干燥方式对山楂总黄酮含量及抗氧化性质的影响

本研究采用热风干燥、真空冷冻干燥及热风联合液氮干燥对山楂进行处理,利用亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠显色法、高效液相色谱法和自由基清除能力实验研究不同干燥方式对山楂粉样品的总黄酮得率、总黄酮组分和含量及抗氧化活性的影响。结果表明,热风干燥、真空冷冻干燥和热风联合液氮干燥的山楂粉样品色差值分别为20.60、17.70、20.05;山楂总黄酮得率分别为64.59、71.48、60.77 mg/g;对DPPH自由基清除率分别是19.56%、30.14%、18.50%;对ABTS+自由基清除率分别是51.81%、75.08%、48.68%;以及对羟自由基清除率分别是48.98%、55.77%、36.04%;真空冷冻干燥处理的山楂粉样品中总黄酮得率较高,具有较强的抗氧化活性,且与其它样品具有显著性差异(P<0.05);同时高效液相色谱对山楂总黄酮进行定性和定量分析结果表明,三种干燥方式得到的黄酮类物质均包含芦丁、金丝桃苷、杨梅素、槲皮素、芹菜素、异鼠李素,但其含量不同,真空冷冻干燥样品中总黄酮总含量达到了308.65 mg/g,与其他样品具有显著性差异(P<0.05)。除此以外,三种抗氧化方式和六种组分含量之间也存在线性关系。综上考虑,真空冷冻干燥处理山楂,是提取山楂总黄酮的推荐方法,可以有效减少对山楂的总黄酮含量及抗氧化活性的影响。

11种凤凰单丛茶中9种黄酮酚类物质的检测方法建立与分析

建立了高效液相色谱法(HPLC)同时测定凤凰单丛茶中9种黄酮酚类物质的检测方法。采用色谱柱Waters Xterra■MS C18(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈和0.02%乙酸为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温25℃,二极管阵列检测器280 nm波长检测,外标法定量。结果表明,9种黄酮酚类物质中香豆酸、绿原酸、儿茶素、芦丁和槲皮素在0.01~0.20 mg/mL,木犀草素、金丝桃苷、山奈酚和槲皮苷在0.025~0.250 mg/mL线性关系良好,相关系数(r)均大于0.999;方法检出限为0.2~1.8μg/g,定量下限为0.6~5.9μg/g。在25μg/g和250μg/g两个加标水平下,9种黄酮酚类物质的平均回收率为95.4%~104.8%,相对标准偏差RSD(n=6)均小于5%。该方法操作简便、快速、准确,适合于黄酮酚类物质的定性与定量检测。

玉米须总黄酮含量检测络合显色体系的比较

采用紫外可见分光光度法建立最适合玉米须总黄酮(Corn Silk Total Flavonoids,CSTF)含量检测的络合显色体系。实验选用体积分数60%乙醇为溶剂对CSTF进行提取,并以不同极性溶剂对CSTF进行分级萃取,最终获得正己烷(Normal Hexane,n-Hexane)、乙酸乙酯(Ethyl Acetate Extracts,EAE)和正丁醇(Bormal Butanol,n-BuOH)萃取物。以玉米须中不同类型黄酮为对照品,比较研究NaNO_(2)-Al(NO3)3/AlCl3-NaOH和KAc-Al(NO3)3/AlCl3四种络合显色体系下乙酸乙酯和正丁醇萃取物中总黄酮含量。同时采用高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)对乙酸乙酯和正丁醇萃取物中黄酮含量进行测定,从而确定最适合的对照品种类和显色体系。结果表明,HPLC法检测乙酸乙酯和正丁醇中黄酮含量分别为83.45%和57.36%,经比较研究发现,与HPLC法检测总黄酮含量最接近的是以芦丁为标准品的KAc-Al(NO3)3络合显色体系。综上所述,KAc-Al(NO3)3络合显色体系是玉米须和各萃取物总黄酮含量检测的最佳方法,该方法检测CSTF提取液黄酮含量为1.08%。该方法操作简便、准确度高,可为玉米须黄酮类物质的开发利用和质量管控提供依据。

