逆转作用,并探讨其机制。方法将CNE1/DDP细胞分别加入10、20μg/mL PPAR-γ激动剂罗格列酮和等体积培养液进行培养。采用MTS法检测细胞耐药逆转率,流... 目的观察氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)对人鼻咽癌CNE1/DDP细胞顺铂耐药性的逆转作用,并探讨其机制。方法将CNE1/DDP细胞分别加入10、20μg/mL PPAR-γ激动剂罗格列酮和等体积培养液进行培养。采用MTS法检测细胞耐药逆转率,流式细胞术检测细胞凋亡率和P-糖蛋白(P-gp)表达,RT-PCR法和Western blot法检测多重耐药基因(MDR1)、多药耐药相关蛋白基因(MRP)和B淋巴细胞瘤-2基因(bcl-2)mRNA和蛋白表达,Western blot法检测磷酸化Akt蛋白(p-Akt)。结果加入等体积培养液和10、20μg/mL罗格列酮的CNE1/DDP细胞耐药逆转率分别为100.0%、149.3%±11.3%、293.8%±25.5%,其细胞凋亡率依次升高,PPAR-γ、MDR1、MRP、bcl-2 mRNA和蛋白表达以及p-gp阳性率、p-Akt表达依次降低;两两比较,P均<0.05。结论 PPAR-γ对CNE1/DDP细胞的顺铂耐药性具有逆转作用,且呈剂量依赖性;可能与其抑制Akt磷酸化和耐药基因MDR1、MRP表达,并促进细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 鼻咽癌 氧化物酶体增殖物激活受体-γ CNE1/ddp细胞 顺铂 耐药基因 细胞凋亡
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