诺丽果黄酮对高精料底物条件下绒山羊体外瘤胃发酵的影响

本试验旨在从诺丽果多酚(NFP)和诺丽果黄酮(NFF)中筛选出具有调控高精料底物条件下绒山羊体外瘤胃发酵的诺丽果提取物,并确定其适宜添加剂量,为绒山羊绿色饲料添加剂的开发及诺丽果资源的合理利用提供理论支撑。本试验以阿尔巴斯白绒山羊为瘤胃液供体动物,分两部分进行体外瘤胃发酵试验。第1部分:以白藜芦醇(RSV)为阳性对照,采用单因素完全随机试验设计,设4个处理,分别以高精料饲粮(精料∶粗料=65∶35)以及在高精料饲粮中添加0.25%NFP、0.25%NFF、0.02%RSV为底物进行体外瘤胃发酵,每个处理6个重复。第2部分:采用单因素完全随机试验设计,设5个处理,分别以添加0、0.025%、0.050%、0.100%和0.250%NFF的高精料饲粮为底物进行体外瘤胃发酵,每个处理6个重复。第1部分结果表明:NFF促进瘤胃发酵的多项组合效应值(MFAEI)最高,且其在缓解发酵液pH下降、降低发酵液中乳酸和组胺(HIS)浓度以及提高氮利用效率方面的调控作用均优于NFP。因而,筛选出NFF为对绒山羊体外瘤胃发酵具有较好调控作用的诺丽果提取物进行后续试验。第2部分结果表明:高精料底物中添加0.100%NFF时促进瘤胃发酵的MFAEI最高,同时其可显著降低体外发酵液中异常代谢物HIS和脂多糖(LPS)的浓度(P<0.05),并显著缓解高精料底物条件下pH的下降(P<0.05)。综上可知,NFF具有较好的促进绒山羊体外瘤胃发酵的效果,其在高精料底物中的适宜添加剂量为0.100%。

中高温大曲发酵中小麦籽粒营养组分的动态变化分析

该研究利用离子色谱和高效液相色谱等方法,研究了中高温大曲不同发酵时期小麦营养成分的变化及其与微生物群落演替间关系。结果表明,曲皮和曲心分别消耗了直链淀粉含量的39.08%和49.12%,支链淀粉含量的84.43%和81.35%,A型淀粉粒的6.41%和26.92%,B型淀粉粒的66.67%和83.33%。麦谷蛋白含量从8 mg/g降为4.73 mg/g(曲皮)和3.53 mg/g(曲心)。黄酮含量从0.08 mg/g增加到0.12 mg/g(曲皮)和0.29 mg/g(曲心)。纤维素含量总体呈下降趋势,但曲心后期有平缓上升;阿拉伯糖和蔗糖含量增加,葡萄糖含量降低。曲心游离氨基酸含量增加幅度高于曲皮,其中谷氨酸含量最高。冗余分析表明18个品质指标与9个细菌属和11个真菌属的相对丰度显著相关(P<0.05),其中直链淀粉含量与叶杆菌属(Phyllobacterium),葡萄糖、果糖、支链淀粉含量与醋酸单胞菌属(Acetobacter)、双杆菌属(Undibacterium)、乳杆菌属(Lactobacillus)均显著正相关。因此,具有高支链淀粉和高葡萄糖含量的小麦品种可能更适用于制曲。该研究结果为探究大曲质量控制、小麦品质与大曲品质间关系,以及选育专用型原料(小麦)品种提供参考。

高效液相色谱法分析山楂中的四种黄酮成分

建立了山楂中四种黄酮成分(芦丁、牡荆素、金丝桃苷和槲皮素)的高效液相色谱分析方法。采用Agilent 5 TC-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈(A)和0.2%醋酸水溶液(B),流速为1 mL/min,进样量为10μL,检测波长为355nm,柱温为40℃。线性梯度洗脱程序:0~15min,20%~30%A;15~30min,30%~60%A。四种成分线性关系良好;日内精密度保留时间RSD均<0.5%,峰面积RSD均<2.5%;日间精密度保留时间RSD均<0.5%,峰面积RSD均<5.0%;平均加样回收率为103.4%~106.7%,RSD均<2.5%。60%乙醇为最佳提取溶剂。6批山楂样品中芦丁和金丝桃苷的含量范围分别为51.8~264.5μg/g和148.0~441.6μg/g,槲皮素只在两批样品中检出,分别为11.0μg/g和12.7μg/g,牡荆素在所有山楂样品中均未检出。

不同品种生菜的多酚、黄酮差异比较与抗氧化活性

生菜富含多种酚酸、黄酮类化合物,是获取膳食多酚的良好食物来源。本研究对50个不同品种(34种绿色品种和16种红色品种)生菜中的总酚、总黄酮含量及其抗氧化能力进行测定,同时采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法和超高效液相色谱法对生菜中17种特征酚酸和黄酮类化合物进行鉴定及含量测定,再结合多元统计分析进行分类和相关性分析。结果表明,红色品种生菜的总酚、总黄酮含量及抗氧化能力高于绿色品种生菜;50种生菜中鉴定出绿原酸、咖啡酸、异绿原酸A/B、菊苣酸、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、槲皮素-3-O-葡萄糖酸苷和槲皮素-3-O-葡萄糖苷7种多酚类化合物,整体在红色品种生菜中含量更高。多元统计分析结果表明绿原酸、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷和槲皮素-3-O-葡萄糖苷与抗氧化能力的相关性较高。综上,G21K104、W3088、H20K6457等5个红色新品种及商业种,G21K212、G21K117等4个绿色新品种为高抗氧化活性生菜品种。本研究可为生菜育种、种质资源创新和营养健康、功能性产品开发提供参考依据。

食品中黄酮类化合物检测技术研究进展

黄酮类化合物是一类具有苯并吡喃骨架的多羟基芳香化合物,在食品、药物、保健品等领域具有重要的研究意义和应用价值。本文将对黄酮类化合物的前处理提取方法和检测方法的原理、优缺点和应用进行综述,以期为相关检测人员提供技术指导。

花生茎叶中黄酮类化合物的高速逆流色谱分离与助睡眠活性分析

开展花生茎叶中黄酮类化合物的高效分离与活性分析研究。采用高速逆流色谱技术进行分离纯化,并结合分子对接技术评价其助睡眠活性。筛选最佳溶剂体系为正己烷/乙酸乙酯/甲醇/水(5∶5∶2∶8,5∶5∶3∶7,5∶5∶5∶5,v/v),通过梯度洗脱分离得到两种化合物,经质谱和核磁结构鉴定为大豆苷元和芒柄花黄素。采用分子对接分析大豆苷元和芒柄花黄素对失眠相关的两种蛋白受体(GABRA1和FOS)均有较好的亲和力,相互作用力主要为氢键,两种化合物具有助睡眠的潜在活性。建立了花生茎叶中大豆苷元和芒柄花黄素的高速逆流色谱分离方法,采用分子对接证实两种化合物具有助睡眠的潜在活性,为花生茎叶中化学成分的分离及进一步开发助睡眠活性化合物提供了参考。

米糠油中呈色物质的分离和鉴定

米糠油的色泽是影响其品质的因素之一。该研究对米糠油中呈色物质的提取方法进行优化,并利用高效液相色谱串联质谱法对呈色物质进行分离和鉴定。以甲醇∶水(8∶2,体积比)为萃取剂,用液液萃取法提取米糠油中的强极性呈色物质,然后将样品皂化后利用正己烷提取弱极性呈色物质。强极性和弱极性提取液经质谱分别鉴定出9类物质,共37种,其中强极性提取液中二氢异黄酮类含量最多,弱极性提取液中二氢黄酮醇类为主要化合物。

HPLC测定万寿菊发育过程中不同部位黄酮含量变化

建立一种高效液相色谱(HPLC)方法,对不同发育时期的万寿菊花、叶、茎、根中的8种黄酮成分进行测定。结果表明:(1)建立的高效液相色谱方法精密度、重复性及稳定性良好,可用于万寿菊中黄酮成分含量的测定。(2)万寿菊各部位的黄酮含量差异显著,总量对比为花>叶>茎>根。(3)槲皮万寿菊苷和槲皮万寿菊素是花的主要黄酮成分,而根、茎、叶的主要黄酮成分分别为槲皮万寿菊素、槲皮万寿菊苷和山奈苷。(4)随着生长发育,万寿菊花中总黄酮含量呈先上升后下降的趋势,在半开花蕾期最高;根、茎、叶中黄酮总量整体呈下降趋势,均在幼苗期最高。该研究建立了一种同时测定万寿菊中8种黄酮成分的HPLC检测方法,确定了万寿菊的主要黄酮成分为槲皮万寿菊素,且半开花蕾期的花中含量最高,适用于大量提取万寿菊黄酮。该结果为万寿菊的进一步合理开发与综合利用提供了参考依据。

竹叶提取物中7种黄酮成分含量测定及抗氧化分析

为研究不同竹叶提取物中黄酮成分含量及其与抗氧化活性之间的关系,以2种市售竹叶提取物以及以毛竹等7种竹种的竹叶为材料制备的竹叶提取物共9个样品为研究对象,建立了同时测定竹叶提取物中7种黄酮成分(荭草苷、异荭草苷、牡荆苷、异牡荆苷、苜蓿素、木犀草素和木犀草苷)的高效液相色谱(HPLC)方法,采用SymmetryShield TM RP8色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈为流动相A,0.5%(v/v)乙酸水溶液为流动相B进行梯度洗脱。采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)和羟基自由基清除试验评价竹叶提取物的抗氧化活性,以半抑制浓度(IC_(50))为评价指标,以抗氧化剂2,6-二叔丁基对甲酚(BHT)和叔丁基对苯二酚(TBHQ)为阳性对照,并利用Person相关性分析各黄酮成分含量与抗氧化的关系。结果表明:建立的HPLC测定方法准确可靠,适用于竹叶提取物中黄酮含量的测定。竹叶提取物中7种黄酮含量在14.97~183.94 mg/g范围内,毛竹中7种黄酮总含量最高,为183.94 mg/g。不同竹种间7种黄酮成分的含量存在显著差异,荭草苷、异荭草苷和牡荆苷含量均在毛竹中最高,分别为38.45、101.30和9.42 mg/g。竹叶提取物清除DPPH自由基的IC_(50)值在78.23~179.41 mg/L范围内,清除羟基自由基的IC_(50)值在203.48~1250.81 mg/L范围内。毛竹叶提取物清除DPPH和羟基自由基的IC_(50)值分别为78.23 mg/L和203.48 mg/L,其抗氧化活性最强,具有开发应用价值。相关性分析结果表明,荭草苷、异荭草苷含量与竹叶提取物抗氧化活性密切相关。

响应面法优化黄芩茎叶黄酮类成分提取工艺及其含量测定

采用单因素和响应面试验考察乙醇浓度、料液比、提取时间和提取温度对黄芩茎叶中黄酮成分提取量的影响;在此基础上,采用HPLC法测定了17个黄芩茎叶中黄酮成分的含量。结果表明,黄芩茎叶中黄酮成分的最佳提取工艺为乙醇浓度55%、料液比1∶50、提取时间60 min、提取温度50℃,应用最佳提取工艺黄酮成分提取量为24.43 mg/g;不同产地黄芩茎叶中黄酮成分的含量存在差异,含量范围为15.839~26.044 mg/g。响应面法优化黄芩茎叶中黄酮成分的提取工艺稳定、准确可靠,所建立的黄酮成分含量测定方法稳定可靠,可为黄芩茎叶的质量评价及深度开发研究提供参考。

胡麻籽饼粕黄酮的降脂降糖效果的研究

目的:探究胡麻籽饼粕黄酮对高脂膳食小鼠体内血糖血脂代谢异常的影响。方法:体外实验部分,分析胡麻籽饼粕黄酮对超氧自由基的清除作用、对α-葡萄糖苷酶活性和α-淀粉酶活性抑制作用;动物实验部分,将40只昆明小鼠随机均分为4组,正常对照组(CON)、高脂膳食组(HF)、低剂量黄酮组(LH)和高剂量黄酮组(HH);持续饲喂5周后,分析小鼠血糖、血脂、抗氧化酶水平的变化。结果:胡麻籽饼粕黄酮对超氧自由基有较强的清除效果,对α-葡萄糖苷酶活性和α-淀粉酶活性有较好的抑制效果;高脂膳食饲喂导致小鼠体内血糖、血脂水平的异常,降低抗氧化酶活力;胡麻籽饼粕黄酮能够显著提高小鼠体内抗氧化酶活力,并显著改善血脂水平和血糖浓度异常。结论:胡麻籽饼粕黄酮具有改善高脂膳食导致的小鼠机体血糖血脂代谢异常的作用,降低机体氧化应激。

微波辅助法提取橘红、化橘红中黄酮类成分的方法研究

以总黄酮类成分提取率作为评定指标,采用单因素法优化微波辅助法提取中药化橘红和橘红中的黄酮类化合物的提取条件。使用高效液相色谱检测柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、川皮苷和桔皮素5种单体黄酮成分。优化后的提取条件为微波功率1200 W,乙醇体积分数80%,料液比1∶30,提取温度90℃,提取时间15 min。在最优条件下,化橘红和橘红中总黄酮提取率分别为31.02~33.51 mg/g和24.26~30.75 mg/g。结果显示:化橘红、橘红样品中均检测到柚皮苷,柚皮苷含量最高可达0.50 mg/g;均未检测到桔皮素成分;部分化橘红、橘红样品中检测到橙皮苷、新橙皮苷成分。为化橘红和橘红中黄酮类化学成分的提取研究提供了方法参考,也为化橘红和橘红的质量评价提供了数据参考。

黄芩不同炮制品黄酮类成分的整合药动学研究

目的:比较黄芩炮制品中8种黄酮类成分在大鼠体内含量的差异,探明黄芩不同炮制品的药动学行为的差异,为其炮制原理的阐明提供科学依据。方法:选取20只SD大鼠随机分为空白组、生黄芩、酒黄芩和黄芩炭4组,每组5只,灌胃给药。以山柰素为内标,采用超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱法(UPLC-QQQ-MS/MS)测定不同时间点大鼠血清中黄芩苷、5,7,2′,5′-四羟基-8,6′-二甲氧基黄酮(HQ-6)、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、白杨素、5,6-二羟基-7,8,2′,6′-四甲氧基黄酮(HQ-2)、千层纸素-A等的浓度,利用各成分药-时曲线下面积(AUC_(0→∞))百分比作为自定义权重系数,计算在大鼠体内的综合血药浓度并建立整合药物代谢动力学(药动学)模型,比较黄芩炮制品中黄酮类成分的整合药动学参数的差异。结果:单成分的AUC_(0→∞)差异较大;多成分整合药动力学结果显示,黄芩酒炙后,8种黄酮类成分的滞留时间(MRT_(0→∞))由17.22 h缩短为13.13 h。首次达峰时间(T_(max))由0.50 h缩短为0.25 h,2次(T_(max))由4 h延长为8 h。黄芩炒炭后,黄芩炭的多成分整体的MRT_(0→∞)为10.07 h,与酒黄芩比较,差异无统计学意义(P>0.05)。黄芩炭存在0.25、1、2 h,3次达峰。结论:该方法专属性强、灵敏度高,可作为大鼠血清中8种黄酮类成分的同步检测及其药动学研究的方法,进一步诠释了黄芩“酒炙增效,炒炭存性”的科学内涵。

沙棘果皮渣总黄酮的纯化、成分分析及对胰脂肪酶的抑制作用

为了明确沙棘果皮渣中总黄酮纯化物(TFSE)对胰脂肪酶的抑制作用,本文通过静态及动态吸附解析实验,优化了AB-8大孔树脂纯化沙棘果皮渣总黄酮粗提物(TFCE)的条件;采用超高效液相色谱-高分辨质谱联用技术(UPLC-Q-MS)分析TFSE组成成分;对硝基苯基丁酸酯法结合酶反应动力学探究TFSE对胰脂肪酶抑制效果及抑制类型。结果表明,AB-8大孔树脂最佳纯化条件为上样液浓度2.2 mg/mL、上样液pH 5.0、上样体积140 mL,上样流速1.0 mL/min;洗脱液乙醇体积分数75%、洗脱剂用量120 mL、洗脱流速1.5 mL/min,在此条件下分离纯化,TFSE纯度由9.786%提高到50.204%;从TFSE中鉴定出39种酚类化合物,以芦丁、儿茶素、槲皮素-3-O-葡萄糖苷等黄酮类化合物为主;TFSE对胰脂肪酶有较好的抑制作用,其IC_(50)值为12.46 mg/mL,并通过Lineweaver-Burk双倒数作图法测出其抑制类型为非竞争性抑制,抑制常数Ki=10.21 mg/mL。TFSE具有良好的胰脂肪酶抑制活性,对于提高沙棘果皮渣产品的附加值具有重要意义。

我国高类黄酮(红皮与红肉)苹果育种取得突破性进展

“医食同源,吃营养,吃健康”已经成为人们的共识。针对我国苹果产业品种单一、特色多样化品种严重不足、主栽品种’红富士'果实着色、风味品质及结果习性等性状需要进一步改良、苹果育种特别是红肉苹果育种周期长、缺乏优异种质等问题,系统介绍了以“高类黄酮(红皮与红肉)”为主线,以新疆红肉苹果挖掘与创新利用为研究重点,在品质形成与芽变机理、红肉苹果优异种质创制、高效育种技术创建、特色多样化新品种培育及其配套高效栽培技术创新等方面取得的最新研究进展及其成果,旨在为其他野生果树资源的评价挖掘与创新利用提供参考。

‘红富士’与新疆红肉苹果的评价挖掘及创新利用——培育幸福美满,助力健康中国,服务乡村振兴

"医食同源,吃营养,吃健康"已经成为人们的共识。针对我国苹果产业特色多样化品种严重不足等问题,以高类黄酮(红皮与红肉)苹果为主线、新疆红肉苹果挖掘与创新利用为研究重点,采用"理论与技术创新并重及良种良法配套"的研究思路,创建了优质高效育种技术体系,育成了"幸福美满"等高类黄酮苹果新品种,营养保健价值高,鲜食品质优良,易着色,可免套袋,市场前景广阔;提出了新品种配套栽培与加工技术,为新品种的大面积推广应用提供了技术支撑,形成了"理论、技术、品种和产品"的系统创新成果,助力健康中国,服务乡村振兴。

水母雪莲的细胞培养和高产黄酮细胞系的筛选

用水母雪莲（ＳａｕｓｕｒｅａｍｅｄｕｓａＭａｘｉｍ．）的茎和叶片作外植体，在ＭＳ附加０．５ｍｇ／ＬＢＡ、２ｍｇ／ＬＮＡＡ的培养基上诱导愈伤组织，并研究了不同培养基、植物激素、培养温度以及苯丙氨酸对固体培养细胞生长和黄酮形成的影响。结果表明：ＭＳ培养基附加２ｍｇ／ＬＮＡＡ，在２５℃利于细胞生长；苯丙氨酸对细胞生长未见有促进作用，但有利于细胞中黄酮的形成。用目视法直接挑选两种不同次生代谢能力的细胞系：浅黄色系（Ａ系）和红色系（Ｂ系）。用快速灵敏的紫外分光光度和高效液相法，测得离体培养细胞Ａ系中总黄酮的含量为１．９％，ｊａｃｅｏｓｉｄｉｎ的含量为０．４２％，分别是Ｂ系中的２．３倍和３．９倍，是原愈伤组织中的２．６倍和４．２倍。